【飞诺美色谱】人血中水溶性维生素的检测

艾杰尔飞诺美

2024/07/03 18:34

TA的动态

一、临床意义

所有水溶性维生素都参与催化功能，B 族维生素是许多种辅酶的组成成分，这些辅酶担负着氢、电子或基团的

转移。它们参与由酶催化的糖、脂肪、蛋白质及核苷酸等的代谢，维生素 C 参与许多羟化反应。

二、实验目的

建立水溶性维生素的固相萃取技术搭配 LC-MS/MS 的检测方法，满足临床检测的基本需求。

三、前处理过程

固相萃取产品：水溶性维生素专用板

标准品配置过程：标准样品配置方法：预备 1 mg/mL 的各个水溶性维生素标准储备水溶液。对于维生素 B2、

B7 和 B9，加入 200μL 1 N NaOH 进行溶解。将维生素 C 溶解在低 pH 的醋酸盐缓冲液中以提高其稳定性。使用这些单独的储液制成混合储液，具体操作为加入 1.25 mL 维生素C 储液以及其他储液各 0.025 mL，然后用水稀释至 25 mL。将此混合储液( 50 ppm 维生素C，1 ppm 其他分析物)进一步稀释，得到表 2 所列出的 11 种校准标准品。（维生素 C 不稳定，需要当天使用当天配置）

样品制备过程：用移液枪准确吸取 100μL 血清样本于 2ml 离心管中，加入 600μL 甲醇、10ul 抗氧化剂涡旋混

合 1min，8000r/min 离心 5min，取上清液待净化。取水溶性维生素专用板，加入待净化上清液，用正压装

置将板中的样品压下，流速控制在 2~3 秒/滴，待液滴流尽后继续保持 1min。

浓缩：在 37℃条件下，氮气吹干，用初始比例的流动相复溶，待检测。

四、检测条件

4.1 色谱条件

色谱柱： Venusil MP C18（3.0*50 mm, 3μm, 100 Å）

流动相A：10mM 乙酸铵 0.75%甲酸水 (%)

流动相B：10 mM 乙酸铵 0.75%甲酸甲醇 (%)

流速：600 μL/min；

柱温：30 ℃；

进样量：10 μL；