近些年微生物技术发展迅猛，在发酵制药生产中发挥的作用也越来越大，而且对全世界范围内
的医疗事业和环境保护都有着积极意义，成为一种安全有效地生产价格低廉、纯净的生物制药的新
途径。
发酵完成后，发酵产物存在于发酵液中，包括菌体细胞、蛋白、糖、水等，提取产物成了一项
非常重要的任务，下面分享一下提取发酵液中产物的一点经验。
样品处理：
1. 发酵液调酸，析出大部分蛋白（产物不怕酸的前提下，也可其他方法除蛋白）；
2. 离心，过滤，除掉大部分菌体细胞和蛋白。
样品分析条件：
色谱柱：Luna C18（2） 5μm 100Å 4.6×150mm
流动相：A：水（0.1%TFA）
B：乙腈
流速：1mL/min
波长：215nm
样品制备条件：
仪器：Cheetah 制备纯化系统
色谱柱：Flash AQ C18 20-35μm 100Å 80g 一支
流动相：A：水（0.1%TFA）
B：乙腈
流速：50mL/min
波长：215nm，235nm
上样量：1.3L（3.73g）
总结：
1. 发酵液中成分复杂，容易污染制备色谱柱，因此，我们选择 Flash 大颗粒填料制备柱；
2. 提前除去大部分蛋白，以免进样后析出，堵塞柱筛板；
3. 发酵液为水样，直接上样会造成 C18 填料疏水塌陷，出现不保留，因此我们选择 AQ C18
亲水 Flash 柱，可纯水相洗脱，直接泵抽上样，只要目标产物有保留，上样体积可达 6
倍柱体积以上。
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