摘要：本实验建立了动物源性食品中 9 种β-受体激动剂的前处理方法，采用 Agela 新产品
Cleanert® LipoNo 结合液相色谱串联质谱的检测方法，对猪臀肉、牛腿肉和羊腿肉中的β-
受体激动剂进行了测定。样品经提取和酶解处理后，用 Cleanert® LipoNo 进行净化，Kinetex
F5(2.6 µm，3.0 × 50mm)色谱柱进行检测，内标法定量。结果表明，当加标量为 5 µg/kg 时，
回收率在 70% ~ 100%之间，能够满足检测要求。
关键词：动物源性食品；β-受体激动剂；Cleanert® LipoNo；Kinetex F5
样品信息
表 1. 9 种β-受体激动剂样品信息
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
AB SCIEX API 4000+液相色谱串联质谱仪（LC-MS/MS）。
试剂材料
乙腈、乙酸铵均为色谱纯；乙酸、氨水、无水硫酸镁为分析纯；
2 mol/L 乙酸铵溶液（pH 5.2）：称取 15.4 g 乙酸铵，加水溶解并定容至 100
mL，用乙酸调节 pH 至 5.2；
9 种 β-激动剂混合标准溶液；
沙丁胺醇-D3、克伦特罗-D9 混合内标溶液：其中沙丁胺醇-D3 作为沙丁胺
醇、特布他林和莱克多巴胺的内标物质，其余物质均用克伦特罗-D9 作为内标物
质；
β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶：94550 units/mL；
Cleanert® LipoNo（P/N：MS-LN0415）。样品制备
样品提取
称取 2.0 g 已均质好的样品，加入 0.05 µg/mL 混合内标溶液 0.1 mL，再加入
8 mL 2 mol/L 乙酸铵缓冲液（pH 5.2）和 40 μL 酶解液，涡旋混匀 1 min，37℃水
浴酶解 12 小时，取出冷却至室温，加入 10 mL 1%氨水乙腈（V/V）和 1.5 g 无
水硫酸镁，手动振摇 1 min，8000 r/min 离心 5 min。
样品净化
将全部上清液转移至 Cleanert LipoNo 净化管(P/N：MS-LN0415)中，手动振
摇 1 min。静置 1 min 后移取 5 mL 上清液于 45℃下氮吹至干，残渣加 0.1%甲酸
复溶，经 0.22 μm 尼龙针式过滤器过滤，待检测。
实验条件
色谱条件
色谱柱：Kinetex F5，2.6 µm，3.0 × 50 mm；
柱温：35℃；
流速：0.4 mL/min；
样量：10 µL；
流动相 A：0.1%甲酸水溶液（V/V）；流动相 B：0.1%甲酸乙腈（V/V）；
梯度条件：见表 1。
表 1. 梯度条件
质谱条件
离子源：ESI+；电喷雾电压：5500V；雾化气压力：50 psi；气帘气压力：
10 psi；辅助气压力：60 psi；离子源温度：550℃；采集方式：多反应监测(MRM)
表 2. 质谱参数
实验结果
由表 3 可知，采用 Cleanert LipoNo 结合 LC-MS/MS 的方法检测猪臀肉、牛
腿肉和羊腿肉中 9 种 β-受体激动剂，加标回收率在 70% ~ 100%之间，能够满足
检测要求。由色谱图可知，用 Kinetex F5 检测 9 种 β-受体激动剂，峰形良好且保
留时间稳定。
表 3. 9 种 β-受体激动剂加标回收实验结果(n=3，添加水平 5 µg/kg)
实验谱图
图 1. 混合标准工作溶液色谱图
图 2. 牛肉基质混合标准工作溶液色谱图
图 3. 牛腿肉基质空白色谱图
图 4. 5 µg/kg 牛腿肉基质加标色谱图
图 5. 猪臀肉基质空白色谱图
图 6. 猪肉基质混合标准工作溶液色谱图
图 7. 5 µg/kg 猪臀肉基质加标色谱图
图 8. 羊腿肉基质混合标准工作溶液色谱图
图 9. 羊腿肉基质空白色谱图
图 10. 5 µg/kg 羊腿肉基质加标色谱图
结论
本实验建立了动物源性食品中 9 种 β-受体激动剂的前处理方法，用 Cleanert®
LipoNo 结合 LC-MS/MS 对加标量为 5 µg/kg 的样品进行了测定，加标回收率均
在 70% ~ 100%之间，且 RSD 小于 15%，可以满足检测要求，且净化效果良好。
说明 Cleanert® LipoNo 可以用于动物源性食品中 9 种 β-受体激动剂的检测。
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