类固醇激素是一类脂溶性小分子激素,是由胆固醇经一系列酶催化而来,可分为肾上腺 皮质激素和性激素两类,在维持机体正常内分泌,调节性功能、机体发展、免疫调节及 生育控制方面有明确的作用。人体内类固醇激素的升高或者降低与一些临床疾病,如, 先天肾上腺增生、多囊卵巢综合症、内分泌紊乱、肾上腺皮质功能及 (3,17 和 21) 羟化 酶缺乏症等息息相关。各个类固醇激素作为代谢网络中的节点相互影响,如能详尽表征 代谢网络上下游中各激素的含量变化情况,对临床疾病的确诊、机体内分泌状态的监控 等具有种重要意义。
准确量取 200 μL 样品于 1.5 mL 塑料离心管中 ,加入 20 μL 同位素内标混合工作溶,200 μL 甲醇, 涡旋 1 min,加入 200 μL 水,涡旋 1 min ,10000 rpm 离心 5 min,取上层溶液待用。
前处理耗材:Cleanert PEP 96 Well Microplates (2 mg/mL) 货号:PE00201-MW
活化:依次加入 200 μL 甲醇,200 μL 水进行活化 上样:350 μL 预处理后的上清液
淋洗:依次用 200 μL 10 % 乙腈水溶液和 200 μL 正己烷进行淋洗
洗脱:加入30 μL洗脱溶剂进行洗脱,收集洗脱液,用10 %乙腈水溶液稀释至200 μL,混 匀待测。
规格:3.0×100 mm ,2.6 μm 货号:00D-4462-Y0
流动相:A:0.5 mM 氟化铵水溶液 B:甲醇,洗脱流程如表 1
检测方式:分时间窗口 (schedule),多反应监测 (MRM) 离子源温度 (TEM):600℃
辅助气 (Gas2):60 psi 气帘气 (Gurtain Gas):5 psi
电喷雾电压:5500V(+)/ -4500V(-)