概述
本实验使用Rezex ROA-Organic Acid,7.8×300mm色谱 柱,参照中国药典2020版四部海藻糖含量测定项下的分 析方法,以水为流动相,采用RI检测器对麦芽三糖与海 藻糖和葡萄糖混合对照溶液进行分析,实验结果表明, 混合对照溶液中海藻糖与麦芽三糖和葡萄糖峰分离度均 大于1.5,可实现有效分离。
关键词
麦芽三糖;海藻糖;葡萄糖;Rezex ROA-Organic Acid;
实验部分
3.1仪器、试剂与材料
3.1.1主要仪器设备
Thermo U3000高效液相色谱仪,配备RI检测器;
3.1.2试剂材料
实验用水为屈臣氏蒸馏水;
混合对照溶液:称取麦芽三糖与海藻糖和葡萄 糖对照品,加水溶解并稀释制成每1.0 mL中约 含麦芽三糖2.5 mg,海藻糖10 mg,葡萄糖2.5 mg的溶液,经0.45μm 尼龙针式滤器过滤,取 续滤液作为混合对照溶液。
麦芽三糖对照品溶液:称取麦芽三糖对照品, 加水溶解并稀释制成每1.0 mL中约含2.5 mg的溶 液,经0.45μm 尼龙针式滤器过滤,取续滤液作 为麦芽三糖对照品溶液。
海藻糖对照品溶液:称取海藻糖对照品,加水 溶解并稀释制成每1.0 mL中约含10 mg的溶液, 经0.45μm 尼龙针式滤器过滤,取续滤液作为海 藻糖对照品溶液。
葡萄糖对照品溶液:称取葡萄糖对照品,加水 溶解并稀释制成每1.0 mL中约含2.5 mg的溶液, 经0.45μm 尼龙针式滤器过滤,取续滤液作为葡 萄糖对照品溶液。
3.2仪器检测条件
色谱柱:Rezex ROA-Organic Acid, 7.8×300mm;
流动相:水;
流 速:0.4 mL/min;
柱 温:80 ℃;
检测器:RI示差检测器;
检测池温度:50℃;
进样量:20 μL。
3.3实验结果
3.4实验谱图
图1. 混合对照溶液色谱图
图2. 麦芽三糖对照品溶液色谱图
图3. 海藻糖对照品溶液色谱图
图4. 葡萄糖对照品溶液色谱图
结论
使用Rezex ROA-Organic Acid,7.8×300mm色谱 柱,以水为流动相,采用RI检测器对麦芽三糖与海藻 糖和葡萄糖进行分析,由表1可知,混合对照溶液中 海藻糖与麦芽三糖和葡萄糖峰分离度分别为3.29和 6.01,可实现有效分离。
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