方案摘要
方案下载应用领域 | 制药/生物制药 |
检测样本 | 预防类生物药品 |
检测项目 | 限度检查>制药用水的电导率 |
参考标准 | 2010版《中国药典》 |
造成细胞污染的因素不单单是微生物,培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以生存的主要环境,营养物质和代谢产物都必须溶解在水中,才能为细胞吸收和排泄。对于体外培养的细胞来说,水是细胞培养液和试剂中简单、但也是重要的组分。所以,细胞培养对水的质量要求较高,培养用水中如果含有一些杂质,即使含量微少,有时也会影响细胞的存活和生长,甚至导致细胞死亡。
细胞体外培养用水中水的质量要求
提起细胞体外培养实验,每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧,
细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。
明明小心翼翼的操作,
细胞总会莫名其妙的被污染了!
莫名其妙的挂掉啦!
到底怎么回事呢?
其实造成细胞污染的因素不单单是微生物,培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以生存的主要环境,营养物质和代谢产物都必须溶解在水中,才能为细胞吸收和排泄。对于体外培养的细胞来说,水是细胞培养液和试剂中简单、但也是重要的组分。所以,细胞培养对水的质量要求较高,培养用水中如果含有一些杂质,即使含量微少,有时也会影响细胞的存活和生长,甚至导致细胞死亡。
水中的杂质对水质有不同影响:
1.离子——平衡渗透压;一些重金属 (Cadmium)对细胞毒害大,即便剂量很低 (< 0.1 ppb);
2.微生物——污染,改变微环境如pH,影响增殖,死后释放内毒素等;
3.内毒素——改变细胞外形、活化细胞、促进或抑制细胞分裂、影响细胞附着等;
4.有机物——影响细胞的生长状态。
水质评价常用的指标:
1. 电阻率(electrical resistivity)
衡量实验室用水导电性能的指标,单位为MΩ•cm,随着水内无机离子的减少电阻数值逐渐变大。
2. 异体菌落数(Heterotrophic bacteria count,HBC)
衡量实验室用水微生物的指标,单位为cfu/mL。
3. 有机物(Total Organic Carbon ,TOC)
水中碳的浓度,反映水中可氧化的有机化合物的含量,可间接反映出水中细菌和内毒素含量的高低。单位为ug/L或ppb。
4. 内毒素(Endotoxin)
革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片,又称之为“热原”,单位EU/mL。
参考国际标准化组织的实验室纯水规范ISO3696,美国CLSI和ASTM D1193的试剂纯水规范,我国GBT6682和GBT 30301的试验用水指导,《实验细胞资源的描述标准与管理规范》用水指导,结合多年的实验操作经验,总结出细胞培养用水对水质的要求。
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