细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始！

2023/07/20   下载量： 0 次

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 预防类生物药品
检测项目 限度检查>制药用水的电导率
参考标准 2010版《中国药典》

造成细胞污染的因素不单单是微生物，培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以生存的主要环境，营养物质和代谢产物都必须溶解在水中，才能为细胞吸收和排泄。对于体外培养的细胞来说，水是细胞培养液和试剂中简单、但也是重要的组分。所以，细胞培养对水的质量要求较高，培养用水中如果含有一些杂质，即使含量微少，有时也会影响细胞的存活和生长，甚至导致细胞死亡。

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细胞体外培养用水中水的质量要求

提起细胞体外培养实验，每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧，

细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。

明明小心翼翼的操作，

细胞总会莫名其妙的被污染了！

莫名其妙的挂掉啦！

细胞培养 rephile 乐枫 纯水 过滤 默克 密理博 兼容 耗材.jpg

到底怎么回事呢？

其实造成细胞污染的因素不单单是微生物，培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以生存的主要环境，营养物质和代谢产物都必须溶解在水中，才能为细胞吸收和排泄。对于体外培养的细胞来说，水是细胞培养液和试剂中简单、但也是重要的组分。所以，细胞培养对水的质量要求较高，培养用水中如果含有一些杂质，即使含量微少，有时也会影响细胞的存活和生长，甚至导致细胞死亡。

水中的杂质对水质有不同影响：

1.离子——平衡渗透压；一些重金属 (Cadmium)对细胞毒害大，即便剂量很低 (< 0.1 ppb)； 

2.微生物——污染，改变微环境如pH，影响增殖，死后释放内毒素等；

3.内毒素——改变细胞外形、活化细胞、促进或抑制细胞分裂、影响细胞附着等；

4.有机物——影响细胞的生长状态。

水质评价常用的指标：

1. 电阻率（electrical resistivity）

衡量实验室用水导电性能的指标，单位为MΩ&bull;cm，随着水内无机离子的减少电阻数值逐渐变大。

2. 异体菌落数（Heterotrophic bacteria count，HBC）

衡量实验室用水微生物的指标，单位为cfu/mL。

3. 有机物（Total Organic Carbon ，TOC）

水中碳的浓度，反映水中可氧化的有机化合物的含量，可间接反映出水中细菌和内毒素含量的高低。单位为ug/L或ppb。

4. 内毒素（Endotoxin）

革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片，又称之为“热原”，单位EU/mL。

参考国际标准化组织的实验室纯水规范ISO3696，美国CLSI和ASTM D1193的试剂纯水规范，我国GBT6682和GBT 30301的试验用水指导，《实验细胞资源的描述标准与管理规范》用水指导，结合多年的实验操作经验，总结出细胞培养用水对水质的要求。


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文献贡献者

乐枫生物
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