鼎昊源科技通过大量样品破碎测试发现,动物组织类样品本身相比其他样品更难破碎,特别是一些结缔组织、心脏肌肉组织、肺部组织,因为韧性较大,一般很难用手工或者常规组织匀浆仪彻底破碎。因为无论用手工研磨还是组织匀浆仪,不仅一次处理通量少、易污染且难清洗,处理后的样品还不够均匀细致,达不到后续实验的要求。在测试中,鼎昊源科技使用TL2010S组织破碎仪(又称TL2010S中通量组织研磨仪)破碎肌肉组织样品,破碎效果均匀细致,符合后续检验检测、成分分析和核酸分析等实验的需求。操作要点如下:
1.将肌肉组织粗样分别放入5ml普通圆底或特制研磨管,放入的样品量约占单管1/3体积为最佳;
2.在每个离心管中放入3颗直径8mm的不锈钢研磨珠,盖好管盖,将离心管对称装入适配器中,固定到2个摇臂上;
3.将TL2010S组织破碎仪参数设置为转速1800rpm,循环5次,每研磨60秒停止研磨10S(即间歇研磨5分钟);
上图为TL2010S组织破碎仪
使用TL2010S组织破碎仪可一次性高速破碎不同体积和数量的样品。不仅操作灵活方便,还同时避免了样品间的交叉污染,省去了清洗仪器的繁琐工作。
测试中,离心管的选择对样品破碎的效果也有一定的影响。我们知道TL2010S组织破碎器还可搭配多个1.5/2.0ml离心管进行研磨,但这种规格的离心管相对实验中要大量破碎的粗样来说容量偏小,而且可容纳的研磨珠也较小,撞击力度也很有限,因而仅适合大量微量样品的批量处理。而使用5ml离心管,单管放入的样品量不仅增加了,还可放入更大尺寸的研磨珠以产生更大的撞击力度,从而获得更好的研磨效果。
另一个关键因素则是间歇研磨,这是TL2010S自动组织破碎仪一个特色功能之一,对破碎效果也有一定的提升作用。因为设置间歇时间,可以有效减少样品在持续高速研磨破碎中因快速升温而发生降解的情况,为后续实验的顺利进行提供保障。如果配合液氮低温处理,可以更有效地降低样品温升,利于RNA提取等对温度非常敏感的实验。
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