方案摘要
方案下载应用领域 | 制药 |
检测样本 | 预防类生物药品 |
检测项目 | 含量测定>色谱法 |
参考标准 | HPLC纯度95%以上 |
核酸药物以其疗效显著、开发周期短成为临床用药和新药研发市场的热点,而在药物研发阶段,样品的纯度需要符合要求,而在纯化环节,由于纯化工艺路径的差异,一般有两种方法可供选择。反相色谱法和离子交换层析法,而本文主要介绍了其中一种,反相色谱法。
SepaBean machine快速制备液相色谱系统
在核酸药物领域的应用
核酸药物是属于生物药品中的一类,是在疾病治疗过程中继化疗、放疗、手术治疗之后的一类全新的生物治疗方法。核酸药物包括小干扰 RNA、小激活RNA、微小RNA、信使RNA药物等。目前核酸产品已被广泛用于基础研究以及如肿瘤、感染性疾病、血液病及神经退行性疾病等疾病的临床诊断和治疗。其中以 mRNA 技术为代表的 mRNA 核酸疫苗在新冠病毒防疫中取得了巨大的成功。随着递送技术和RNA药物形式的多样化发展,核酸药物已经开启繁荣发展的时代,也被称为继化学药、抗体药后的第3代药物。核酸药物以其疗效显著、开发周期短成为临床用药和新药研发市场的热点,而在药物研发阶段,样品的纯度需要符合要求,而在纯化环节,由于纯化工艺路径的差异,一般有两种方法可供选择。反相色谱法和离子交换层析法,而本文主要介绍了其中一种,反相色谱法。
实验部分
实验设备:制备液相色谱系统是在使用反相色谱纯化时会用到的设备,搭配使用C18键合相填料可以满足实验室级别的核酸药物粗品的纯化工作。制备液相色谱系统已广泛应用天然产物、微生物发酵药物、化学合成药物以及多肽类药物等领域,满足纯化工艺开发需求。
实验样品:本案例采用的样品由某客户所提供,该客户目前主要从事核酸药物的研究。样品采用50%乙腈水进行溶解,采用C18键合相分离柱(SW-5201-025-IR)进行分离纯化。由于此类样品紫外吸收较弱,因此采用紫外与ELSD检测器联用模式对样品进行检测,降低样品损失。
制备方案:
表1. Flash制备实验参数
仪器 | SepaBean machine 2——专家型 | |
色谱柱 | SW-5201-025-IR | |
检测波长 | 波长1:254nm 波长2:280nm ELSD | |
上样量 | 500mg | |
流动相 | A:水、B:乙腈 | |
流速 | 15ml/min | |
洗脱梯度 | 时间/min | 溶剂B/% |
0 | 30 | |
12 | 75 | |
30 | 75 | |
40 | 95 | |
55 | 100 | |
70 | 100 |
结果与讨论:
波长1:254nm 波长2:280nm ELSD
图1. 样品制备纯化色谱图。
本实验样品经过分离纯化得到的色谱图如上图1所示,从上图1中可以看出组分1和组分2基本达到了基线分离,通过HPLC进一步检测其纯度,其纯度结果满足客户要求,可以进行下一步反应。本次实验结果表明三泰科技SepaBean machine快速制备液相色谱系统与ELSD联用搭配三泰科技SepaFlash分离柱可以应用于核酸药物领域的分离纯化,为核酸药物领域的样品分离纯化方案提供选择,为核酸药物领域的新药研发助力。
SepaFlash键合相分离柱订购信息
三泰科技推出的SepaFlash 键合相产品具有多种规格(参见表2)。
表2. SepaFlash键合相分离柱参数
(碳含量17%,封端,比表面积500m2/g,上样量0.1–2%)
产品编码 | 柱尺寸 | 上样量 | 包装规格(根/盒) | 流速(ml/min) | 柱长度(mm) | 柱内径(mm) | 最大工作压力(psi/bar) |
SW-5201-004-IR | 5.9 g | 5.9 mg–118 mg | 2 | 10–20 | 113.8 | 12.4 | 400/27.5 |
SW-5201-012-IR | 23 g | 23mg–0.46g | 1 | 15–30 | 134.8 | 21.4 | 400/27.5 |
SW-5201-025-IR | 38 g | 38 mg–0.76 g | 1 | 15–30 | 184 | 21.4 | 400/27.5 |
SW-5201-040-IR | 55 g | 55 mg–1.1 g | 1 | 20–40 | 184.4 | 26.7 | 400/27.5 |
SW-5201-080-IR | 122 g | 122 mg–2.5 g | 1 | 30–60 | 257.4 | 31.2 | 350/24.0 |
SW-5201-120-IR | 180 g | 180 mg–3.6 g | 1 | 40–80 | 261.5 | 38.6 | 300/20.7 |
SW-5201-220-IR | 340 g | 340 mg–6.8 g | 1 | 50–100 | 223.5 | 61.4 | 300/20.7 |
SW-5201-330-IR | 475 g | 475 mg–9.5 g | 1 | 50–100 | 280.2 | 61.4 | 250/17.2 |
※ 兼容市场上所有快速液相制备色谱系统。
SepaFlash® Phenyl 色谱柱在苯二氮卓类药物化合物的分离纯化
应用于糖类化合物的分离纯化
应用于含硼有机光电材料领域分离纯化
相关产品
SepaBean machine 2快速制备液相色谱
SepaBean machine U200快速制备液相色谱
SepaBean machine U100快速制备液相色谱
SepaBean machine快速液相制备色谱
SepaBean machine T快速液相制备色谱
SepaBean machine 2快速液相制备色谱系统V2.0
SepaBean machine T快速液相制备色谱系统 V2.0
SepaBean machine U200快速液相制备色谱系统 V2.0
SepaBean machine U100快速液相制备色谱系统 V2.0
SepaBean machine 快速液相制备色谱系统 V2.0
三泰E系列SepaFlash快速液相制备色谱柱
三泰 超大内径分离柱 制备柱全新升级
三泰 超大内径分离柱 Silica柱
高效系列 SepaFlash快速液相制备色谱柱
键合相系列 SepaFlash快速液相制备色谱柱
关注
拨打电话
留言咨询