通过qPCR热漂移分析来检测蛋白熔解温度

2020/10/20   下载量: 15

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应用领域 生物产业
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蛋白质的稳定性取决于配体的相互作用、缓冲液条件或构象变化,传统上是通过麻烦费时的圆二色光谱(CD)来研究的。 其实有一种更为简单的检测方法,即基于温度诱导蛋白变性的热漂移分析,通过检测荧光染料SYPRO® Orange的信号强度变化来进行。

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与1个样品检测大概需要1h的圆二色光谱方法相比,采用荧光定量PCR仪来开展此类实验,操作更加简单,用时更少(大约10min),而且样品通量更多(一次可实现96或者384个样品的检测),结果也清晰明了。需要提一下的是,不是所有荧光定量PCR仪都具有可以检测SYPRO® Orange染料的检测通道,因此在开展此类实验之前,需要确认仪器的检测能力。耶拿公司的荧光定量PCR仪专门为此类研究提供了特定的检测通道,因此可以获得高质稳定的检测结果。

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