方案摘要
方案下载| 应用领域 | 食品/农产品 |
| 检测样本 | 其他食品 |
| 检测项目 | 真菌毒素>其他 |
| 参考标准 | 无 |
支原体尤其是牛支原体，以及金黄色葡萄球菌和无乳链球菌是母牛和犊牛中常见的有害病原体，可引起炎症和乳腺炎。牛患乳腺炎将导致牛奶数量的减少，除了影响动物健康外，还将对经济产业产生重大影响。在兽医诊断中，从牛奶中有效分离出有害病原体并快速准确地检测出来显得尤为重要。由于牛支原体没有细胞壁，因此对抗生素治疗具有天然抗性，治疗特别困难，只有隔离有病症的母牛才能阻止其传播。 由于牛奶的成分比较复杂，如含有大量的蛋白、脂肪和糖类，从牛奶中提取病原体DNA是一项比较大的挑战。因此，我们建议采用专门的提取试剂盒或程序，例如DNA Diagnostic公司的Mastit 4C提取试剂盒，该试剂盒专门针对从牛奶中提取病原体DNA进行了优化，以提供高效稳定的提取效果。 从牛奶中提取获得的DNA配合DNA Diagnostic公司的Mastit 4C检测试剂盒，在qTOWER³荧光定量PCR仪上进行检测。检测试剂盒Mastit 4C可同时检测四个靶标基因，如金黄色葡萄球菌，无乳链球菌，牛支原体和支原体，并提供扩增内质控IAC。 本应用方案介绍了在qTOWER³上配合Mastit 4C检测试剂盒，进行多种病原体检测的方法，并证明了其特异性。
采用DNA Diagnostic公司的Mastit 4C提取试剂盒从牛奶中分离纯化出病原体DNA。样品为500 µl生乳，目的是检测样品中是否含有葡萄球菌、链球菌、牛支原体和支原体。加上扩增内质控，整个反应是一个五重的检测（FAM检测牛支原体，HEX检测金黄色葡萄球菌，ROX检测无乳链球菌，Cy5检测支原体，Quasar 705检测内质控IAC）
文献贡献者
qTOWER3G上进行新型冠状病毒SARS-COV-2的qPCR检测
CyBio FeliX完成自动体系构建并在qTower3上进行新冠病毒的qPCR检测
通过qPCR热漂移分析来检测蛋白熔解温度
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