细胞是一台精密的分子机器,上次讲到的通过JC-1检测线粒体膜电位相较经典的Annexin V/PI法能识别凋亡的早期,Annexin V/PI(包括我们之前讲过的FSC结合SSC识别凋亡细胞的形态学改变)所识别的是一系列“分子齿轮”转动、传递之后的效应-是果,不是因!它之所以经典、被广泛使用的原因在其识别凋亡的特异性以及染色的便利性(PS在胞外,易于染色。做科研的人是最聪明的-保证检测特异性,同时也是最“懒”的-追求简便、效率)。高水平的期刊(CNS)检测凋亡绝不是仅仅就看Annexin V/PI一个指标,而是循着下图的脉络,对各个节点都进行分析检测!
凋亡分线粒体途径(内源性)和死亡受体途径(外源性途径),两条途径最终都会落到凋亡效应分子Caspase 3,Caspase 3会去“切割”胞内一系列分子,如actin-引起细胞形态变化(FSC结合SSC识别,PS外翻似乎也和这个有关),再比如染色体(下集讲)。下图是流式检测Caspase 3激活的实例:
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