碘[125I] 大鼠促黄体生成激素放免试剂盒说明书,现货销售
【药品名称】
通用名称:碘[125I] 促黄体生成激素放射免疫分析药盒
英文名称:Iodine[125I]Luteiniziing Hormone Radioimmunoassay Kit
【成分】
规格
成分
100管
50管
制品状态
(1)LH标准品(S0~S6)
7瓶(S0:5ml,其它各1ml)
7瓶(S0:5ml,其它各1ml)
液体
(2)125I-LH(红色)
1瓶
1瓶
冻干品
(3)兔抗-LH抗体(蓝色)
1瓶
1瓶
冻干品
(4)驴抗兔免疫分离剂
1瓶/50ml
1瓶/25ml
液 体
(5) LH质控血清
2瓶
2瓶
冻干品
【促黄体生成激素放免试剂盒说明书,现货销售性状】液体组分(免疫分离剂除外)应澄清,无沉淀或絮状物;冻干组分应成疏松状,复溶后应无沉淀或絮状物。
【放射性核素半衰期】本品所用核素为碘[125I],其物理半衰期(T?)为60天。
【临床意义】
LH由垂体前叶嗜碱细胞分泌的一种糖蛋白激素,其蛋白部分由204个氨基酸构成α和β两个亚基,α亚基与FSH.TSH和HCG相同,只有β亚基具有特异的结构,两者通过非共价键连接,分子量约为30KD。LH和FSH都呈现脉冲式分泌,故有较明显的日内和日间变异。女性月经中期的LH高峰促成排卵;男性LH主要刺激睾丸间质细胞分泌睾丸酮,又协同FSH促进精子成熟。LH的测定在预测排卵,诊断不孕症,研究和判断下丘脑-垂体-性腺轴功能及相关内分泌疾病的治疗监测等方面又重要意义。对作用于下丘脑-垂体-性腺轴的女性避孕药的临床药理研究研究也有很大的价值。
本药盒采用放射免疫分析方法,测定大鼠等动物血清中的LH含量。
【测定原理】
采用竞争机制原理,标准或样品中的LH和加入的125I-LH共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125I-LH与抗体的结合量与标准或样品中LH的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂(PR)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,并计算相应结合率B/B0。用已知标准LH含量与对应结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中LH的含量。
【适用仪器】适用于各类γ-放射免疫分析仪。
【样本要求】
取静脉血分离血清,待测;血浆则需加入抗凝剂,混匀,分离血浆后,待测;如不立即测量,可将样品密封后,置于-20℃储存备测,保存期不超过一个月;若分离血清后5小时内测量,可将样品2~8℃保存。冰冻样品在保存过程中应避免反复冻融。冰冻样品测定前,将样品置于室温或常温水中融化,并充分摇匀。
【用法用量】
1 试剂配制、使用方法和保存
(1)LH标准品:液体,直接使用。浓度分别为0,5,10,25,50,100,200mIU/ml。2~8℃保存可稳定42天,未开封标准品2-8℃保存标识的有效期内稳定。促黄体生成激素放免试剂盒说明书,现货销售
(2)125I-LH:冻干品,100管用10ml蒸馏水溶解,50管用5ml蒸馏水溶解。若一次加样超过100管,两瓶混合后使用;50管标记物放射性不大于111 KBq(3μCi)。2-8℃保存标识的有效期内稳定。
(3)兔抗-LH抗体:冻干品,用蒸馏水溶解,溶解方法见封底。同次实验抗体加样超过100管时,两瓶溶解后混合使用。抗体溶解后2~8℃保存可稳定42天,冻干品-20℃保存有效期内稳定。
(4)驴抗兔免疫分离剂:液体,直接使用。加样前必须摇匀!2~8℃保存,有效期内稳定。开封后42天内稳定。若加样超过100管,两瓶混合后摇匀。
(5)LH质控血清:使用方法、保存条件、有效期及附值详见质控血清使用说明书。
2 测定步骤
取圆底聚苯乙烯试管若干,用记号笔或特殊铅笔编号NSB、S0~S6和待测样品管等,然后用微量加样器按下表加样。加样前所有试剂(尤其分离剂!)包括待测样品要摇匀,并且最好平衡到室温。
加样程序表 单位:μl
管别
试剂
总T管
NSB管
S0~S6管
质控或待
测样品管
LH标准品
—
300(S0)
200
—
质控或待测样品
—
—
—
200
125I-LH
100
100
100
100
兔抗-LH抗体
—
—
100
100
混匀,4℃温育16~24小时
驴抗兔免疫分离剂
—
500
500
500
充分摇匀,室温放置15分钟,3500转/分钟离心15分钟,吸弃上清,测各沉淀管的放射性计数(cpm)。
3 数据处理
(1) 联机处理:由电脑自动处理得出结果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,处理软件也不一样,用户一定要使用适合的处理软件进行数据处理。在此建议用户使用log-logit或四参数数据处理模式。
(2) 手工作图或计算器处理:
1). 百分结合率计算:设S0管计数为B0,各标准管或样品管计数为B,非特异管计数为NSB,则百分结合率计算公式为:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%
2). logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式为:logit=ln[(B/ B0)/(1-B/ B0)]
3). 手工作图:以标准浓度取log值为横坐标,对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标,对应的B/B0为纵坐标在log-logit坐标纸上画出标准曲线(理想化时是一条直线)。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意:如果使用普通坐标纸,查出的数值应取反对数才是最后的浓度值。
4). 计算器处理:使用有线性拟合功能的计算器,可以比较方便地计算出样品浓度值,具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。
标准曲线举例(仅供参考,不得用于实际计算)。 浓度单位:mIU/ml
项目
NSB
0
5
10
25
50
100
200
百分结合率(%)
B/T
B/B0
2.2
40
85
76
59
34
26
11
log-logit
主要曲线参数
A=3.48 B=-2.34 R=-0.995
ED75=10.3 ED50=30.0 ED25=87.7
【参考正常值】
血清参考正常值:
雄性:5-30mIU/ml
雌性:6-217mIU/ml
滤泡期:2-30mIU/ml
黄体期:0-20mIU/ml
排卵高峰:40-200 mIU/ml
由于地区及使用仪器不同,所测的正常值会存在一定的差异,所以本说明书提供的正常值仅作参考,各实验室最好能建立符合本实验室要求的正常值范围。
【产品性能指标】
标准范围:5~200 mIU/ml。
灵敏度: ~1.0mIU/ml。
精密度:批内变异系数(CV)<10%;批间变异系数(CV)<15%。
使用期限:见产品外包装。
【禁忌】本品仅供体外科研试验用!
【注意事项】
收到试剂盒后,尽快存放在2~8℃。
使用前请详细阅读此说明书。
不同药盒或不同月份的同种药盒的组分不得混用。
吸弃上清液时,注意不得损失沉淀物,否则将明显影响测定结果。
药盒请在有效期内使用。
临床标本均应视为有潜在传染性,请按传染病实验室规程操作。
使用本药盒应注意放射防护,放射性废弃物须按放射防护条例规定处理。
使用本品的操作人员应经过专业技术培训。
【贮藏】2~8℃保存。
【有效期】1个月。
附:抗体溶解方法:
兔抗-LH抗体,用蒸馏水溶解,100管产品每瓶抗体加()ml,50管产品抗体每瓶加()ml(如不填写,50管药盒用5ml溶解,100管药盒用10ml溶解,若为液体抗体请直接使用)。
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