大鼠促卵泡生成激素放射免疫分析药盒说明书

碘[125I] 大鼠促卵泡生成激素放射免疫分析药盒说明书

【药品名称】

通用名称：碘[125I] 促卵泡生成激素放射免疫分析药盒

英文名称：Iodine[125I]Follicle Stimulating Hormone Radioimmunoassay Kit

【成分】

          规格

成分

100管

50管

制品状态

(1)FSH标准品（S0～S6）

7瓶(S0：5ml,其它各1ml)

7瓶(S0：5ml,其它各1ml)

液体

(2)125I-FSH（红色）

1瓶

1瓶

冻干品

(3)兔抗-FSH抗体（蓝色）

1瓶

1瓶

冻干品

(4)驴抗兔免疫分离剂

1瓶/50ml

1瓶/25ml

液  体

(5) FSH质控血清

2瓶(每瓶1ml)

2瓶(每瓶1ml)

液  体

【性状】液体组分(免疫分离剂除外)应澄清，无沉淀或絮状物；冻干组分应成疏松状，复溶后应无沉淀或絮状物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素为碘[125I]，其物理半衰期(T?)为60天。

【临床意义】

FSH由垂体前叶嗜碱细胞分泌的一种糖蛋白激素，其蛋白部分由204个氨基酸构成α和β两个亚基，α亚基与FSH.TSH和HCG相同，只有β亚基具有特异的结构，两者通过非共价键连接，分子量约为30KD。FSH在卵泡发育过程中的作用包括：促进内膜细胞的分化；促进颗粒细胞增生；促进卵泡液分泌；使卵泡及其内腔增大，同时伴有整个卵巢的增大。实验表明：卵泡发育的以上几个阶段都须有FSH的参与，而且只有当FSH与LH共同作用时，成熟的卵泡才能分泌雌激素和孕激素。对男性来说，FSH的作用是促进生精上皮细胞的发育和精子的成熟。  

本药盒采用放射免疫分析方法，测定大鼠等动物血清中的LH含量。对诊断男、女不孕症、性功能减退、青春期延迟、性早熟、子宫内膜异位等疾病有非常重要的意义。对作用于下丘脑-垂体-性腺轴的女性避孕药的临床药理研究研究也有很大的价值。

【测定原理】

采用竞争机制原理，标准或样品中的FSH和加入的125I-FSH共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125I-FSH与抗体的结合量与标准或样品中FSH的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分（B）与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，并计算相应结合率B/B0。用已知标准FSH含量与对应结合率作图，即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中FSH的含量。

【适用仪器】适用于各类γ-放射免疫分析仪。

【样本要求】

取静脉血分离血清，待测；血浆则需加入抗凝剂，混匀，分离血浆后，待测；如不立即测量，可将样品密封后，置于-20℃储存备测，保存期不超过一个月；若分离血清后5小时内测量，可将样品2～8℃保存。冰冻样品在保存过程中应避免反复冻融。冰冻样品测定前，将样品置于室温或常温水中融化，并充分摇匀。

【用法用量】

1 试剂配制、使用方法和保存

（1）FSH标准品：液体，直接使用。浓度分别为0，2.5，5，10，25，50，100mIU/ml。2～8℃保存可稳定42天，未开封标准品2-8℃保存标识的有效期内稳定。

（2）125I-FSH：冻干品，100管用10ml蒸馏水溶解，50管用5ml蒸馏水溶解。若一次加样超过100管，两瓶混合后使用；标记物放射性不大于111 KBq(3μCi)。2-8℃保存标识的有效期内稳定。

（3）兔抗-FSH抗体：冻干品，用蒸馏水溶解，溶解方法见封底。同次实验抗体加样超过100管时，两瓶溶解后混合使用。抗体溶解后2～8℃保存可稳定42天，冻干品-20℃保存有效期内稳定。

（4）驴抗兔免疫分离剂：液体，直接使用。加样前必须摇匀！2～8℃保存，有效期内稳定。开封后42天内稳定。若加样超过100管，两瓶混合后摇匀。

（5）FSH质控血清：使用方法、保存条件、有效期及附值详见质控血清使用说明书。

2 测定步骤

取圆底聚苯乙烯试管若干，用记号笔或特殊铅笔编号NSB、S0～S6和待测样品管等，然后用微量加样器按下表加样。加样前所有试剂（尤其分离剂！）包括待测样品要摇匀，并且最好平衡到室温。

加样程序表                                                  单位：μl

      管别

试剂

NSB管

S0～S6管

待测样品管

质控管

FSH标准品

300(S0)

200

—

—

待测样品

—

—

200

—

FSH质控血清

—

—

—

200

125I-FSH

100

100

100

100

兔抗-FSH抗体

—

100

100

100

混匀，任取3管测总T，36-38℃温育16～24小时 

驴抗兔免疫分离剂

500

500

500

500

充分摇匀，室温放置15分钟，3500转/分钟离心15分钟，吸弃上清，测各沉淀管的放射性计数(cpm)。

3 数据处理

（1） 联机处理：由电脑自动处理得出结果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，处理软件也不一样，用户一定要使用适合的处理软件进行数据处理。在此建议用户使用log-logit或四参数数据处理模式。

（2） 手工作图或计算器处理：

1). 百分结合率计算：设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B，非特异管计数为NSB，则百分结合率计算公式为：B/ B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100%

2). logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式为：logit=ln[(B/ B0)/(1－B/ B0)]

3). 手工作图：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标，对应的B/B0为纵坐标在log-logit坐标纸上画出标准曲线（理想化时是一条直线）。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。注意：如果使用普通坐标纸，查出的数值应取反对数才是最后的浓度值。

4). 计算器处理：使用有线性拟合功能的计算器，可以比较方便地计算出样品浓度值，具体操作方法请查阅计算器的使用说明书。

标准曲线举例（仅供参考，不得用于实际计算）。            浓度单位：mIU/ml

项目

NSB

0

2.5

5

10

25

50

100

百分结合率（%）

B/T

B/B0

2.2

45

84.8

77.7

62.5

36.4

21.9

11.4

log-logit

主要曲线参数

A=2.82             B=-2.41                    R=-0.9995

ED75=5.21          ED50=14.8                 ED25=42.3

【参考正常值】

血清参考正常值：

雄性：2.0-12mIU/ml（n=60）

雌性：2.5-15mIU/ml（n=98）

滤泡早期：3.5-10.0mIU/ml

黄体期：3.0-9.0mIU/ml

绝经期：14-120 mIU/ml（n=17）

由于地区及使用仪器不同，所测的正常值会存在一定的差异，所以本说明书提供的正常值仅作参考，各实验室最好能建立符合本实验室要求的正常值范围。

【产品性能指标】

1. 标准范围：2.5～100 mIU/ml。

2. 灵敏度: ＜1.0mIU/ml。

3. 精密度：批内变异系数（CV）<10%；批间变异系数（CV）<15%。

4. 使用期限：见产品外包装。

【禁忌】本品仅供体外科研试验用！

【注意事项】

1. 收到试剂盒后，尽快存放在2～8℃。

2. 使用前请详细阅读此说明书。

3. 不同药盒或不同月份的同种药盒的组分不得混用。

4. 吸弃上清液时，注意不得损失沉淀物，否则将明显影响测定结果。

5. 药盒请在有效期内使用。

6. 临床标本均应视为有潜在传染性，请按传染病实验室规程操作。

7. 使用本药盒应注意放射防护，放射性废弃物须按放射防护条例规定处理。

8. 使用本品的操作人员应经过专业技术培训。

【贮藏】2～8℃保存。

【有效期】1个月。

附：抗体溶解方法：

兔抗-FSH抗体，用蒸馏水溶解，100管产品每瓶抗体加（）ml，50管产品抗体每瓶加（）ml（如不填写，50管药盒用5ml溶解，100管药盒用10ml溶解，若为液体抗体请直接使用）。