神经科学是一个多学科领域,专注于神经系统的发育、组织、功能和疾病。
在分子和细胞水平上研究神经系统(NS)对于理解神经疾病的发展及其治疗至关重要。ibidi为细胞培养和显微镜研究神经细胞在体外生理条件下的形态、功能和行为提供了不同的解决方案。
大鼠背根神经节细胞和雪旺细胞,在ibidi μ-Slide 8 Well中培养,并对神经丝(绿色)、NGFR(品红色)和 DAPI(白色)进行染色。该图像是使用 LEICA SP8X 激光扫描显微镜获得的。图片来源:Tamara Weiss, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, Medical University of Vienna, Austria
神经细胞分析
神经细胞分析研究构成神经系统的不同细胞类型的特征、功能和相互作用。神经系统由多种类型的细胞组成,包括神经元、神经胶质细胞和干细胞,每种细胞具有不同的作用和功能。
显微镜是研究神经细胞和深入了解神经系统形态、结构和动力学的关键技术。虽然组织学样本(如脑切片)的制备和成像在19世纪后期已经成为可能,但过去50年先进成像技术的发展,如共聚焦显微镜和双光子显微镜,已经推动了组织学的可视化神经元结构和过程。新抗体、荧光探针和标记技术的结合使得在固定样本(例如,在免疫荧光分析中)以及在活细胞、组织或生物体中描绘不同的神经元成分及其复杂的相互作用网成为可能。
最近,随着超分辨率显微镜的发明及其克服光衍射屏障(~200 nm)的能力,甚至可以看到小到突触囊泡(尺寸为40nm)的结构。
可以使用 live cell imaging活细胞成像技术在生理条件下实时研究动态细胞过程,如:突触形成、轴突生长和树突棘动力学。
综上所述,成像技术的最新进展使得神经元过程和形态的可视化具有高时空分辨率,这在理解大脑和神经的功能方面发挥着重要作用。
在ibidi μ-Plate 96孔板中源自人诱导多能干细胞 (iPSC) 的多巴胺神经元的免疫荧光图像。该图显示神经突延伸以及 β-III 微管蛋白(绿色)和酪氨酸羟化酶(红色)的表达。DAPI(蓝色)用于核染色。
图片由Image Courtesy: Asuka Morizane, Center for iPS Cell Research and Application, Kyoto University, Kyoto, Japan提供
ibidi为神经科学研究做出的贡献:
ibidi开发的解决方案和产品可促进涵盖神经生物学研究不同方面的各种细胞培养测定。
使用ibidi产品的神经相关文献已超过9000份。
这些产品包括具有各种几何形状和涂层的实验室器皿,为培养和成像甚至复杂的培养神经元细胞提供理想的表面。此外,ibidi Stage Top Incubators培养箱和ibidi Pump System泵/流体剪切力系统是多功能工具,可以在生理条件下培养细胞,从而实现神经元细胞的长期活细胞成像。
解决方案
ibidi为神经细胞分析提供的解决方案:
ibidi μ-Slides 和 μ-Dishes 包括不同的几何形状,结合了日常细胞培养和功能性细胞检测的最佳条件。它们是免疫荧光、活细胞成像和高分辨率显微镜的理想选择。ibidi实验室器皿具有 ibidi Polymer Coverslip 聚合物盖玻片和 ibidi Glass Coverslip 玻璃盖玻片。
ibidi channel slides 通道载玻片,尤其是μ-Slide VI 0.4 六通道载玻片,特别适用于免疫荧光染色:它们的几何形状非常适合精确交换少量介质,这在免疫细胞化学染色过程中是必需的。通道几何形状非常适合小体积免疫荧光测定。
Chamber Slides, removable可拆卸/可移除腔室载玻片,是低通量和高通量免疫荧光实验的理想选择,适用于长期储存用玻璃盖玻片固定的样品。
ibidi μ-Plates 是高通量药物筛选和大规模敲低和过表达实验的理想选择,具有高分辨率显微镜读数。这些成像板与使用 ANSI/SLAS (SBS) 标准格式的机器人和读板机兼容。ibidi μ-Plates 有24、96和384孔板,有 ibidi Polymer Coverslip 聚合物盖玻片和 ibidi Glass Coverslip 玻璃盖玻片,其自发荧光极低,可用于无干扰荧光显微镜检查。
ibidi Stage Top Incubators 培养箱为每个标准倒置显微镜上的活细胞成像提供生理条件。包括CO2和O2的控制(如:用于缺氧实验)以及主动控制湿度。可用于载玻片、培养皿以及多孔板。
用户评论
“μ-Slide 8 Well high 八孔高壁腔室载玻片效果非常棒,尤其是对于我们的iPSC衍生神经元。我们将它们用于活细胞显微成像,结果非常好。我们对载玻片非常满意!” Federica Bono, University of Brescia, Italy
“我们测试了μ-Slide 8 Well high Grid-500八孔高壁500um格子底腔室载玻片,将其作为长期实验的新选择。为了用不同的涂层成分检查表面,我们接种神经元祖细胞(从第16天开始),并根据我们的分化方案培养它们。我们很高兴地发现,这些细胞现在已经培养超过60天,并且发育得很好。我们注意到,Vitrogel和Geltrex涂层都与载玻片的表面形成了稳定的结合,并且没有脱离。”Robin Friedrich, Hamm-Lippstadt University of Applied Sciences, Germany
ibidi μ-Slide 8 Well high Grid-500神经元祖细胞的活细胞成像图像。图片显示第50天分化的神经元。图片由Robin Friedrich, Hamm-Lippstadt University of Applied Sciences, Germany提供
参考文献
Immunofluorescence of Neuronal Cells
The μ-Slide 8 Well was used for the cultivation and immunostaining of rat Schwann cells (rSC), fibroblasts (rFB), and dorsal root ganglion (rDRG) neurons.
Millesi F, Weiss T, Mann A, Haertinger M, Semmler L, Supper P, Pils D, Naghilou A, Radtke C. Defining the regenerative effects of native spider silk fibers on primary Schwann cells, sensory neurons, and nerve-associated fibroblasts. FASEB J. 2021 Feb;35(2):e21196. doi: 10.1096/fj.202001447R.
Imaging of Neuronal CAD Cells
The μ-Dish 35mm, high was used to culture and immunostain neuronal CAD (Cath.a-differentiated) cells to quantify tunneling nanotubes connected cells (TNT) and filopodia connected cells, as well as to image the transfer of DiD-labelled vesicles between two cell populations.
Bhat S, Ljubojevic N, Zhu S, Fukuda M, Echard A, Zurzolo C. Rab35 and its effectors promote formation of tunneling nanotubes in neuronal cells. Sci Rep. 2020 Oct 8;10(1):16803. doi: 10.1038/s41598-020-74013-z.
Live Cell Imaging of Cortical Neurons
The μ-Slide 8 Well was used for confocal live cell imaging of Purkinje neurons.
Motori E, Atanassov I, Kochan SMV, Folz-Donahue K, Sakthivelu V, Giavalisco P, Toni N, Puyal J, Larsson NG. Neuronal metabolic rewiring promotes resilience to neurodegeneration caused by mitochondrial dysfunction. Sci Adv. 2020 Aug 28;6(35):eaba8271. doi: 10.1126/sciadv.aba8271.
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