供货周期: | 一周 |
品牌: | Sigma-Aldrich |
规格: | 500U |
货号: | PC1100-500 |
CAS号: | 此产品无CAS号 |
PC1100-500 Taq DNA Polymerase Taq DNA Polymerase 国产 500U 支
Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T)
复性温度=Tm值-(5~10℃)
在Tm值允许范围内,选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合,提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30~60秒,足以使引物与模板之间完全结合。
3、Taq DNA Polymerase延伸温度与时间:PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增段的长度而定,一般1Kb以内的DNA段,延伸时间1min是足够的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。
4、循环次数:循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40T之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。
产品内容:
Taq DNA Polymerase酶储存缓冲液 10×Taq Buffer(含Mg2+)
20 mM Tris-HCl (pH 8.0) 200 mM Tris-HCl (pH 8.4)
0.1 mM EDTA 200 mM KCl
1 mM DTT 15 mM MgCl2
100 mM KCl 1%Triton X-100
50% glycerol 其它
Stabilizers
活性定义:1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制检测:SDS-PAGE检测Taq DNA Polymerase纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
Taq DNA Polymerase注意事项:
1、Taq DNA Ploymerase应储存于-20℃,有效期12个月。
2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。
3、10×Taq Buffer分为含15 mM Mg2+和不含Mg2+两种,不含M g2+的Buffer,另外配有25 mM MgCl2。如果没有特别指定,通常提供的为含有15 mM Mg2+产品简介:本公司生产的Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermus 的Buffer。aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为94 KD。该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和5’→3’核酸外切酶活性,无3’→5’核酸外切酶活性。在PCR反应中,该酶的延伸速度为1-2kb/分钟,PCR产物3’端带A,可直接用于T/A载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组DNA污染,稳定性好,特异性强,一般用于小于6kb的对保真度要求不高的DNA段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等
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