使用温度/波长测量的荧光和CD光谱

2023/05/30   下载量: 0

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应用领域 制药
检测样本 生物药品原料
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本应用说明演示了使用溶菌酶蛋白样品的圆二色性和荧光的温度/波长扫描程序。 关键词:荧光、圆二色性、二级结构分析、蛋白质、热力学、热变性、焓、熵、熔化温度、溶菌酶、J-1500、生物化学

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荧光和CD光谱是蛋白质结构分析中的补充技术。荧光光谱提供了蛋白质芳香残基的信息,而CD光谱可以阐明沿蛋白质主干发生的构象变化。此外,蛋白质在不同温度扫描过程中的热力学特性提供了关于蛋白质热稳定性的重要信息。

随JASCO-J系列CD光谱仪配套的温度/波长扫描程序可用于获得与温度相关的CD光谱。温度相关数据可用于计算生物样品的变性温度(Tm)、焓变(ΔH)和熵变(ΔS)。该应用程序还提供了CD和荧光光谱的温度间隔测量。

从该程序中获得的数据可以同时使用频谱分析和区间分析程序进行处理,这可以将数据说明为一个三维图形表示。二级结构分析和蛋白质的热力学参数的计算可以使用可选的热变性分析和蛋白质二级结构估计(SSE)程序来进行。

本应用说明表明,J-1500 CD光谱仪不仅可以用于测量CD光谱,还可以用于同一测量过程中的荧光光谱。光谱分析和间隔分析程序都为用户扫描CD或荧光光谱的特定区域,或监测特定的波长。热变性分析和蛋白质SSE程序也可以分别获得蛋白质样品的熔化温度和二级结构百分比。

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