方案摘要
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关键词胆汁酸,NAD,NADH,Enzymepak 3a-HSD,Bilepak-II,荧光检测器
胆汁酸在其steroidal backbone的3a位置具有一个共同的羟基。3a HSD(3a-Hydroxysteroid Dehydrogenase)是一种在辅酶NAD(Nicotinamide Adenine Dinucleotide)存在下使该羟基选择性氧化的酶。在该反应中,当胆汁酸分子被氧化为3-ketosteroid时,产生一个NADH分子(NAD的还原形式),并且其具有强烈的荧光(Ex=340nm,Em=470nm)。在该方法中,使用柱后衍生法测量胆汁酸的标准混合物,以检测通过将含有NAD的反应溶液与柱洗脱液连续混合并使该混合溶液通过3a-HSD酶固定化柱而产生的NADH。
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