方案摘要
方案下载应用领域 | 农/林/牧/渔 |
检测样本 | 饲料 |
检测项目 | 营养成分>维生素 |
参考标准 | GB/T17817-2010《饲料中维生素A 的测定高效液 相色谱法》、GB/T 17818-2010 《饲料中维生素D3 的测定高效液相色谱法》、GB/T 17812-2008 《饲料中维生素E 的测定高效液相色谱法》 |
本方法适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料饲料、维生素预混合饲料维生素A 及维生素D、维生素E 的测定。参考标准GB/T17817-2010《饲料中维生素A 的测定高效液相色谱法》、GB/T 17818-2010 《饲料中维生素D3 的测定高效液相色谱法》、GB/T 17812-2008 《饲料中维生素E 的测定高效液相色谱法》。
【仪电分析】预混合饲料中维生素A 乙酸酯、维生素D3、
维生素E 的测定——高效液相色谱法
本方法适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料饲料、维生素预混合饲料维生素A 及维生素D、维生素E 的测定。参考标准GB/T17817-2010《饲料中维生素A 的测定高效液相色谱法》、GB/T 17818-2010 《饲料中维生素D3 的测定高效液相色谱法》、GB/T 17812-2008 《饲料中维生素E 的测定高效液相色谱法》。
1、方法原理
维生素预混料中的维生素A 乙酸酯、维生素D3、维生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)用甲醇溶液提取,试液注入高效液相色谱柱,用紫外检测器在275 nm 处测定,外标法计算维生素A、维生素D3、维生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)含量。
2、主要仪器设备
1)高效液相色谱仪L210,带紫外检测器(上海仪电分析仪器有限公司);
2)超声波水浴;
3)电子天平;
4)真空抽滤装置。
3、实验方法
3.1 混合标样配置
维生素A 乙酸酯、维生素D3、维生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)标准贮备液:准确称取维生素A 乙酸酯、维生素D3、维生素E (dl-α-生育酚乙酸酯)各10.0 mg,置于100 mL 棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释到刻度,混匀,4℃下保存。该贮备液浓度为0.1 mg/mL。
维生素A 乙酸酯、维生素D3、维生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)混合标准工作液:准确吸取各标准贮备液若干毫升于10 mL 棕色容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,混匀。
3.2 试样溶液的制备
称取试样1.00 g 置于100 mL 棕色容量瓶中,加入约80 mL 甲醇,于65 ℃超声波水浴中超声提取30 min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀后过0.45 μm 滤膜过滤。将试样溶液进一步稀释至合适浓度,用于实验分析。
3.3 高效液相色谱仪参考条件
色谱柱:C18 4.6 mm(i.d)×150mm;
流动相:95%甲醇
流速:1 mL/min;
柱温:室温
波长:275 nm;
测定:取相同体积试样制备液和标准使用液分别注入高效液相色谱仪,根据保留时间按定性,外标峰面积法定量。
4、实验结果
4.1 混合标准溶液高效液相色谱图
1.维生素A 乙酸酯2.维生素D3 3.维生素E
4.2 工作曲线的绘制
维生素A 乙酸酯工作曲线见下图,线性相关系数:0.9998
维生素D3 工作曲线见下图,线性相关系数:0.9998
维生素E 工作曲线见下图,线性相关系数:0.9992
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