方案摘要
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本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定客户样品中羟基乙酸的含量。色谱条件:C18 色谱柱(4.6×250mm,5μm),流速为0.8mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL,检测波长为218nm。实验结果:羟基乙酸的理论塔板数为9748;羟基乙酸的仪器检出限为0.002 mg/mL,仪器定量限为0.005 mg/mL;羟基乙酸在测定浓度范围内呈现良好的线性关系,确定系数R2>0.9999;样品1中羟基乙酸的含量为0.11mg/mL,样品2中羟基乙酸的含量为17.75mg/mL,样品3中羟基乙酸的含量为1.93mg/mL,样品4中羟基乙酸的含量为70.10mg/mL,样品5中未检出羟基乙酸。对样品5进行加标实验,加标回收率为97.5%。
一、摘要
本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定客户样品中羟基乙酸的含量。色谱条件:C18 色谱柱(4.6×250mm,5μm),流速为0.8mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL,检测波长为218nm。实验结果:羟基乙酸的理论塔板数为9748;羟基乙酸的仪器检出限为0.002 mg/mL,仪器定量限为0.005 mg/mL;羟基乙酸在测定浓度范围内呈现良好的线性关系,确定系数R2>0.9999;样品1中羟基乙酸的含量为0.11mg/mL,样品2中羟基乙酸的含量为17.75mg/mL,样品3中羟基乙酸的含量为1.93mg/mL,样品4中羟基乙酸的含量为70.10mg/mL,样品5中未检出羟基乙酸。对样品5进行加标实验,加标回收率为97.5%。
二、实验过程
1 原理
羟基乙酸在218nm处有紫外吸收,使用高效液相色谱法测定,外标法定量。
2 试剂与材料
2.1水:符合GB/T 6682的一级水;
2.2甲醇(CH3OH):色谱纯;
2.3磷酸(H3PO4):色谱纯;
2.4磷酸水溶液(pH=3.00):量取1L水,用磷酸(2.3)调pH至3.00;
2.5溶剂:甲醇+磷酸水溶液(pH=3.00)=20+80,将10mL甲醇(2.2)与40mL磷酸水溶液(pH=3.00)(2.4)混合,摇匀备用;
2.6羟基乙酸标准品:客户提供;
2.7样品1~样品5;客户提供。
3 仪器与设备
3.1高效液相色谱仪:
具体配置包括:
Wooking K2025 P2二元高压输液泵(脱气机、四通道溶剂切换阀、自动在线清洗系统);
Wooking K2025 AS自动进样器(脱气组件、50μL定量环);
Wooking K2025 CO柱温箱(室温以下10℃至85℃);
Wooking K2025 UVD紫外-可见光检测器;
Wookinglab色谱工作站(中文版)。
3.2涡旋振荡器;
3.3超声波清洗机;
3.4 pH计:精确到0.01 pH单位。
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