食品中磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺(PE)和磷脂酰肌醇(PI)的测定 高效液相色谱法

一、摘要

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定大豆卵磷脂类食品中磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）和磷脂酰肌醇（PI）三种物质的含量。色谱条件：硅胶柱（4.6×250mm，5μm），流速为1.2mL/min，进样量为10μL，柱温为20℃，检测波长为208nm。实验结果：在连续进样7针的重复性测试中，磷脂酰乙醇胺保留时间的RSD为0.075%，峰面积的RSD为1.044%；磷脂酰肌醇保留时间的RSD为0.498%，峰面积的RSD为1.682%；磷脂酰胆碱保留时间的RSD为0.121%，峰面积的RSD为1.608%；磷脂酰乙醇胺的仪器检出限为0.008mg/mL，仪器定量限为0.027mg/mL；磷脂酰肌醇的仪器检出限为0.009mg/mL，仪器定量限为0.030mg/mL；磷脂酰胆碱的仪器检出限为0.015mg/mL，仪器定量限为0.052mg/mL；对市面上购买的大豆卵磷脂试样进行测定，平行测定的两次结果中，磷脂酰乙醇胺的含量分别为394.3mg/g和387.0mg/g，磷脂酰肌醇的含量分别为103.5mg/g和100.8mg/g，磷脂酰胆碱的含量分别为100.6mg/g和98.4mg/g。

二、背景

 本实验在国家标准《GB 5009.272-2016 食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定》的基础上，对实验方法适当调整，完成对于三种物质的同时检测。

磷脂酰胆碱有时候也被称之为卵磷脂，是由法国科学家最早在蛋黄中提取而来；磷脂酰胆碱是生物膜的重要组成部分，也是动物和植物组织内棕色脂肪的组成部分；磷脂酰胆碱是细胞间传递信号的物质。

磷脂酰乙醇胺一般指脑磷脂，是一种优良的天然活性剂，主要存在于脑、神经、大豆等中，磷脂酰乙醇胺不溶于水和丙酮，微溶于乙醇，溶于氯仿和乙醚。磷脂酰乙醇胺的主要提取方式一般可以由刚被宰杀的畜牧的新鲜大脑或大豆中提取。

磷脂酰肌醇是由两个部分，磷酸1，2-二酯酰甘油和肌醇构成。在细胞中对于细胞形态、代谢调控、信号传到等细胞的各项功能有着密不可分的关系；是G蛋白偶联受体的信号转导通路中的一种途径。

三、实验过程

1 范围

适用于大豆卵磷脂类食品中磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）和磷脂酰肌醇（PI）三种物质的含量测定。

2原理

磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）和磷脂酰肌醇（PI）经？提取后，在208nm处有紫外吸收，采用高效液相色谱法测定，使用外标法计算含量。

3 试剂与材料

3.1水：符合GB/T6682的一级水；

3.2 正己烷：色谱纯；

3.3 异丙醇：色谱纯；

3.4 乙酸：色谱纯；

3.5 乙酸水溶液：吸取1.4mL（3.4）乙酸至100mL容量瓶中，用水（3.1）定容至刻度，摇匀；

3.6流动相：正己烷（3.2）-异丙醇（3.3）-乙酸水溶液（3.5）=（800:800:92）；

3.7 磷脂酰乙醇胺对照品：CAS号：39382-08-06，纯度98.0%；

3.8 磷脂酰肌醇对照品：CAS号：97281-52-2，纯度79.8%；

3.9 磷脂酰胆碱对照品：CAS：号8002-43-5，纯度98.0%；

3.10 大豆卵磷脂样品。                                                              

4 仪器与设备

4.1高效液相色谱仪：K2025 P2二元高压输液泵、K2025 AS自动进样器、K2025 CO柱温箱、K2025 UVD紫外-可见光检测器、Wookinglab色谱工作站；

4.2分析天平：精确到0.0001g；

4.3 涡旋振荡器；

4.4 容量瓶：5mL、100mL（棕色带刻度）；

4.5移液器；

4.6 0.22μm微孔有机滤膜。