赛诺普Xenocs小角X射线散射仪研究溶液中BSA体系pH和蛋白质浓度对自身相互作用过程的影响

2023/02/06   下载量: 0

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应用领域 生物产业
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牛血清白蛋白(BSA)是一种在牛体中发现的非糖基化球蛋白。由于其低成本和高可用性,被广泛用于药物递送、免疫诊断过程和临床化学[1,2]。了解处于不同条件下BSA在溶液中的行为对于评估这类体系的稳定性非常重要。为了表征蛋白质间的相互作用,在实验室仪器上采集了不同pH溶液,广泛浓度范围内的BSA的SAXS数据。SAXS能够在接近生理环境的稀释溶液和浓缩溶液中详细分析分子间的吸引和排斥行为。SAXS 还可以监测治疗性蛋白质的胶体稳定性,随 pH 值、离子强度、蛋白质浓度和赋形剂、蛋白质-配体相互作用、单体-二聚体平衡、低聚和聚集的关系。

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使用Xenocs公司SAXS实验室仪器(BioXolver配备metal-jet X射线光源),对浓度为1.2540 mg/mlBSA样品进行SAXS实验(图1)。样品被自动装载至密封的96孔盘上,样品量为15µl。每个浓度分别进行5120秒采集。Xenocs软件可以自动完成数据还原。测得的SAXS强度是形态因子和结构因子I(q) = P(q)*S(q)的乘积,其中P(q)描述了分子内相互作用的形态因子,S(q)描述了分子间相互作用的结构因子,是测量溶液中粒子间相互作用的重要参数。 S(q)>1是吸引作用,S(q)<1是排斥作用。


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