集热式磁力搅拌器 | 4种方法脱除花生油中的黄曲霉毒素B1

花生油生产安全性受黄曲霉毒素（aflatoxin，AFT） 污染严重，主要存在于花生成熟后未及时采收、贮藏条件 不佳、运输保护措施不够等导致花生发生霉变，由黄曲霉和寄生曲霉等真菌在代谢过程中产生、分泌的次级代谢产物污染花生，而食用了AFT污染的食物会极大增加肝癌患病率。

 本研究使用碱液浸泡花生（三级）坯片，再经蒸料、炒料、水化脱胶等达到脱除AFB1的同时保留花生油特有的风味。对比4种不同脱除方法（碱液处理、膨润土一次吸附（以下称为膨润土吸附）、膨润土2 次吸附（以下称为膨润土复吸）、碱炼脱酸）花生油AFB1脱除率、VE损失率、植物甾醇损失率及花生油风味评定。

1.材料与设备
材料：花生（三级）、膨润土（食品级）、甲醇、乙腈、正己烷、三氟乙酸（均为色谱纯）、其他试剂（国产分析纯）。
仪器：万分之一分析天平、pH计、电动压揉面机、电加热平底导热油锅、螺旋榨油机、集热式磁力搅拌器、离心机。

2.样品制备
●花生油的制备
花生经破碎、仁皮分离、压坯、蒸坯、炒坯、压榨后制取花生毛油，毛油经4000r/min离心去掉油渣，上清油经滤纸过滤得实验用原油。

●碱液处理样品的制备
花生经仁皮分离后破碎6～8瓣、轧坯（坯片厚度约1mm）后称质量，分别取600g油料于烧杯中加入NaOH溶液，10r/min搅拌30min，蒸15min至油料水分约13%，出料温度约98℃，转入已预热到180℃炒锅中，80r/min匀速搅拌炒30min，出料温度170～180℃，出料水分约2.5%，立即放入螺旋榨油机中榨油，将毛油离心，取上清油样，加入50℃占油质量15%水进行水化脱胶、真空烘箱干燥、冷却、装瓶，放至冰箱冷藏，待检测时取出。

●膨润土一次吸附样品的制备
分别称取50g原油于250mL锥形瓶中，将锥形瓶置于60℃的集热式磁力搅拌器中并放入磁子，待油温稳定后加入一定量的膨润土，80～100r/min搅拌一定时间后以4000r/min离心10min，取上清油滤纸过滤得膨润土一次吸附样品。

●膨润土复吸样品的制备
分别称取50g原油于250mL锥形瓶中，将锥形瓶置于60℃的集热式磁力搅拌器中并放入磁子，待油温稳定后加入一定量的膨润土，80～100r/min搅拌30min，4000r/min离心10min。取一定量上清油，再次加入一定质量膨润土，80～100r/min搅拌30min，4000r/min离心10min，取上清油滤纸过滤得膨润土复吸样品。

●碱炼脱酸油的制备
分别取原油100g于250mL锥形瓶中，加磁子并置于50℃集热式磁力搅拌器中，将已配制好的质量分数为5%的NaOH溶液预热至50℃，按理论加碱量加入碱液，超碱添加量分别为0.2%、0.4%、0.6%、0.8%，以70r/min搅拌28min，后以30r/min搅拌2min，4000r/min离心10min，取离心后碱炼油加入占油质量15%的蒸馏水（100℃）洗2～3遍，至洗涤水呈中性，冷冻干燥机干燥，待样品不再沸腾取出平衡至室温，将碱炼脱酸油密封置于冰箱冷藏，待检测时取出室温解析检测。

3.碱液处理毒性恢复性实验
分别取花生原油、碱液处理样油及碱炼脱酸油100g于250mL锥形瓶中，放入磁子，于50℃集热式搅拌器中80～100r/min搅拌，待油温稳定后加入质量分数15%0.01mol/LHCl溶液搅拌30min，4000r/min离心10min，取上清油并称量。将上清油放入250mL锥形瓶中，加质量分数15%的蒸馏水，80～100r/min搅拌30min，4000r/min离心10min，取上清油称量，以相同方法再洗涤1～2次，至下层水溶液呈中性，取上清油于冷冻干燥机干燥，待样品不再沸腾取出平衡至室温，将油密封置于冰箱冷藏，待检测AFB1时取出室温解析检测。

4.含量测定
●AFB1含量的测定
参照GB5009.22—2016《食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》，高效液相色谱-柱前衍生法进行测定。 ●植物甾醇含量的测定 参照GB/T25223—2010《动植物油脂甾醇组成和甾醇总量的测定 气相色谱法》进行测定。

●VE含量的测定
参照GB5009.82—2016《食品中维生素A、D、E的测定》进行测定。

●游离碱含量的检测
取试样10g（称准至0.001g按干基计算）置于250mL烧杯中加入50mL60%乙醇溶液，半浸入恒温水浴中（水浴温度（52±1）℃）加热搅拌浸出，待液温升至45℃后，继续在45～50℃搅拌浸出10min。用滤纸将浸出液过滤到250mL三角烧杯中，杯内剩余试样再加入50mL60%乙醇溶液以同法继续加热搅拌浸出10min，同法过滤，最后以50mL60%乙醇溶液洗涤试样过滤于同一三角烧瓶中，加沸石置于电炉蒸干。 加入50mL蒸馏水，并准确加入10mL0.01mol/L标准硫酸溶液（0.01mol/LNaOH标准溶液标定），加甲基红指示剂2～3滴，以0.01mol/LNaOH标准液滴至终点恰显黄色。取150mL60%乙醇溶液于250mL锥形瓶，加沸石蒸干后，再加50mL蒸馏水，准确加入10mL0.01mol/L标准硫酸溶液，加甲基红指示剂2～3滴，以0.01mol/LNaOH标准液滴至终点恰显黄色作为空白对照（经检测，60%乙醇溶液呈中性）。

5.结论分析
4种处理方法都能有效脱除花生油中AFB1，花生油AFB1残留量均达到未检出水平。

膨润土复吸法较膨润土一次吸附膨润土消耗量节省0.5%，但2种方法制得花生油的AV、POV较碱液处理法显著增大。VE含量及植物甾醇含量与空白对照组对比显著降低，风味评定得分略低于市购一级压榨花生油，但风味得分差异不明显。

碱炼脱酸能有效脱除花生油中AFB1，花生油中AFB1脱除率99.5%，且花生油AV最低，该方法制得花生油VE损失率较碱液处理法制得花生油VE损失率高，风味丢失最严重，成品油风味较弱。

碱液处理法能有效脱除花生油中AFB1，制得花生油AV和POV较低，花生油中VE、植物甾醇保存量较为理想，与其他几种方法比较，该方法能够有效保留花生油特有的风味。

6.仪器介绍