【飞诺美色谱】 离子交换固相萃取 - HPLC 检测粮食赭曲霉毒素 A(OA) 研究

参考《GB/T 25220-2010 粮食中赭曲霉毒素A的测定 高效液 相色谱法》 1. 样品处理 1.1 提取用试剂 提取液：含 20% 0.1 mol/L 氢氧化钾溶液 60% 甲醇水溶液； 淋洗液：含 30% 0.1 mol/L 氢氧化钾溶液 50％乙腈水溶液； 洗脱液：甲醇:乙腈:甲酸:蒸馏水=4:5:0.5:0.5 1. 2 提取 a) 玉米：将样品粉碎，称取玉米粉 10 g，加入 50 mL 氯仿，震荡 3 ~ 5 min，用滤纸过滤，取滤液 10 mL 进入一 个100 mL 平底烧瓶中，于 60℃水浴中旋转蒸发至近干，用 20  mL 石油醚溶解残渣，加入 10 mL 提取液，震荡 3 ~ 5 min， 分层后，用滤纸过滤，取下层提取液 5 mL 进行固相萃取。 b) 糙米、小麦、小麦粉和大豆：将样品粉碎，称取粉 碎样品 l0 g，加入 50 mL 提取液，震荡 3 ~ 5 min，用滤纸过 滤，取滤液10 mL进入一个100 mL平底烧瓶中，加入 20 mL  石油醚，震荡 3 ~ 5 min，分层后，用滤纸过滤，取下层提 取液 5 mL 至 Qdaura® 卓睿全自动固相萃取仪上样管中进行 固相萃取操作。

2. 固相萃取净化 Cleanert® PAX 固相萃取柱置于 Qdaura® 卓睿全自动固相 萃取仪中，上样管至于对应位置，设定操作程序如下：5 mL 甲醇，3 mL 提取液活化，加样 5 mL，10 mL 淋洗液淋洗， 吹干，最后用 5 mL 洗脱液洗脱 OA，收集 (以上操作流速 均为 1 mL/min)。收集液于 60℃ 水浴中旋转蒸发至干，用 1  mL 流动相溶解残留物，经滤器过滤后上液相色谱检测。 3. 色谱条件 色谱柱：Venusil® ASB C18，4.6 mm × 250 mm，5 µm 保护柱：Venusil® ASB C18 ，4.6 mm × 10 mm，5 µm 流动相：乙腈:水:乙酸=48:51:1； 检测器波长：激发光 333 nm，发射光 460 nm； 进样量：25 µL；流速：1 mL/min；柱温：30℃ 4. 结果 以小麦粉、小麦、玉米、糙米和大豆为研究对象，分别 作三个不同浓度 OA 添加水平，这三个浓度分别为 0.8 µg/kg、 4 µg/kg、10 µg/kg，每个浓度水平作 6 次平行性检测。检测 回收率和精密度数据见表 l、表 2和表 3；典型色谱图见图 3。