WAVE核苷酸片段分析系统（DHPLC变性高效液相色谱）
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WAVE核苷酸片段分析技术是近年来发展起来的一项新的分析技术，它是分离核苷酸片段及分析检测已知基因突变和SNP的最佳技术平台，其原理是在液相色谱仪的基础上采用Transgenomic公司专利技术的DNA分离柱及相应的配套数据工作站，实现对DNA片段大小的分离，DNA碱基突变的检测，寡核苷酸（OLIGO）,RNA,反义-OLIGO和siRNA的分析和纯化。
DHPLC变性高效液相色谱的商品化仪器WAVE核苷酸片段分析系统逐渐被作为一种常规分析工具被越来越多的分子生物学实验室所采用，用来对双链DNA片段大小及可能的未知SNP和突变进行快速分析分离鉴定。
自2006年美国Transgenomic公司对WAVE核苷酸片段分析系统进行全面升级，推出WAVE4500系列产品，4500系列具有更快速精确的变温控制系统，日最大处理样品量400个PCR产物，而数据处理时间仅为1小时，若采用Pooling的方式，紫外检测器课题高通量10倍，而荧光检测器可提高灵敏度100倍。
WAVE系列产品分为：WAVE4500、WAVE4500HT、WAVE4500HT-HS、WAVE MD、WAVE Oligo和WAVE Microbal Analysis System共计六个型号的产品。
WAVE核苷酸片段分析系统（DHPLC变性高效液相色谱）的核心技术在于:
1. DNA分离柱(Transgenomic专利)
• 无孔多苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB)共聚物微球(3微米)与C18形成稳定的固相基质;
• pH值工作范围: 2-14;
• 温度工作范围: 20-95℃;
• 可以在DNA非变性(50-52℃),部分变性(53-78℃)和完全变性(80℃)条件分析和分离核苷酸片段;
• DNA Sep分离柱寿命大于6000次进样;
• 可完成从分析(0.1nmol)到制备(5mmol)大样品浓度变化;
• 重复精度: ￡ 1%;
• 色谱柱可再生使用;
2. WAVEMaker WAVE核苷酸片段分析系统专用软件包功能(安装在主机计算机内):
• 可预测DNA片段变性温度(Tm值);
• 可预测DNA片段给定温度下,每一不同位置碱基变性的百分比;
• 可根据不同DNA片段，控制WAVEò核苷酸片段分析系统中缓冲液的梯度条件;
• 可预测给定DNA片段流出分离柱的保留时间;
• 可实时数据采集;
• 结果数据处理(RT-PCR);
• 帮助设计DNA片段PCR引物;
WAVE核苷酸片段分析系统（DHPLC变性高效液相色谱）主要用于：
• DNA片段已知和未知突变和多态性的筛查；
• 植物基因自动分析；
• 肿瘤流行病学的研究；
• 分子遗传病学的研究；
• 法医学和亲子关系研究；
• 种群研究；
• 其他与基因相关联疾病诊断的研究;
• 分子生物学技术质量控制;
WAVE核苷酸片段分析系统（DHPLC变性高效液相色谱）性能指标：
• 双链DNA片段大小分析: 分辨率优于1/100; 片段大小范围: 50-2000bp(DNA Sepò分离柱温度范围:50-52℃);
• 突变检测: DNA片段大小范围:80-1000bp可检测单碱基突变;
• 对未知的SNP和单个核苷酸突变, 系统检测的准确率大于96%;
• 对已知的SNP和单个核苷酸突变, 系统检测的准确率大于99.9%;
• 突变检测DNA Sep分离柱温度范围:53-78℃;
• 高通量突变检测： 8分钟/样;
• 寡核苷酸(oligo)质量控制, DNA Sepò分离柱温度范围: 80℃;
• 寡核苷酸(oligo)质量控制: 5-80mer, 可检测单碱基差别; 5-30mer, 可检测相同长度寡核苷酸中单碱基序列的差别;
• RNA分析, DNA Sep分离柱温度范围: 80℃;
• RNA分析, 检测范围: 200-5000nts, 分辨率优于1/100;
• WAVE核苷酸片段分析系统具备纯化DNA,Oligo, RNA的能力;
• WAVE核苷酸片段分析系统结果重复率可达99.9%以上;
WAVE核苷酸片段分析系统（DHPLC变性高效液相色谱）可用于以下出入境检疫检验行业标准：
2010年第3期出入境检验检疫行业标准
序号 | 标准号 | 标准名称 | 被代替标准 | 批准日期 | 实施日期 |
37 | SN/T 2562-2010 | 食品中霍乱弧菌分群检测 MPCR-DHPLC法 | 2010-5-27 | 2010-12-1 | |
38 | SN/T 2563-2010 | 肉及肉制品中常见致病菌检测 MPCR-DHPLC法 | 2010-5-27 | 2010-12-1 | |
39 | SN/T 2564-2010 | 水产品中致病性弧菌检测 MPCR-DHPLC法 | 2010-5-27 | 2010-12-1 | |
41 | SN/T 2565-2010 | 食品中志贺氏菌分群检测 MPCR-DHPLC法 | 2010-5-27 | 2010-12-1 | |
42 | SN/T3576-2013 | 转基因成分检测大豆PCR-DHPLC检测方法 | 2013-03-01 | 2013-09-16 | |
43 | SN/T3577-2013 | 转基因成分检测棉花PCR-DHPLC检测方法 | 2013-03-01 | 2013-09-16 |
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