特色方案丨脂肪酸的测定——让你茁壮还是让你长胖？

岛津（上海）实验器材有限公司

2021/03/17 09:21

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自2020版中国药典颁布之后，不少新的检测项目成为了大家的关注焦点。药品辅料中脂肪酸的测定便是热点之一。同时，食品、乳制品也对脂肪酸的组成尤其关注。

那么，脂肪酸的不同组成对我们的产品质量有什么影响，与我们的生活有何关联，不同的脂肪酸又如何区分检测呢？

【01 脂肪酸的组成】

脂肪酸根据碳链长度将其分为：

挥发性脂肪酸(C<6）；中链脂肪酸(612)。

常见食品和药物中所含的大多是长链脂肪酸，也就是大家关注的营养成分，一般分为3类，分别是饱和脂肪酸，反式不饱和脂肪酸和顺式不饱和脂肪酸。

所以各位干饭人要注意哦：合理的膳食结构，适度的摄入量，再搭配运动，才能收获好身体！

【02 脂肪酸成分要求】

2020年版中国药典四部中规定了供注射用大豆油亚油酸应为48.0%～58.0%、亚麻酸应为5.0%～11.0%等指标。

食品方面，《GB 10765婴儿配方食品》国家标准中蛋白质、脂肪和碳水化合物指标部分明确要求亚油酸、α-亚麻酸含量以及亚油酸与α-亚麻酸比值等参数。

以市面常见奶粉营养成分表为例，大多奶粉都标明了重点脂肪酸的含量。

有很多奶粉广告将营养成分吹的很玄乎，但其实仔细看一眼配料表，就能对亚油酸、α-亚麻酸含量了解一二。

【03 脂肪酸成分检测方法】

●衍生

中长链脂肪酸通常不直接进GC分析，一般通过在碱性条件下皂化和甲酯化，生成脂肪酸甲酯，经毛细管柱气相色谱分析。

Tips：为什么要衍生成脂肪酸甲酯？

1、降低沸点，更适合GC分析，例如：十八烷酸沸点360 ℃、十八烷酸甲酯沸点180 ℃；

2、避免拖尾、改善峰形，酸相比于酯类更易拖尾

●色谱分析

脂肪酸组成通常采用FID检测器，而非MS检测器——主要因为二氰丙基色谱柱容易流出产生干扰（m/z 472）和污染离子源；此外MS在同分异构体的分析上也无法体现出优势。因此，色谱柱选择是大多数检测人员的关注焦点。

药典通则0713、食品GB 5009.168、AOAC 996.06等大多数方法推荐使用聚二氰丙基硅氧烷-强极性固定相（SH-Rt-2560,100 m, 0.25 mm ID, 0.20 μm ），而药典大豆油以及部分应用中会用到FAMEWAX、WAX、2330等色谱柱…

这些柱子到底有啥区别呢？一图看懂！

话不多说，上图！

图1, 28种脂肪酸甲酯分析- SH-FAMEWAX

色谱柱：SH-FAMEWAX, 30 m, 0.32 mm ID, 0.25 μm

样品: 12 mg/mL total FAMEs

进样: 0.5 μL (分流比 150:1)@250 °C

柱温: 195 °C to 240 °C at 5 °C/min (hold 1 min)

载气：H2,

线速度: 62 cm/sec

检测器：FID @ 250 °C

图2，36种常见脂肪酸甲酯混合标准溶液-SH-Rtx-Wax

图3, 37种脂肪酸甲酯分析完整谱图- SH-Rt-2560

色谱柱：SH-Rt-2560, 100 m, 0.25 mm ID, 0.20 μm (cat.# 13198)

浓度: 1,000 μg/mL

进样: 1 μL split (分流比 20:1)

柱温: 100 °C (保持4 min) to 240 °C at 3 °C/min (保持 15 min)

载气：He, 恒流

流量：1.0 mL/min

检测器：FID @ 285 °C

图4, C18脂肪酸甲酯顺反异构体分析图- SH-Rt-2560

对比图1、2和图3、4可知，如果需要对脂肪酸进行顺、反异构体的分析时（尤其C18、C22、C24组分），则有必要选用SH-Rt-2560，但是若仅需了解脂肪酸的组成，那么选用分析速度更快的Wax/FAMEWAX色谱柱即可。

SH-Rtx-2330固定相是硅烷键，极性稍弱于256，但是2330耐受温度有所提高，并且流出明显降低。（如果需要分离顺反异构体，同时只有MS检测器推荐使用2330色谱柱。

图5，C18:1区域顺/反式标准品及样品图对比- SH-Rtx-2330对比SH-Rt-2560

如上图，SH-Rt-2330在标准品分离方面与SH-Rt-2560不分伯仲（蓝色），但是在实际样品中SH-Rt-2560色谱柱还是能够多分离出不同的组分(Cis-9红色）。综上， SH-Rtx-2330可以提供相当好的分离效果，但使用SH-Rt-2560可以尽可能多地分离顺反异构体。

引用：

[1]High-Resolution GC Analyses of Fatty Acid Methyl Esters (FAMEs)

[2] Trans fatty acids analysis part 2: Let’s look at actual samples with incurred TFAs

[3] 2020版药典丨大豆油可以药用？请收下质量评价（脂肪酸组成）应对秘籍

[4] GB 5009.168-2016 食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定

[5] GB 5009.257-2016 食品安全国家标准食品中反式脂肪酸的测定

[6]GB 10765—2010食品安全国家标准婴儿配方食品

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