仙茅中仙茅苷的测定
色谱柱ShimNex CS C18
摘要
本文建立了仙茅中仙茅苷的HPLC测定方法。
参照2020版《中国药典》仙茅含量测定的色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析仙茅中仙茅苷。
结果显示,仙茅苷峰型对称,理论塔板数大于3000,仙茅苷与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为仙茅中仙茅苷的检测提供参考。
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一.实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪;
色谱柱:ShimNex CS C18
(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01230-01;S/N:1FC07857);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Disc HPPTFE针式过滤器(P/N:380-00341);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
Nichipet Air移液枪:
Nichipet Air 0.5-10 μL(P/N:00-NAR-10);
Nichipet Air 10-100 μL(P/N:00-NAR-100);
Nichipet Air 100-1000 μL(P/N:00-NAR-1000);
Nichipet Air 1000-10000 μL(P/N:00-NAR-10000)。
1.2 对照品溶液的制备
取仙茅苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含70 μg的溶液,即得。
1.3. 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约1g,精密称定,精密加入甲醇50 mL,称定重量,加热回流2小时,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液20 mL,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:ShimNex CS C18
(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01230-01;S/N:1FC07857)
柱温:25℃
检测波长:285 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 μL
流动相:
A:0.1%磷酸水溶液
B:乙腈
A:B=79:21
二.实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液和供试品溶液色谱图如下:
对照品溶液
供试品溶液
三.结论
本文建立了仙茅中仙茅苷的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》仙茅含量测定的色谱条件,采用色谱柱ShimNex CS C18分析仙茅中仙茅苷,结果显示,仙茅苷峰型对称,理论塔板数大于3000,仙茅苷与相邻杂质峰基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为仙茅中仙茅苷的检测提供参考。
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