川牛膝中杯苋甾酮的测定
色谱柱Shim-pack GISS C18
本文建立了川牛膝中杯苋甾酮的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm )分析杯苋甾酮,杯苋甾酮峰的理论塔板数为36965,杯苋甾酮与相邻杂质峰能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为川牛膝中杯苋甾酮的检测提供参考。
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1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
色谱柱:
Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm;P/N:227-30061-07)
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器);
SHIMSEN Disc HPPTFE针式过滤器(P/N:380-00341);
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
Nichipet Air移液枪:
Nichipet Air 0.5-10 μL(P/N:00-NAR-10);
Nichipet Air 10-100 μL(P/N:00-NAR-100);
Nichipet Air 100-1000 μL(P/N:00-NAR-1000);
Nichipet Air 1000-10000 μL(P/N:00-NAR-10000)。
1.2 对照品溶液的制备
取杯苋甾酮对照品适量,精密称定,加甲醇制成每 1mL含 25μg的溶液,即得。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20 mL,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4 分析条件
色谱柱:Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm )
柱温:30℃
检测波长:243 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 μL
流动相:甲醇—水
2. 实验结果
按照上述色谱条件(1.4)进行采集,对照品溶液色谱图和样品色谱图如下:
对照品溶液
供试品溶液
3. 结论
按照《中国药典》中色谱条件,建立了川牛膝中杯苋甾酮的HPLC 测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm )分析杯苋甾酮,杯苋甾酮峰的理论塔板数为36965, 杯苋甾酮与相邻杂质峰能达到基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为川牛膝中杯苋甾酮的检测提供参考。
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