方案摘要
方案下载应用领域 | 医疗/卫生 |
检测样本 | 全血/血清/血浆 |
检测项目 | |
参考标准 | 新方法 |
键合C4基团的Proteonavi S5 ,对于酸性、中性、碱性蛋白质能取得与C18、C8色谱柱同等能力的保留与分离,同时能得到更高的回收率。
Proteonavi S5的溶出行为 ~与他社色谱柱的比较~ 1
Keywords : Proteonavi、蛋白质、白蛋白、卵清蛋白、0.1 vol% TFA
Proteonavi S5是一款以孔径为30 nm的硅胶作为基材、键合C4基团的蛋白质?肽类化合物分析色谱柱。本次,以6种蛋白质(核糖核酸酶A、细胞色素C、溶菌酶、牛血清白蛋白、肌血球素、卵清蛋白)作为分析目标,将ProteonaviS5与键合C8基团的CAPCELL PAK C8 SG300 S5以及两款他社色谱柱——键合联苯基色谱柱(孔径45nm,粒径3.5 μm)和大孔径核壳型C18色谱柱(粒径3.6μm)进行对比,对这4款色谱柱的溶出行为进行了考察。
表1列出了实验所用的样品。
实验所得色谱图如图1。流动相中添加了0.1 vol% TFA,在水-乙腈系统下进行梯度洗脱,将各款色谱柱的溶出行为与Proteonavi S5进行对比。
由图1可知,键合C4官能团的Proteonavi S5的保留能力与键合联苯基、C8及C18基团的色谱柱几乎相同,而键合联苯基的色谱柱对于酸性蛋白质白蛋白(pI= 4.7)、核壳型大孔径C18色谱柱对酸性蛋白质卵清蛋白(pI= 4.5)的回收率均较低,基本没有溶出。
另外,一般情况下,官能团烷基链越短,蛋白质的回收率越高,因此,与CAPCELL PAK C8SG300 S5相比, Proteonavi S5所得色谱峰略高。同时, CAPCELL PAK C8 SG300 S5和Proteonavi S5对于酸性蛋白质白蛋白和卵清蛋白均能得到良好溶出。
综上所述,键合C4基团的Proteonavi S5 ,对于酸性、中性、碱性蛋白质能取得与C18、C8色谱柱同等能力的保留与分离,同时能得到更高的回收率。
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