Proteonavi S5的溶出行为牛血清白蛋白检测与他社色谱柱的比较～ 1

Proteonavi S5的溶出行为　～与他社色谱柱的比较～ 1

Keywords : Proteonavi、蛋白质、白蛋白、卵清蛋白、0.1 vol% TFA

Proteonavi S5是一款以孔径为30 nm的硅胶作为基材、键合C4基团的蛋白质?肽类化合物分析色谱柱。本次，以6种蛋白质（核糖核酸酶A、细胞色素C、溶菌酶、牛血清白蛋白、肌血球素、卵清蛋白）作为分析目标，将ProteonaviS5与键合C8基团的CAPCELL PAK C8 SG300 S5以及两款他社色谱柱——键合联苯基色谱柱（孔径45nm，粒径3.5 μm）和大孔径核壳型C18色谱柱（粒径3.6μm）进行对比，对这4款色谱柱的溶出行为进行了考察。

表1列出了实验所用的样品。

实验所得色谱图如图1。流动相中添加了0.1 vol% TFA，在水-乙腈系统下进行梯度洗脱，将各款色谱柱的溶出行为与Proteonavi S5进行对比。

由图1可知，键合C4官能团的Proteonavi S5的保留能力与键合联苯基、C8及C18基团的色谱柱几乎相同，而键合联苯基的色谱柱对于酸性蛋白质白蛋白（pI= 4.7）、核壳型大孔径C18色谱柱对酸性蛋白质卵清蛋白（pI= 4.5）的回收率均较低，基本没有溶出。

另外，一般情况下，官能团烷基链越短，蛋白质的回收率越高，因此，与CAPCELL PAK C8SG300 S5相比， Proteonavi S5所得色谱峰略高。同时， CAPCELL PAK C8 SG300 S5和Proteonavi S5对于酸性蛋白质白蛋白和卵清蛋白均能得到良好溶出。

综上所述，键合C4基团的Proteonavi S5 ，对于酸性、中性、碱性蛋白质能取得与C18、C8色谱柱同等能力的保留与分离，同时能得到更高的回收率。