方案摘要
方案下载应用领域 | 制药/生物制药 |
检测样本 | 其他 |
检测项目 | 含量测定 |
参考标准 | 无 |
客户提供胆固醇供试品,反馈胆固醇紫外吸收弱,在UV-VIS检测器上无法获得高灵敏度检测,大曹技术中心使用低柱流失C18色谱柱 CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 3.0 mm i.d.×50 mm,在气溶胶型NQAD检测器上,能够实现胆固醇的高灵敏度检测。
胆固醇的NQAD检测
胆固醇,又称胆甾醇,是一种环戊烷多氢菲的衍生物,在人体中扮演着十分重要的角色,它是合成胆酸的原料、类固醇激素的前体,同时也是细胞膜的基本组成成分。然而过量的胆固醇也是造成动脉粥样硬化的元凶。
客户提供胆固醇供试品,反馈胆固醇紫外吸收弱,在UV-VIS检测器上无法获得高灵敏度检测,希望测试NQAD检测器(气溶胶激光计数检测器)的检量限。
分析结果
大曹技术中心使用低柱流失C18色谱柱 CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 3.0 mm i.d.×50 mm,以纯乙腈作为流动相,对0.1mg/mL胆固醇供试品进行检测,结果如下图所示:
HPLC Conditions :
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 3.0 mm i.d.×50 mm
流动相:乙腈
流速:1.0 mL / min
温度:35°C
检测:NQAD; 喷雾温度30 ℃,气化温度35 ℃,Filter 5
浓度:0.1 mg/mL(甲醇溶解)
进样量:10 µL
方法学验证
精密度:
连续进样6针计算精密度RSD% =1.54%,上图为6针叠加色谱图,可看到重现性良好。
线性:
以5 µg/mL、10 µg/mL、50 µg/mL、100 µg/mL浓度进样绘制标准曲线,得到结果上图所示,由于NQAD检测器为线性响应,以线性拟合得到R²=0.9979。
定量限结果:
如上图所示,以标曲最小浓度点(5 μg/mL)计算得到S/N=26,以S/N=10计算定量限约为1.92 µg/mL,能够实现胆固醇的高灵敏度检测。
分析注意
仪器定量限的数值与方法相关,在不同流动相条件、不同色谱柱的情况下,定量限结果会有所不同。
总结
综上所述,使用低流失C18色谱柱CAPCELL PAK MGIII S5;3.0mm i.d.×50mm,在气溶胶型NQAD检测器上,能够实现胆固醇的高灵敏度检测。
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