胆固醇的NQAD检测

2021/07/13   下载量: 1

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 其他
检测项目 含量测定
参考标准

客户提供胆固醇供试品,反馈胆固醇紫外吸收弱,在UV-VIS检测器上无法获得高灵敏度检测,大曹技术中心使用低柱流失C18色谱柱 CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 3.0 mm i.d.×50 mm,在气溶胶型NQAD检测器上,能够实现胆固醇的高灵敏度检测。

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胆固醇的NQAD检测

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胆固醇,又称胆甾醇,是一种环戊烷多氢菲的衍生物,在人体中扮演着十分重要的角色,它是合成胆酸的原料、类固醇激素的前体,同时也是细胞膜的基本组成成分。然而过量的胆固醇也是造成动脉粥样硬化的元凶。

 

客户提供胆固醇供试品,反馈胆固醇紫外吸收弱UV-VIS检测器上无法获得高灵敏度检测,希望测试NQAD检测器(气溶胶激光计数检测器)的检量限。

 

分析结果

大曹技术中心使用低柱流失C18色谱柱 CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 3.0 mm i.d.×50 mm,以纯乙腈作为流动相,对0.1mg/mL胆固醇供试品进行检测,结果如下图所示:

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HPLC Conditions

色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 3.0 mm i.d.×50 mm

流动相:乙腈

流速:1.0 mL / min

温度:35°C

检测:NQAD; 喷雾温度30 ℃,气化温度35 ℃,Filter 5

浓度:0.1 mg/mL(甲醇溶解)

进样量:10 µL

 

方法学验证

精密度:

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连续进样6针计算精密度RSD% =1.54%,上图为6针叠加色谱图,可看到重现性良好。

 

线性:

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5 µg/mL10 µg/mL50 µg/mL100 µg/mL浓度进样绘制标准曲线,得到结果上图所示,由于NQAD检测器为线性响应,以线性拟合得到R²=0.9979

 

定量限结果:

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如上图所示,以标曲最小浓度点(5 μg/mL)计算得到S/N=26,以S/N=10计算定量限约为1.92 µg/mL,能够实现胆固醇的高灵敏度检测。

 

分析注意

仪器定量限的数值与方法相关,在不同流动相条件、不同色谱柱的情况下,定量限结果会有所不同。

 

总结

综上所述,使用低流失C18色谱柱CAPCELL PAK MGIII S5;3.0mm i.d.×50mm,在气溶胶型NQAD检测器上,能够实现胆固醇的高灵敏度检测。


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