方案摘要
方案下载应用领域 | 生物产业 |
检测样本 | 其他 |
检测项目 | |
参考标准 | 乙酸-乙腈 正己烷 磷酸盐-三乙胺缓冲液 |
组织中喹诺酮类残留物主要是原形药物,故一般选择原形药物作指示残留。多数代谢产物代谢较快,如脱甲基产物,可能主要存在于排泄物中,一些喹诺酮类的代谢产物,如脱甲基二氟沙星、脱乙基恩诺沙星(即环丙沙星)仍具有较强的生物活性,应列入总残留物
组织中喹诺酮类残留物主要是原形药物,故一般选择原形药物作指示残留。多数代谢产物代谢较快,如脱甲基产物,可能主要存在于排泄物中,一些喹诺酮类的代谢产物,如脱甲基二氟沙星、脱乙基恩诺沙星(即环丙沙星)仍具有较强的生物活性,应列入总残留物
实验材料: 动物组织
试剂、试剂盒: 乙酸-乙腈 正己烷 磷酸盐-三乙胺缓冲液
仪器、耗材: 相色谱条件色谱柱 离心管 注射器
实验步骤:
1. 前处理
称取约2 g解冻试样,切成薄片并放入50 mL离心管中,加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液,均质1 min后放入超声波池中超声3 min, 4500 r/min离 心5 min,将上清液小心移入100 mL塑料离心管中,离心残渣用20 mL 1%乙酸-乙腈溶液再提取一次,合并上清液。
将合并后的上清液用乙腈饱和正己烷25 mL脱脂净化,弃去上层溶液,下层液移至100 mL烧瓶中,于40 ℃水浴中旋转蒸发近干,用氮气吹干。在残渣中加入1 mLHPLC流动相,快速混匀和超声3 min溶解残渣。将溶解液转移至1 mL —次 性注射器中,通过注射器滤膜(0.45 um)过滤至HPLC进样小瓶中,进行HPLC 测定分析。
2. 仪器参数液
相色谱条件色谱柱:4.0 mm × 250 mm× 5 um, Hyprsil ODS;
柱温:30 ℃;
洗脱模式1: 0.01 mol/L磷酸盐-三乙胺缓冲液(pH3.0)(0.68 mL磷酸用水稀释至1 L,再用三乙胺调节酸度至pH3.0)。磷酸盐-三乙胺缓冲液-乙腈(80 + 20)混合,流速:1 mL/min。
洗脱模式2: 梯度洗脱,流速 0.8 mL/min。
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