方案摘要
方案下载应用领域 | 生物产业 |
检测样本 | 其他 |
检测项目 | |
参考标准 | 氯化锂是强脱水剂,可降低 RNA 的溶解性 ( Hearst and Vinograd 1961a, b),并剥离染色质上的蛋白质(Kondo 1979)。 |
质粒粗提物中的高分子质量 RNA 和蛋白质可在高浓度氯化锂溶液中形成沉淀,从而可通过低速离心加以分离(实例请见Kondo et al. 1991)。
实验原理:
氯化锂沉淀法去除质粒制备物中小片段核酸(包括 DNA 和 RNA ) 的原理是基于两种核酸在氯化锂溶液中的溶解度有所不同。氯化锂是强脱水剂,可降低 RNA 的溶解性 ( Hearst and Vinograd 1961a, b),并剥离染色质上的蛋白质(Kondo 1979)。因此,质粒粗提物中的高分子质量 RNA 和蛋白质可在高浓度氯化锂溶液中形成沉淀,从而可通过低速离心加以分离(实例请见Kondo et al. 1991)。
实验材料:DNA 样品
试剂、试剂盒:乙醇 异丙醇 LiCl 乙酸钠 TE
仪器、耗材 :Sorvsll SS-34 转子或性能相同的替代转子
操作步骤:
一、材料
1. 缓冲液和溶剂
乙醇,异丙醇,LiCl ( 4 mol/L),乙酸钠(3mol/L, pH 5.2),TE ( pH 8.0),含有浓度为 20 μg/ml RNase A 的 TE ( pH 8.0)。
2. 核酸和寡核苷酸
DNA 样品,CsCl 密度梯度离心纯化。
3. 离心机和转子
Sorvsll SS-34 转子或性能相同的替代转子
培养基迅速变黄原因+解决方法
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