人转化生长因子Β2(TGFΒ2)ELISA试剂盒操作步骤

2024/01/03   下载量: 0

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应用领域 生物产业
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工作原理:本试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术(ELISA)。测定样品中人转化生长因子β2水平。向预先包被了抗人转化生长因子β2抗体的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入生物素标记的抗转化生长因子β2抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后,在450 nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,样本中的人转化生长因子β2浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线计算出样本中人转化生长因子β2的浓度。

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中文别名:人转化生长因子Β2(TGFΒ2)ELISA试剂盒
英文名称:Human transforming growth factors β2, TGFβ2 Elisa Kit
特异性:可检测样本中的人转化生长因子β2,且与其类似物无明显交叉反应。
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清 和 其他生物液体

背景:
转化生长因子β2(TGF-β2)前体蛋白由19个氨基酸的信号肽、283个氨基酸的前区和112个氨基酸的成熟区组成。人TGF-β2成熟区与人TGF-β1和TGF-β3的同源性分别为71%和80%,与小鼠TGF-β2的同源性为97%。它可由各类细胞表达,包括破骨细胞、胸腺上皮细胞、角蛋白细胞、肝细胞、胃的主细胞和卫星细胞等。TGF-β2具有显著的种属交叉生物活性,如人TGF-β2对小鼠细胞具有活性,而猪TGF-β2对兔细胞具有活性等。TGF-β2具有4种基本活性:是大部分类型细胞的生长抑制因子;可增强细胞外基质的沉积;具有免疫抑制作用,抑制抗原递呈细胞表达IL-12和CD40L,上调IL-10分泌;在胚胎发育期表达于离散区域,如上皮、心肌、手足的软骨和骨骼、以及神经系统,提示其具有特异性的功能。

工作原理:本试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术(ELISA)。测定样品中人转化生长因子β2水平。向预先包被了抗人转化生长因子β2抗体的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入生物素标记的抗转化生长因子β2抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后,在450 nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,样本中的人转化生长因子β2浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线计算出样本中人转化生长因子β2的浓度。

产品描述
试剂名称    数量    试剂名称    数量
96孔板(预包被)    1    96孔板覆膜    2
标准品    2    稀释液    1×45mL
检测溶液A    1×120μL    检测溶液B    1×120μL
TMB底物    1×9mL    终止液    1×6mL
浓洗涤液(30×)    1×20mL    使用说明书    1

需自备的设备及试剂
450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
单道或多道微量加液器及吸头
稀释样品的EP管
蒸馏水或去离子水
吸水纸
盛放洗液的容器

试剂盒的储存及有效期
未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。
使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。

稳定性
经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

注意:
试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。

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