蛋白质、氨基酸分解试验方法!
⒈吲哚试验
(1)原理:有些细菌具有色氨酸酶,能分解培养基中的色氨酸,生成吲哚,吲哚与试剂对二甲氨基苯甲醒作用,形成玫瑰蚓味而呈红色。
(2) 方法: 将待检菌接种至蛋白脏水培养基中, 35℃孵育1~2 日,沿管壁徐徐加入柯凡克( Kovac)试剂0.5 ml,即刻观察结果。
(3) 结果判断: 两液面交界处呈红色者为阳性,无红色者为阴性(图3-31)。
⒉脲酶试验
(1)原理: 某些细菌能产生腮酶,分解尿素形成氨,使培养基变碱,酣红指示剂随之变红色。
(2) 方法: 将待检菌接种于含尿素的培养基中,35℃孵育1~4 日,观察是否产生红色。
(3) 结果判断: 呈红色者为服酶试验阳性(图3 - 32) 。
⒊氨基酸脱呈交酶试验
(1)原理: 有些细菌能产生某种氨基酸脱殷酶,使该种氨基酸脱去援基,生成胶(如赖氨酸→尸肢,鸟氨酸→腐肢,精氨酸→精胶) ,从而使培养基变碱性,指示剂变色。
(2) 方法:挑取纯菌落接种于含某种氨基酸(赖氨酸、鸟氨酸或精氨酸)的培养基及不含氨基酸的对照培养基中,加元菌石蜡油覆盖,35℃孵育4 日,每日观察结果。
(3) 结果判断: 若仅发酵葡萄糖显黄色为阴性,由黄色变为紫色为阳性。对照管(无氨基酸)为黄色(图3 - 33) 。
⒋苯丙氨酸脱氨酶试验
(1) 原理: 有些细菌能产生苯丙氨酸脱氨酶,使苯丙氨酸脱去氨基生成苯丙酣酸,与三氯化铁作用形成绿色化合物。
(2) 方法:将待检菌接种于苯丙氨酸琼脂斜面,35℃孵育18~24 h ,在生长的菌苔上滴加三氯化铁试剂,立即观察结果。
(3) 结果判断:斜面呈绿色者为阳性(图3 - 34) 。
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