柱效测定
样品和缓冲液
①1%的丙酮为样品,纯水或实验缓冲液为流动相,监测紫外吸收峰图;
②0.8M NaCl为样品,0.4M NaCl为流动相,监测电导峰图;
上样条件
①上样体积:为柱体积的1%;
②上样流速:30cm/h的线性流速;
积分
根据峰图积分,看积出的峰的理论塔板数(HETP)、对称性(AS)和柱效评价因子(塔板高度/填料粒径),每种填料都有其推荐的数值,需要查阅说明书。
具体积分流程如下
(以泰渡公司的ACHROM纯化仪过样品丙酮,通过对样品的紫外吸收峰图积分为例)
一、首先打开已保存的图,如果觉得线条太多,可以都取消只保留UV280
二、点击菜单栏峰积分
可看到如下界面
填写柱子高度以及填料粒径,并点击Peak window,可看到如下界面
选定要分析的峰,再点击Reject peaks,填写数字1,最后点击确定,出现下图;
三、右击选择性能
可看到如下界面:选择PeakTable,勾选理论塔板数和对称性
点击确定,就可以在图谱下查找柱效结果了
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