流式细胞仪的基本功能与应用

流式细胞仪的基本功能与应用


定性或定量分析功能细胞膜:细胞表面抗原,表面糖类,表面受体,膜电位,膜结合钙离子,细胞表面电荷等,这对确定细胞的性质及其功能重要;细胞质:各种细胞成分,包括蛋白质、RNA、各种细胞器中的特殊成分、各种抗原、基因编码蛋白、细胞因子等;细胞核:DNA、RNA、蛋白质等 。


分选功能:可将具有特定性状或功能的细胞从混合细胞群中分离出来,再进行分析或培养。优点:分选纯度高(可达99%),分选回收率高,可分选活细胞。


流式细胞仪的结构:激光光源及光束形成系统,流动室及液流驱动系统,光学系统:透镜、滤光片、小孔、聚焦光源,收集不同波长的荧光信号。


信号检测与分析:光电倍增管(PMT )、补偿电路。荧光信号转换为电信号,并将信号放大。存储、显示、分析系统。


流式细胞术基本原理


1.前向散射与侧向散射


前向散射光 (forward scatter):FSC信号的强弱与细胞的大小相关;


侧向散射光(side scatter):SSC信号的强弱与细胞内的颗粒多少相关。


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