兔胎盘绒毛膜滋养层细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

兔胎盘绒毛膜滋养层细胞

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔胎盘绒毛膜滋养层细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：

实验室分离的兔胎盘绒毛膜滋养层细胞采用胰蛋白酶-DNA酶联合消化法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔胎盘绒毛膜滋养层细胞经Cytokeratin-7免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

兔胎盘绒毛膜滋养层细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。绒毛膜是由滋养层和胚外中胚层的壁层构成。胚泡植入子宫内膜后，在胚泡表面形成许多绒毛样的突起，以细胞滋养层为中轴，外裹合体滋养层，称初级干绒毛。胚外中胚层长入初级干绒毛的中轴，使初级干绒毛变成了次级干绒毛。当绒毛膜的胚外中胚层内形成血管网和结缔组织，并与胚体内的血管相通时，次级干绒毛改称三级干绒毛。三级干绒毛末端的细胞滋养层细胞形成细胞滋养层壳。随着胚胎发育，丛密绒毛膜与基蜕膜共同构成了胎盘，而平滑绒毛膜则和包蜕膜一起逐渐与壁蜕膜融合。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Pyr-Gln-OH  109481-23-4  C10H15N3O5

Pyr-Gly-OH  29227-88-1  C7H10N2O4

Pyr-OPcp  28990-85-4  C11H6Cl5NO3

Pyr-Phe-Leu-pNA  85901-57-1  C26H31N5O6

Pyr-Phe-OH  21282-12-2  C14H16N2O4

PyOxim  153433-21-7  C17H29F6N5O3P2

Pyr-4MβNA  94102-66-6  C16H16N2O3

Pyr-Ala-OH  21282-08-6  C8H12N2O4

Pyr-AMC  66642-36-2  C15H14N2O4

Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC  155575-02-3  C37H57N13O9

pTH-Related Protein (1-37) (human, mouse, rat)  206010-80-2  C197H317N63O53

pTH-Related Protein (1-40) (human, mouse, rat)  120298-73-9  C207H334N66O58

pTH-Related Protein (67-86) amide (human, bovine, dog, mouse, ovine, rat)  134981-49-0  C108H173N27O35

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小鼠血小板衍生生长因子CC(PDGF-CC)ELISA试剂盒 ，英文名： PDGF-CC ELISA Kit

小鼠(HYD)ELISA检测试剂盒MouseHydrocoisone,HYDELISAKit 96T/48T

人激肽释放酶1(KLK 1)免疫试剂盒 Human Kallikrein 1,KLK 1 ELISA Kit

RatCalcitonin,CTELISAKit大鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

10%CTAB(Hexadecylimethylammoniumbromide)100毫升

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA试剂盒小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

兔胎盘绒毛膜滋养层细胞小鼠S100钙结合蛋白A8(S100A8)ELISA试剂盒 ，英文名： S100A8 ELISA Kit

人脂蛋白α(Lp-α)ELISA检测试剂盒Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKit 96T/48T

大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)免疫试剂盒 Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit

英文名称Rat17-ANPELISAKit大鼠17-羟-孕同(17-ANP)规格：96T/48T

裂解液VII-2葡萄球菌裂解液

ELISAKitBGP/Gehrelin人脑肠肽规格：48T/96T

小鼠抑制素A(INH-A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human granulysin (granulysin) ELISA Kit 人颗粒溶素(granulysin)ELISA试剂盒

HumanGasinELISAKit 人胃泌素(Gasin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor6-K-PGELISAKit大鼠6同前列腺素规格：48T/96T

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MousemammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit小鼠癌标志物-CA153ELISA试剂盒规格：96T/48T