兔胰岛细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

兔胰岛细胞

培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔胰岛细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：

实验室分离的兔胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔胰岛细胞经DTZ染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

兔胰岛细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌生长抑素，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%，每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规治疗产生的严重低血糖症状，具有创伤小及并发症少等优点，是最有前景的Ⅰ型糖尿病治疗方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤，分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Z-D-Arg(Z)₂-OH  104321-57-5  C30H32N4O8

Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA . 2 HCl  113711-77-6  C28H39N11O7 · 2 HCl

Z-D-Asn(Trt)-OH  200259-87-6  C31H28N2O5

Z-D-Asn-OH  4474-86-6  C12H14N2O5

Z-D-Asp(OBzl)-OH  5241-62-3  C19H19NO6

Z-D-Ala-OSu  27167-53-9  C15H16N2O6

Z-D-allo-Thr(tBu)-OH . DCHA  100157-55-9  C16H23NO5 · C12H23N

Z-Dap(Boc)-OH  16947-84-5  C16H22N2O6

Z-Dap(Fmoc)-OH  142855-80-9  C26H24N2O6

Z-Dap-OH  35761-26-3  C11H14N2O4

Z-cis-Hyp-OH  13504-86-4  C13H15NO5

Z-cyclohexyl-Gly-OH  69901-75-3  C16H21NO4

Z-Cys(Bzl)-OH  3257-18-9  C18H19NO4S

Z-Dab(Boc)-OH . DCHA  3350-13-8  C17H24N2O6 · C12H23N

Z-Dab-OH  62234-40-6  C12H16N2O4

小鼠血小板反应蛋白2(THBS2)ELISA试剂盒 ，英文名： THBS2 ELISA Kit

兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA检测试剂盒rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 96T/48T

犬白介素15(IL15)免疫试剂盒 Dog Ierleukin-15,IL15 ELISA kit

英文名称HumanAquaporin0ELISAKit人水通道蛋白0(AQP0)规格：96T/48T

大鼠肾上腺髓质素(AM)基因重组表达载体(pcDNA-AM)感受态菌DH-5α1毫升

RatL-LactateDehydrogenase,L-LDHELISA试剂盒大鼠L-鼠乳酸脱氢酶(L-LDH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

兔胰岛细胞小鼠P-选择素糖蛋白配体1(PSGL1)ELISA试剂盒 ，英文名： PSGL1 ELISA Kit

人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA检测试剂盒HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T

大鼠果糖胺(FRA)免疫试剂盒 Rat fructosamin,FRA ELISA kit

英文名称CollagenII型胶原规格：96T/48T

0酸二酯酶1A(Phosphodiesterase1A)0.25单位

ELISAKitTdT人末端脱氧核苷酸转移酶规格：48T/96T

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human soluble cytokine receptor (sCKR) ELISA Kit 人可溶性细胞因子受体(sCKR)ELISA试剂盒

HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit 人鸟氨酸脱羧酶(ODC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Mouse25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit小鼠25羟基维生素D3规格：48T/96T

饮料谷氨酰胺比色法定量检测试剂盒20次

MouseL-phenylalanine,LPAELISAKit小鼠苯氨酸(LPA)ELISA试剂盒规格：96T/48T