兔脾淋巴细胞

报价:¥4850
供货周期: 现货
品牌: 派瑞曼
规格: 25mL
货号: P-X2186
有效期: 12月
标准值: T
上海博湖生物科技有限公司
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产品详情

兔脾淋巴细胞
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产品名称

兔脾淋巴细胞

组织来源

脾脏

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

生长特性

贴壁

传代特性

不增殖;不传代

细胞形态

圆形

 

培养信息:

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培养基:含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:悬浮

细胞形态:圆形

传代特性:不增殖;不传代

消化液:0.25%胰蛋白酶

培养条件:气相:空气,95%CO25%

兔脾淋巴细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介:

实验室分离的兔脾淋巴细胞采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为1×106cells/瓶。

质量检测:

实验室分离的兔脾淋巴细胞经过检测,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

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细胞简介:

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兔脾淋巴细胞分离自脾脏组织;脾脏是机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心。位于左季肋区后外方肋弓深处,与911肋相对,长轴与第10肋一致。膈面与膈肌和左肋膈窦相邻,前方有胃,后方与左肾、左肾上腺毗邻,下端与结肠脾沟相邻,地柔软的网状内皮细胞器官。淋巴细胞(lymphocyte)白细胞的一种,由淋巴器官产生,机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异,可分为中枢淋巴器官(又名初级淋巴器官)和周围淋巴器官(又名次级淋巴器官)两类。前者包括胸腺、腔上囊或其相当器官(有人认为在哺乳动物是骨髓)。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞,成熟后将其转送至周围淋巴器官。后者包括脾、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖,继而发挥其免疫功能。

原代培养原理和应用:
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一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。QQ截图20241029145739.jpg

二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
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H-Trp-Asn-OH  175027-11-9  C15H18N4O4

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贴壁细胞传代操作步骤:

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用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;

弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤:

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悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。

(1)直接传代法

① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;

② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;

③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。

(2)离心传代法

① 将细胞悬液转移到离心管内;

② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;

③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;

④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。


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