小鼠肺动脉平滑肌细胞

小鼠肺动脉平滑肌细胞

培养信息：

培养基：基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传2-3代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠肺动脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：

实验室分离的小鼠肺动脉平滑肌细胞采用中性蛋白酶 - 胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠肺动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

小鼠肺动脉平滑肌细胞分离自肺动脉组织；肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。肺动脉平滑肌细胞是肺血管的重要结构细胞之一，在调控肺血管的收缩和舒张功能中有重要作用。肺动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺动脉平滑肌细胞的异常是肺动脉高压发生发展的重要病理学特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的关键。研究表明，急性和慢性缺氧均可导致肺动脉高压，即缺氧性肺动脉高压，推断缺氧可能是通过促进肺动脉平滑肌细胞的增殖而参与缺氧性肺动脉高压的发生发展。肺动脉平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺动脉平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

BIBX 1382  196612-93-8  C18H19ClFN7

SC75741  913822-46-5  C29H23N7O2S2

EUK 134  81065-76-1  C18H18ClMnN2O4

Nystatin (Fungicidin)  1400-61-9  C47H75NO17

Nateglinide  105816-04-4  C19H27NO3

Vidarabine  5536-17-4  C10H13N5O4

MPI-0479605  1246529-32-7  C22H29N7O

Pyridoxal 5 phosphate  54-47-7  C8H10NO6P

DQP 1105  380560-89-4  C29H24BrN3O4

1-Deoxymannojirimycin hydrochloride  73465-43-7  C6H13NO4.HCl

Leuprolide Acetate  74381-53-6  C61H88N16O14

S- (+)-Rolipram  85416-73-5  C16H21NO3

SUN-B 8155  345893-91-6  C14H15N3O3

CD 2314  170355-37-0  C23H24O2S

MnTBAP Chloride  55266-18-7  C48H28ClMnN4O8

小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat dopamine anspoer (DAT) ELISA Kit 大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA试剂盒

Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor(ADAM9)ELISAKit大鼠解整合素样金属蛋白酶9规格：48T/96T

荧光素酶高通量筛选荧光检测试剂盒

MouseIerleukin15,IL-15ELISAKit小鼠白介素15(IL-15)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠肺动脉平滑肌细胞小鼠N-乙酰β-D-基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA试剂盒 ，英文名： NAGase ELISA Kit

人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA检测试剂盒HumanPlateletassociatedaibody,PA-IgMELISAKit 96T/48T

大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)免疫试剂盒 Rat Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit

CLIAKitfor大鼠卵巢癌标志物CA125ELISAKit大鼠卵巢癌标志物CA125规格：48T/96T

0酸二酯酶7B(Phosphodiesterase7B)0.25单位

ELISAKitIgHV人免疫球蛋白重链可变区规格：48T/96T

小鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 人克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒

HumanL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit 人L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor(n1)ELISAKit大鼠轴突生长诱向因子1规格：48T/96T

饮料污染ATP生物发光法定量检测试剂盒50次

MouseIerleukin-7,IL-7ELISAKit小鼠白介素7(IL-7)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。