小鼠腹膜间皮细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

小鼠腹膜间皮细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的小鼠腹膜间皮细胞采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠腹膜间皮细胞经PCK、Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

小鼠腹膜间皮细胞分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积最大、配布最复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮，是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞，正常大小约为15-25微米，细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑，使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护，不会互相磨损受伤。而间皮所生产的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成，分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

RU 26752  76676-33-0  C25H36O3

8-Bromo-cGMP, sodium salt  51116-01-9  C10H10BrN5NaO7P

Phenothiazine  92-84-2  C12H9NS

Tianeptine sodium  30123-17-2  C21H24ClN2NaO4S

CGP 37849  127910-31-0  C6H12NO5P

LY 231617  141545-89-3  C17H29NO.HCl

Homoquinolinic acid  490-75-5  C8H7NO4

360A iodide  737763-37-0  C27H23I2N5O2

2-chloro-3-Deazaadenosine  40656-71-1  C11H13ClN4O4

Aripiprazole  129722-12-9  C23H27Cl2N3O2

WAY-100635  162760-96-5  C25H34N4O2

Cilostamide  68550-75-4  C20H26N2O3

PD318088  391210-00-7  C16H13BrF3IN2O4

Regorafenib  755037-03-7  C21H15ClF4N4O3

Paliperidone  144598-75-4  C23H27FN4O3

小鼠血浆激肽释放酶(KLKB1)ELISA试剂盒 ，英文名： KLKB1 ELISA Kit

小鼠能a1A受体(ADRA1A)ELISA检测试剂盒Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit 96T/48T

人基质金属蛋白酶13(MMP-13)免疫试剂盒 Human Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit

Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

10倍PB浓缩缓冲溶液100毫升

Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA试剂盒小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠腹膜间皮细胞小鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat ferritin (FE) ELISA Kit 大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒

HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 人脱轻表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCobravenomneuronalprotectivefactor,CVNPFELISA试剂盒人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织3-0酸甘油脱氢酶(GAPDH)活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次

HumaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit人正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human vacuolating cytotoxin associated protein A (VacA) ELISA Kit 人空泡毒素相关蛋白A(VacA)ELISA试剂盒

Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor(Mouseovariancancermarker-CA125)ELISAKit小鼠卵巢癌标志物CA125规格：48T/96T

饮料乙比色法定量检测试剂盒20次

MouseIerleukin9,IL-9ELISAKit小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T