小鼠睾丸间质细胞

细胞简介：

小鼠睾丸间质细胞分离自睾丸组织；睾丸间质细胞成群分布在曲精小管之间，胞体呈圆形，椭圆形或不规则形，胞体较大，直径约20μm，胞质呈嗜酸性，细胞核呈圆形或卵圆形，常位于中央，染色较淡，有1～2个核仁线粒体多，呈管嵴状，无分泌颗粒。从青春期开始，睾丸间质细胞受垂体前叶嗜碱性细胞分泌的间质细胞刺激素（黄体生成素）的作用，能合成分泌雄性激素，可促进精子的发生和男性生殖器官发育，以及维持第二性征和性功能。

方法简介：

实验室分离的小鼠睾丸间质细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠睾丸间质细胞经3β-HSD免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基：基础培养基，含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠睾丸间质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养操作：

收货处理 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态：

传代密度 细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

传代代数 可传1-2代左右，建议收到细胞后尽快进行相关实验

传代比例 首次传代建议1：2传代，细胞系密度达80%-90%，即可进行传代培养操作，货期4周左右

传代方法：

1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4.待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。

备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考

客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。

注意事项：

重要提醒

1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3.传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

到货须知

1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

3.由于运输的原因，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
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