小鼠肾小球内皮细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

小鼠肾小球内皮细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的小鼠肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠肾小球内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

小鼠肾小球内皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的第一道屏障，可粘附细菌和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

[Leu5]-Enkephalin  58822-25-6  C28H37N5O7

Dexamethasone acetate  1177-87-3  C24H31FO6

Midodrine (hydrochloride)  43218-56-0  C12H18N2O4 • HCl

HOE 33187  23623-08-7  C25H24N6

Calcium Gluceptate  17140-60-2  C14H26CaO16

RN486  1242156-23-5  C35H35FN6O3

BW 723C86 hydrochloride  160521-72-2  C16H18N2OS.HCl

SIB 1757  31993-01-8  C12H11N3O

A-769662  844499-71-4  C20H12N2O3S

Ceftiofur HCl  103980-44-5  C19H17N5O7S3.HCl

BI6727(Volasertib)  755038-65-4  C34H50N8O3

Propylthiouracil  51-52-5  C7H10N2OS

[D-Trp34]-Neuropeptide Y  153549-84-9  C196H289N55O56

Benazepril  86541-75-5  C24H28N2O5

IOWH-032  1191252-49-9  C22H15Br2N3O4

小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒 ，英文名： BrdU ELISA Kit

小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA检测试剂盒MouseypsinELISAKit 96T/48T

人混合淋巴细胞反应封闭因子(MLR-Bf)免疫试剂盒 Human MLR-Bf ELISA Kit

RatcomplemefactorH,CFHELISAKit大鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1摩尔HEPESpH7.2分子生物级溶液100毫升

MouseCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTPELISA试剂盒小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠肾小球内皮细胞小鼠Endoglin蛋白(ENG)ELISA试剂盒 ，英文名： ENG ELISA Kit

人酸激酶(PK)ELISA检测试剂盒Humanpyruvatekinase,PKELISAKit 96T/48T

大鼠谷氨酰胺(Gln)免疫试剂盒 Rat glamine,Gln ELISA Kit

CLIAKitforVGCC(Humanvoltage-gatedcalciumchannel)ELISAKit人钙离子通道抗体规格：48T/96T

酶解法PCR清洁试剂盒20次

ELISAKitOVAsIgG人卵清蛋白特异性IgG规格：48T/96T

小鼠细胞色素氧化酶(CC0)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒

Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenImmunoglobulinE,IgEELISA试剂盒鸡免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞CYP1A2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒规格：96T/48T