猪主动脉平滑肌细胞

猪主动脉平滑肌细胞

培养信息：

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

猪主动脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介：

实验室分离的猪主动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的猪主动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

猪主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织；主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为：升主动脉起于左心室，至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓，弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉；在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉，以上为胸主动脉，至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉；髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用，以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象，探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点；体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

Monoacylglycerol aaLipase Inhibitor 21  1643657-35-5  C26H26O4

NFPS  405225-21-0  C24H24FNO3

C-type natriuretic peptide (1-22) (human, rat, swine)  127869-51-6  C93H157N27O28S3

SR9009  1379686-30-2  C20H24ClN3O4S

Tivozanib (AV-951)  475108-18-0  C22H19ClN4O

DiMNF  14756-24-2  C21H16O4

Celiprolol (hydrochloride)  57470-78-7  C20H33N3O4 • HCl

Nemadectin  102130-84-7  C36H52O8

FR 236924  28399-31-7  C20H36O2

Epinastine HCl  108929-04-0  C16H15N3.HCl

Isoniazid  54-85-3  C6H7N3O

AS 1269574  330981-72-1  C13H14BrN3O

TCS HDAC6 20b  956154-63-5  C26H44N2O4S

TCS 401  243967-42-2  C10H10N2O5S.HCl

GDC-0349  1207360-89-1  C24H32N6O3

小鼠腺苷A2b受体(ADORA2b)ELISA试剂盒 ，英文名： ADORA2b ELISA Kit

兔交联物(PY)ELISA检测试剂盒Rabbitpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit 96T/48T

牛载脂蛋白B100(Apo-B100)免疫试剂盒 Bovine apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit

英文名称HumanGehrelinElisakit人脑肠肽(Gehrelin)规格：96T/48T

蛋白样品树脂法去内毒素试剂盒20次

Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISA试剂盒大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

猪主动脉平滑肌细胞小鼠Cerberus蛋白(CER)ELISA试剂盒 ，英文名： CER ELISA Kit

人横纹肌辅肌动蛋白α(smActinin-α)ELISA检测试剂盒HumanskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit 96T/48T

大鼠肝细胞生长因子(HGF)免疫试剂盒 Rat hepatocyte growth factor,HGF ELISA kit

CLIAKitforVD2(HumanVitaminD2)ELISAKit人维生素D2规格：48T/96T

免疫荧光细胞流式仪间接检测试剂盒(含荧光二抗)20次

ELISAKitPGM人0酸葡萄糖变位酶规格：48T/96T

小鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit 大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒

Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Chickenα-Glucosidase,a-GluELISA试剂盒鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit小鼠(EPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。