鸡小肠黏膜上皮细胞

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。

鸡小肠黏膜上皮细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的鸡小肠黏膜上皮细胞采用中性蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的鸡小肠黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

鸡小肠黏膜上皮细胞分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

公司正在出售的产品：

Amylin (20-29) (human)  118068-30-7  C43H68N12O16

Amylin (8-37) (human)  135702-23-7  C138H216N42O45

Amyloid Bri Protein (1-23)  717122-86-6  C116H175N31O35S2

Amyloid Bri Protein (1-34) (reduced)  321853-88-7  C173H275N49O52S2

Amyloid Bri Protein (1-34)  

Aloc-Lys(Boc)-OH . DCHA  110637-53-1  C15H26N2O6 · C12H23N

Aloc-Ser-OMe  136194-92-8  C8H13NO5

AMCA-Glu-Glu-Lys-Pro-Ile-Ser-Phe-Phe-Arg-Leu-Gly-Lys(biotinyl)-NH₂  851231-19-1  C90H131N21O22S

Amylin (1-13) (human)  198328-30-2  C54H95N19O19S2

Amylin (14-20

Alarin (rat)  909409-88-7  C119H199N45O35

Allatotropin  120928-88-3  C65H103N19O17S2

Alloferon 2  347884-62-2  C46H69N19O15

Allophenylnorstatine  62023-62-5  C10H13NO3

Aloc-Ala-OH . DCHA  90508-28-4  C7H11NO4 · C12H23N

小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA试剂盒 ，英文名： Lpa ELISA Kit

猴抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA检测试剂盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T

犬凝聚素(CLU)免疫试剂盒 Dog clusterin,CLU ELISA Kit

英文名称HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)规格：96T/48T

化人体RUNX3基因重组表达载体(pCMV5-RUNX3)10微克

RatHyaluronicacid,HAELISA试剂盒大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鸡小肠黏膜上皮细胞小鼠白介素15(IL-15)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

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Humancross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit 人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

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转基因棉花MON15985品系试剂盒20次

Humansmallbreastepithelialmucin,SBEMELISAKit人小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

猪狂犬病毒抗体(RV-ab)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

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Porcinethrombomodulin,TMELISAKit 猪血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

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Plazeatiiboside,ZRELISAKit植物玉米索核苷(ZR)ELISA试剂盒规格：96T/48T