流动细胞测定仪

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流动细胞测定仪相关的厂商

  • 上海拓精工业测定仪器有限公司,是一家具有独立进出口权的股份制责任有限公司,公司成立于2004年,公司自成立以来致力于不断提高品质检测水平并秉承“诚信合作,专业经营,服务第一”的经营理念, 公司员工专业化,技术人员经验丰富。我们还吸取了日本及欧美国家一些优秀公司的先进技术理念,利用坚实的技术基础,提供准确可靠的产品售前售中和售后服务;主要为汽车制造、航天航空业、第三方实验室、国家检测机构、高校院校研究所、化工制药、医疗、能源等领域提供品质检测仪器设备、非标自动化检测设备及相关技术服务。 拓精仪器是一家专业实验室检测分析仪器研发、生产、销售一体化股份制有限公司并同时代理国际一线品牌检测分析仪器,主要产品:实验室分析仪器、动态分析检测仪器、光学检测分析仪器、材料试验机、X- ray检测分析仪器、环境试验箱实验箱、实验室设备及工业仪器设备及耗材同时也为广大客户提供实验室综合解决方案服务!公司的产品在众多行业领域迅速推广并得到客户的认可,公司将不断的把世界最先进的检测设备及工业制造设备以最直接最快捷的方式传达给我们的客户,并帮助我们的客户提高产品检测能力和制造工艺。
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  • 原能细胞科技集团由知名创业企业家瞿建国先生和上市公司开能健康(股票代码:300272)等于2014年创立,实收资本15亿元人民币。原能细胞总部位于上海张江国家科学城药谷核心区域拥有占地60多亩的原能细胞产业园、原能细胞科创园两大园区,同时也是上海张江细胞科技产业园的核心基地。原能细胞科技集团是创业老兵瞿建国先生在成功创办两家上市公司(老八股申华实业(600653)、创业板开能健康(300272)后再次创业,致力于“天下无穷人、地上无病人”的全民健康使命。 原能细胞科技集团下辖上海原能细胞生物低温设备有限公司、上海原能细胞医学技术有限公司、上海原能细胞库有限公司,围绕细胞生物产业构筑细胞生物低温设备、细胞医学技术与新药研发、细胞库等领域产业生态发展圈。原能细胞科技集团与海内外顶尖专家、中国一流研究型医院(复旦大学附属中山医院、上海交通大学附属仁济医院、上海市第一人民医院、海军军医大学附属长征医院等)、著名研究机构(中科院上海免疫所等)、生命科学院、著名生物研发药企等开展了多层面,多方式的合作,建有多个联合实验室和细胞治疗临床中心,开辟了细胞生物产业化发展新局面。 上海原能细胞生物低温设备有限公司是国家高新技术企业并获得ISO90001认证。公司致力于生物医学设备及系统国际前沿领域发展,集研发、设计、生产制造为一体,自主研发的全流程深低温、自动化、信息化、智能存储设备,实现超低温(-80度)、深低温(-196度)等温区全覆盖,实现生物样本与“活细胞”程序降温、冷链运输、存储、入库/出库等全流程自动化、智能化、信息化,广泛应用于分子临床转化医学中心、研究型医院样本中心、生物医药研发企业/CRO/CDMO、生命科学研究机构、大学生命科学院、医学院等。公司BSN系列设备(液氮自动化存储设备)获得CE 认证,BSN200项目获批2020年首批上海市高新技术成果转化项目。公司已申请PCT国际及国外专利、中国专利200+项,获得授权120+项、软件著作权多项。 公司与国际深低温生物顶尖专家等合作,建设业内唯一的低温生物冷冻技术平台,为低温设备研发、冻存技术研发等提供前沿核心技术保障。依托公司自动化、智能化、信息化、临床级低温存储设备及解决方案,原能细胞科技集团在张江细胞产业园打造了全国首家、国际领先的千万级临床“活细胞库”,掀开了细胞存储产业化新篇章。
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  • 专业设计、生产,石油仪器、超临界萃取装置、石油科研仪器、超临界萃取设备、超临界CO2流体、超临界水氧化装置、超临界相平衡反应装置、超临界染色装置、超临界细微粒子制备、岩心夹持器、恒速恒压泵、岩心钻取机、岩心渗透率测定、岩心孔隙度测定、采样器、二维平面模型、三维模型、SAGD驱油装置、SAGD模型、边底水模型、智能井模拟装置、岩心流动实验仪、岩心驱替装置、岩心驱油装置、微观驱油装置、CO2泡沫驱油装置、N2泡沫驱油装置、微生物驱油装置、化学驱油装置、油水计量装置、高温油水相对渗透率装置、岩石声波测定装置、岩石电阻率测定装置、岩心洗油仪、岩心剖切机、切片机、磨片机、岩心破碎机、高压中间容器、活塞容器、导流能力测试仪、酸岩反应旋转岩盘仪、酸蚀岩板导流能力测试仪、过过滤因子测定仪、岩石碳酸盐含量测定仪、油水饱和度测定仪、高温高压配样器、深井取样器、实验室仪器、脱水器、填砂模型管、等实验室仪器设备的高新技术企业。
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流动细胞测定仪相关的仪器

  • (一)功能应用及设备优点 利用培养基循环流动,模拟血流剪切应力环境,结合3D 培养构建细胞模型,更贴近人体的体内环境。通过将流动引入体外环境,显着提高了您研究的生理相关性,使您能够生成更准确的模型,从而大大提高对结果有效性的信心。 →不断补充介质→培养基的再循环允许细胞自我调节→防止3D培养中的坏死→模块化、灵活的系统→标准孔尺寸→更多的生理相关性→瓶子可以更轻松地更换培养基,而不会对培养物造成冲击→密封系统设计确保操作无菌→可高压灭菌→重复使用 提高细胞活力 严密控制多个变量 灵活且易于使用 节省时间和成本 长期培养Quasi Vivo 系统有不同的腔室可供选择,每个腔室的设计都是为了满足特定应用的需求。QV1200由三个具有气-液和液-液界面的生物相容室组成。与标准刀片兼容,高度模块化,提高了使用灵活性。QV900在标准多孔板占地面积上由 6 个室组成,由几乎没有非特异性结合的材料制成。 (二)产品应用案例及发表文献 在本文研究中,作者采用Quasi Vivo流动细胞培养系统进行了表征和优化,多个腔室可以连接在同一个系统中,创造了在同一系统中包含在不同区域培养的多个细胞系的可能性。建立一种研究光活化脂质体的新型细胞培养工具。 2)Spencer, C.E. Rumbelow, S. Mellor, S. Duckett, C.J. Clench, M.R. Adaptation of the Kirkstall QV600 LLI Microfluidics System for the Study of Gastrointestinal Absorption by Mass Spectrometry Imaging and LC-MS/MS. Pharmaceutics 2022, 14, 364. 本文作者用pH调节的阿托伐他汀溶液流过胃肠道组织的顶端层,用营养液流过组织的基底层以维持组织活力。组织样本被快速冷冻、冷冻切片,并使用MALDI质谱成像(MSI)成像。对辅料对吸收的影响进行了概念验证研究。在Quasi Vivo流动细胞培养系统中加入不同浓度的溶解剂。测定受体回路中阿托伐他汀的量,以研究赋形剂对渗透到组织中的药物量的影响。 3)Kupper, N. Pritz, E. Siwetz, M. Guettler, J. Huppertz, B. Placental Villous Explant Culture 2.0: Flow Culture Allows Studies Closer to the In Vivo Situation. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 7464. 胎盘作为胎儿的一个器官,在妊娠期间暂时存在,并作为胎儿的肺、肝、肾和肠道。 在本文里,作者认为绒毛外植体的体外培养应该以最具功能和最自然的方式进行,以获得代表子宫内环境的稳健结果。因此,本研究旨在建立正常胎盘氧条件下胎盘绒毛外植体的流动培养系统,采用Quasi Vivo流动细胞培养系统模拟从母亲到胎盘的血流,并回到迄今为止最原生的体外系统。 (三)产品用户概况全球使用Kirkstall Quasi Vivo器官芯片微生理系统的学术及研究机构已超过100+个,遍布美国、英国、法国、瑞典、奥地利、意大利、荷兰、瑞士、日本等。目前Quasi Vivo流动细胞培养系统被成功用于下列细胞培养: (四)品牌制造商简介Kirkstall Ltd.成立于 2006 年,是 Braveheart Investment Group plc 的子公司,总部位于英国约克。Kirkstall开发了一种创新的微生理系统的器官芯片模型Quasi Vivo。作为器官芯片技术的领导者,Kirkstall已经建立了牛津大学生物医学工程研究所等著名的大学实验室的庞大用户群,产品在全球范围内享有盛誉。 北京基尔比生物科技有限公司是Kirkstall ltd.授权在中国的唯一和独家总代理商,全面负责Kirkstall公司旗下所有产品在中国的销售,市场推广和技术支持等事宜。
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  • ABS溶体流动速率测定仪的基本要素是符合国际标准中指定的对精度要求和测试方法。标准包括在ISO 1133, GB/T3682,JIS K7210, ASTM D1238中普遍的方法和ASTM D3364的PVC试验,加上在特定标准中的规定。 ABS溶体流动速率测定仪为快速精确而测量特别设计,具有结构坚固、操作简便、性能稳定可靠等特点;使用了高精度的PID恒温技术,温控精度高;关键零件氮化处理,强度硬度高,热膨胀变形小。HT-3682M-BA;HT-3682MV-BA为常规型号,人工加载砝码带自动切割功能; HT-3682M-EL;HT-3682MV-EL为电动加载砝码带自动切割的机型,是指预先将砝码放置在砝码托架上,实现电动加载和卸载,减少人工操作; HT-3682MV-AU为全自动型号,带自动加载砝码与自动切割功能,按设定的模式要求自动加载和卸载相应的砝码,进一步提升测量效率。ABS溶体流动速率测定仪的用途:用于测定各种塑料、树脂聚合物在粘流状态时熔体质量率流动速率MFR值或者熔体体积率流动速率MVR值,它既适用于熔融温度较高的聚碳酸酯、聚芳砜、氟塑料、尼龙等工程塑料,也适用于聚乙烯(PE)、聚苯乙烯(PS)、聚丙烯(PP)、ABS树脂、聚甲醛(POM)、聚碳酸酯(PC)树脂等熔融温度较低的塑料测试。 ABS溶体流动速率测定仪应用行业:塑料行业;橡胶行业;计量质检;高等院校;科研实验所;商检仲裁、技术监督部门;石油化工;电工电器;复合材料;其它行业。HT-3682VM-AU主要特点说明:l 本型号为全自动型号,通过步进电机带动滚珠丝杆转动以达到自动控制顶部加载砝码上升或下降的目的;l 多段(3段)控温方式,3组铂电阻传感器,3个加热套单独控温,高精度智能PID调控,升温斜率即升温速度可调;l 内置温度稳定提示警报,并增加GB/T3682规定的240秒材料预热秒计时,计时结束后,发出提示音,亦可设置美标ASTM D1238等预热时间;l 内置多款塑胶材料熔融指数测试条件,方便客户随时调取使用,减少繁琐的工作量,并储存一次测试条件和结果;l 采用灵敏7寸触摸屏控制器,可以存储并列印最近测试条件及数据,测试打印菜单的设定包括测试时间(系统默认)、操作人员、材料名称、测试方法、测试条件(温度、砝码重量、切料时间间隔)、测试结果数据、测试结果人为判定OK或NG等;l 预留RS232界面或USB界面连接计算机,可通过计算机控制仪器操作及将测试数据传输保存至计算机; l 支持所有国际试验标准和方法,包括ISO 1133,ASTM D1238,GB/T3682等国别标准或者国际标准组织标准。主要技术参数:l 挤压出料部分出料口直径:Φ2.095±0.005毫米,出料口长度:8.000±0.025毫米(可选购:Φ1.050±0.005毫米,出料口长度:4.000±0.025毫米)装料筒直径:Φ9.550±0.007毫米,装料筒长度:152± 0.100毫米活塞杆头直径:9.475±0.007毫米,活塞杆头长度:6.350±0.100毫米l 标准试验负荷:共8级全套砝码l 温度范围:常规室温——400℃(500℃可选)l 恒温精度:±0.5℃ l 显示分辨率:0.1℃l 切料方式:可选手动或自动切料l 温度恢复时间:小于4分钟l 打印:微型打印机自动打印输出l 电源电压:AC220V / 50HZ 或AC110 /600HZ 依使用国别选择不同的电源电压 l 砝码1套,计8件0.325㎏(1#在1级负荷内) 、 1.2㎏、2.16㎏、3.8㎏、5.KG、10.0㎏、12.5㎏、21.6㎏l 砝码托盘1件(在1级负荷内)l 装料斗1件 l 口模清理棒1件l 装料杆1件l 料筒清理杆1件(组合件)l 活塞杆1件(在1级负荷内)l 口模1件 l 纱布2卷 l 打印纸2卷l 电源线1条l 说明书1份l 合格证1份宏拓仪器是一家具有实力的物性检测仪器供应商,公司集研发、生产、销售和服务为一体,专业提供优质、高性能的材料试验仪器解决方案;宏拓仪器产品做工精细,精确度高,品质优良;籍以高品质性能,宏拓积极拓展国内外业务,历经数年发展,在国外,透过宏拓国际(香港)有限公司,产品远销美国、英国、缅甸、西班牙、韩国、澳洲、新西兰、土尔其、马来西亚,印度尼西亚、印度、新加坡、俄罗斯… .等国家与地区。主营产品有:拉力试验机、熔体流动速率仪(熔融指数仪)、悬臂梁冲击试验机、简支梁冲击试验机、密度计、浓度计等类型工程塑料类检测仪器。
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  • XNR-400系类熔体流动速率测定仪产品介绍:(共五款)一、产品简介:XNR-400系类机型是根据GB/T 3682的试验方法,用于测定热塑性高聚物在高温下的流动性,如聚乙烯、聚丙烯、聚甲醛、ABS树脂、聚碳酸酯、尼龙氟塑料等高聚物。是目前国内同行业中高档机型,操作简单、运行稳定、可长时间进行试验,深受用户好评。XNR-400A机型采用新一代人工智能仪表控温及双位时间继电器输出控制,仪器恒温周期短、超调量极小,温度控制部分采用成型温控单元表而使控温精度和产品稳定性等都能够得到有效保障。为了便于用户使用,此种型号仪器可时控、手动两种 切料方法融为一体(切料间隔和切料的时间可任意设定)。该机型为台湾机型,产品智能化、自动化程度极高,适用范围广、升温速度快、产品精度高、性能稳定可靠,是塑料原料和塑料产品生产企业以及质检监督检验院所和大专院校理想的试验和教学仪器。XNR-400B型熔体流动速率测定仪采用工业PLC可编程控制器,液晶操作平台,温度部分采用单独的温度单元,LED数码显示。该机自动控温从操作方法上分为手动、时控、自动三种切料方式,能够实现质量法(MFR)和体积法(MVR)两种试验方法;该机能够测得原料在试验温度下的熔融密度,系统同时具有温度校准功能。XNR-400C型熔体流动速率测定仪采用工业PLC可编程控制器,液晶操作平台,温度控制采用单独的温度控制单元LED数码显示。该机采用主机控制和计算机显示操作相结合双重控制,自动控温从操作方法上分为手动、时控、自动三种切料方式,能够实现质量法(MFR)和体积法(MVR)两种试验方法;该机能够测得原料在试验温度下的熔融密度,系统同时具有温度校准功能,系统可执行试验数据的存储和打印功能。XNR-400G型熔体流动速率测定仪采用微电脑电路控制,汉字液晶显示,微型打印机打印试验报告。该机自动控温从操作方法上分为手动、自动二种切料方式,能够实现质量法(MFR)熔体流动速率的测定试验。该机为台湾技术,外形稳重大气,控温精度高、操作方便并配有微型打印机可打印试验报告,是目前国内同行业中高端机型。XNR-400W系列熔体流动速率测定仪采用工业PLC可编程控制器,触摸屏操作平台,汉字液晶显示;该机自动控温从操作方法上分为手动、时控、自动三种切料方式,能够实现质量法(MFR)和体积法(MVR)两种试验方法;该机能够测得原料在试验温度下的熔融密度,系统同时具有温度校准功能。二、主要参数:项目/编号XNR-400AXNR-400GXNR-400BXNR-400WXNR-400C测量范围0.1-400.00g/10min(MFR)0.1-800g/10min(MFR);0.1-800cm3/10min(MVR)温度范围室温-450℃控制精度±0.2℃计时精度1S或0.01S1S0.1S位移精度-0.01mm负荷全负荷切料方式手动、时控手动、自动手动、时控、自动料筒内径9.550mm±0.007mm料筒长度160mm口模材质为碳化钨、长:8.000mm±0.025mm 内径:2.095mm±0.005mm功率0.45KW电源AC220V 、50Hz仪器尺寸(mm)400×500×600480×280×580400×500×600350×500×650打印功能无有无有有控制方式数字液晶显示触摸屏主机或计算机仪器重量(kg)6070
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流动细胞测定仪相关的资讯

  • 喜报!连华科技53套水质测定仪中标新疆水生态环境执法装备项目
    连华科技清澜系列便携式水质测定仪成功中标新疆维吾尔自治区水生态环境执法装备能力建设项目(二期)。此次中标涉及53套装备,将提供给8个地州中的44个县环境执法部门,以进一步提升当地水生态环境的监测与执法能力。此次中标不仅是对连华科技产品实力的肯定,也是对其在环保领域持续创新和发展的认可。连华科技将全力以赴完成此次中标项目的装备供应和后续服务工作,确保装备能够及时、准确地投放到各个环境执法部门,为当地水生态环境的保护和改善提供有力支持。其中,连华科技清澜系列便携式水质测定仪可以广泛应用于各种污水检测环境,可精准测定包括COD、氨氮、总磷、总氮、浊度、色度、悬浮物、总氯、氰化物、重金属、阴离子表面活性剂等水质指标。除此之外,新疆维吾尔自治区水生态环境执法装备能力建设项目(二期)预算金额总计523.14万元。其中便携式水质快速检测仪53台为银川连华科技发展有限公司成功中标,用于各种生活及工业污水的COD、氨氮、总磷、总氮、浊度的检测;流量计(明渠流量计)53台,流量计(明渠流量计)53台为海阳市启恒环保科技有限公司成功中标,用于环境执法人员对污水处理、排放企业在线监测系统中的流量监测单元(在线流量计)进行比对以及校准核对,不需要停产,也可适应于九种基本堰型:三角堰、矩形堰、等宽堰、矩形宽顶堰、圆宽顶堰、三角形剖面堰、平坦 V 型堰、巴歇尔槽、无喉道槽选取;同时将环境条件(温度、气压)、地理位置(经纬度)纳入比对数据系统,使测量比对结果更具有代表性;便携式水质采样设备48台为北京市格雷斯普科技开发公司成功中标,用于实现自动采样、冷藏(冷冻)、远程控制、密码锁、视频监控等功能;水质快检试剂包100台为山东格林凯瑞精密仪器有限公司成功中标,用于检测水质中各种含量,能够快速、简便,检测结果容易判断,易于携带,便于现场测试,流动服务。以上中标公司均为中小企业。
  • 【来因科技】光合仪|光合作用测定仪高灵敏触摸屏
    植物是生物的食物源头。无论是动物还是人,其食物归根结底都直接或间接地来源于植物。因此,植物的重要性不言而喻。而植物主要是通过光合作用来将光能转化为化学能,从而在体中储存有机物的。这些有机物不仅能为植物自身的机体生命活动提供能量,还是人和动物生命活动的主要能量来源,作用匪浅。光合作用除了为生物提供食物和能量外,还能维持呼吸作用的氧气及防御紫外线杀伤作用的臭氧层,是生物圈形成、发展和繁荣及持续运转的基础、关键环节和驱动力。正因如此,植物光合作用的速率如何就显得尤为重要了。 光合作用测定仪产品详情介绍→https://www.instrument.com.cn/show/C460790.html增强植物的光合速率可以增加过氧化物酶及硝酸还原酶的活动,加快植物对二氧化碳的吸收,调节植物的碳氮比,大大的加强了植株的免疫能力,让植物可以呈现出良好的生长态势。不仅如此,光合作用还能固定空气中的二氧化碳,减缓温室效应,并与生物质能源、秸秆还田、碳基肥等建立密切的关系,帮助农业生产的同时保护了环境。但是植物的光合作用比较难掌控,所以说,能否测定植物光合作用对于农业生产种植的活动具有重要的指导意义。这时,光合作用测定仪的出现就彰显出了我们农业科研水平了。 光合作用测定仪产品优势:  产品特点:  1、智能化:采用Android操作系统,高灵敏触摸屏。高效的人机交互,测定过程实时显示,更好的操作体验;  2、高稳定性:双波长红外二氧化碳分析器,加入温度调节及大气压力测量单元,有效的提高了二氧化碳的稳定性及准确性。有效地避免了因为温度变化而造成二氧化碳数值过大波动的弊端;  3、多功能:同时测定光合速率、蒸腾速率、胞间二氧化碳浓度、气孔导度和水分利用效率,以及二氧化碳浓度、相对湿度、光合有效辐射和空气温度、叶片温度、大气压力等指标;  4、自定义:用户可根据测量需要自定义编辑实验备注,并可显示Pn曲线、Tr曲线、光-光合曲线以及湿度-蒸腾曲线;  5、数据分析:试验完毕后可将多组数据同时分析,生成放不同颜色的曲线图,方便进行实验数据对比;  6、大屏幕:10寸高灵敏触摸屏,人性化操作界面,为用户提供更好的数据显示。  7、数据导出:支持wifi、蓝牙传输,数据可无线上传;同时支持U盘拷贝数据,免驱动插拔。  8、配置云平台:检测结果可选择性或批量无线传至平台,方便用户进行长期数据管理和可视化分析。辅助科研。  9、长续航:满电状态下可在野外连续使用10-12个小时。  10、便捷性:体积小,重量轻,配手提箱随身携带,方便单人流动测试。  11、配置支架:方便长时间无人值守检测,主机支架高度可调,检测手柄三脚架高度角度均可调。光合作用测定仪是通过测量植物叶片既定时间内CO2吸收或释放量,并同时测量空气温湿度,叶片温度,光照强度以及同化CO2的叶片面积等要素,来直接计算出植物的光合速率、蒸腾速率、细胞间CO2浓度和气孔导度等光合作用指标。该仪器具有反应迅速,抗干扰性强,操作方便,结果精度高,可以进行连续的测定等突出优点,因而得以应用于植物生理学、植物生物化学、生态环境等多个领域,为农林业的进步发展贡献了力量。
  • BLT小课堂|水母发光蛋白检测法在细胞钙离子含量测定中的应用
    Ca2+作为普遍的第二信使在细胞信号转导过程中起着非常重要的作用,是单个细胞生存和死亡的信号。它参与了神经传导、血液凝固、肌肉收缩、心脏收缩、大脑功能、酶功能以及内分泌腺的激素分泌等各种生理机能。而人们对Ca2+在信号转导中作用的认识,则很大程度上取决于Ca2+测定技术。目前常用的Ca2+检测方法主要有:Ca2+选择性微电极测定法、同位素示踪法、核磁共振法和水母发光蛋白检测法等。01Ca2+选择性微电极测定法:Ca2+选择性微电极一种电化学敏感器。利用内充液和组织或细胞之间产生电位差,理想情况下,该电位差是Ca2+对数的线性函数,遵循Nernst方程。优点:直接、敏感地测定组织或细胞内的Ca2+,不需使用指示剂,不影响结合钙和游离钙的平衡。缺点:反应速度慢而无法测定Ca2+的快速变化,而且穿刺损伤细胞可引起渗漏,且不适用于太小的细胞。02同位素示踪法:用放射性核素45Ca2+对Ca2+进行示踪,可测量出通过细胞膜转运到细胞内Ca2+增加的速度及浓度的大小,揭示Ca2+泵的作用,目前主要用于测定跨膜Ca2+的流动。优点:测量方法简单易行,比普通化学分析法的灵敏度高。确定放射性示踪剂在组织器官内的定量分布,可以达到细胞、亚细胞乃至分子水平。缺点:静态效果差,需要特定的同位素测定仪,并且要注意示踪剂的同位素效应和放射效应问题。03核磁共振法:是一种新的、非光学技术的Ca2+检测方法。由于正常生物体内氟含量很少,为了得到足够的响应,在检测时需要使用含氟指示剂。该指示剂经过化学修饰后进入细胞,进而被水解成游离状态,然后与Ca2+结合,根据获得的波谱图计算出Ca2+的浓度。优点:具有非破坏性和无损伤性,能够在接近生物样本生理状态下连续动态地进行检测,准确反应Ca2+浓度。缺点:需要核磁共振仪,成本较高。04荧光探针法:目前常用的Ca2+荧光探针有Fluo-3、Fluo-4、Fluo-8等。这类探针本身无法进入细胞,但它的亲脂性衍生物却可以透过细胞膜进入细胞。一旦进入细胞,这类亲脂性衍生物的亲脂性封闭基团在细胞非特异性酯酶的作用下被分裂除去,在细胞内便会形成一种带负电荷的荧光染料。与胞内Ca2+结合时,其荧光强度显著增加。优点:指示剂易导入细胞,空间分辨率高,反应速度快,而且可同时检测多重离子。缺点:需要有荧光显微镜或激光共聚焦显微镜,成本较高。05水母发光蛋白检测法:最近十几年来,水母发光蛋白(Aequorin)很受人们的关注。水母发光蛋白由189个氨基酸组成,具有3个Ca2+结合的EFhand结构,所以水母发光蛋白可作为检测Ca2+的新型探针。优点:Ca2+/水母蛋白复合物能检测~0.1μm到>100μm范围内的钙离子浓度,且复合物不会从细胞内泄露出来,可检测几小时至数十天内Ca2+浓度的变化。比荧光探针法的背景低,样本本身不会发生自荧光。腔肠素的性质腔肠素(Coelenterazine)作为海洋动物体内贮存光能的分子,它广泛存在于海洋生物体内,比如海肾、海蜇、水螅等。腔肠素是天然荧光素中最普遍的,它可作为很多荧光素酶的底物。目前研究得最透彻的以腔肠素为底物的荧光素酶来源于海肾(Renilla),即海肾荧光素酶(Renilla reniformis,简称Rluc)。腔肠素的工作原理腔肠荧光素是一个分子量约400 Da 的疏水基团,它可以自由穿越细胞膜。在一个以荧光素/荧光素酶为基础的系统中,腔肠素作为以水母发光蛋白为代表的海洋发光蛋白的辅助因子,与水母发光蛋白进行稳定的结合,引起脱辅基水母发光蛋白和腔肠荧光素之间的共价键破裂,腔肠荧光素(Coelenterazine)被氧化脱羧,形成腔肠酰胺(Coelenteramide),释放出CO2,同时发出波长为469nm的蓝色生物荧光,该荧光可用博鹭腾高灵敏度管式/板式发光检测仪进行测定。图1.腔肠素/水母发光蛋白检测Ca2+机制水母发光蛋白一旦和Ca2+反应即丧失发光功能,因此当一部分水母发光蛋白与Ca2+反应时,被消耗水母发光蛋白的发光强度能反映出Ca2+浓度变化,而且被消耗的水母发光蛋白的发光强度与Ca2+浓度之间存在线形关系。如同萤火虫荧光素酶,海肾荧光素酶的活性也不需要翻译后修饰,一旦翻译完成即可行使遗传报告基因的功能。但是与萤火虫荧光素酶又有差异,即腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更利于生物荧光的研究。技术小结由于Ca2+在生命活动的各种生理生化反应、疾病的发生和发展中都扮演着极其重要的角色,而游离的Ca2+浓度变化又与细胞的功能、信号转导乃至细胞的凋亡有密不可分的联系,因此,研究如何检测细胞内游离Ca2+浓度显得尤为重要。Ca2+选择性微电极测定法不需要使用指示剂,但是穿刺过程会损伤细胞,进而引起渗漏。同位素示踪法简单,但是静态效果差,还需要注意同位素效应和放射效应问题。核磁共振法和荧光探针法都需要特定的仪器,成本较高。水母发光蛋白检测法不需要激发光源,因而消除了细胞自发荧光的干扰,背景荧光远低于使用钙离子指示剂的荧光。另外腔肠素具有疏水性,易于通过细胞膜,适于全细胞的研究。 腔肠素/水母发光蛋白的生物荧光反应对Ca2+浓度的变化非常敏感,但是这种发光相对较弱,因此需要使用高灵敏度的发光检测仪进行检测。

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  • 【原创大赛】从流式细胞仪的结构浅析维修

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