膜蛋白

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膜蛋白相关的资讯

  • 红外多光子解离用于Top-Down表征膜蛋白复合物和G蛋白偶联受体
    大家好,本周为大家分享一篇来自Angewandte Chemie - International Edition的文章:Infrared Multiphoton Dissociation Enables Top-Down Characterization of Membrane Protein Complexes and G ProteinCoupled Receptors[1],文章的通讯作者是牛津大学化学系的Carol V. Robinson教授。  非变性质谱(Native MS)是结构生物学中一个成熟的工具。在电喷雾电离过程中使用非变性缓冲液可以保存多组分蛋白质复合物之间的非共价相互作用,以及它们的配体、辅因子或其他结合蛋白。它可以用于探究蛋白质复合物的相互作用和功能,因为结合事件导致质量变化,可以在质谱仪中跟踪和剖析。然而,由于膜蛋白的疏水性,使得它们在传统的非变性质谱缓冲液中不溶且容易聚集,因此在非变性质谱中呈现出独特的挑战。目前采用的方法是将蛋白质复合物溶解到膜类似物中,例如:去垢剂、纳米脂质盘、两性聚合物等,再将这些膜类似物通过碰撞激活去除。其中去垢剂是应用的最广泛的一种。然而由于碰撞激活的能量在应用中受到限制,该方法并不能在质量分析前很好地去除去垢剂。此外,在非变性质谱条件下,键的断裂也受到非共价相互作用强度的影响(例如蛋白质-蛋白质、蛋白质-去垢剂剂以及去垢剂胶束内的相互作用)。  基于光子的方法,如紫外光解离(UVPD)和红外多光子解离(IRMPD)已被证明有利于可溶性蛋白质及其复合物的Top-Down质谱分析。与此同时,基于光子的膜蛋白Top-Down模式的应用正在兴起。原理上,激光束路径中的离子被连续地驱动到振动激发态。因此,在基于光子的方法中,能量储蓄通常与前体离子的电荷状态和分子量无关。然而,电荷状态和分子量仍然会影响肽键解离需要的输入能量。先前报道的通过UVPD对79 kDa的五聚体的大电导机械敏感通道(MscL)Top-Down的断裂得到了令人印象深刻的54%的序列覆盖。然而,对于氨通道(AmtB)一个127 kDa的同源三聚体,通过碰撞激活和UVPD两种不同的方式破碎,仅实现了20%的序列覆盖率。事实上,相对较低的序列覆盖率是由于大分子量以及三聚体中增加的非共价相互作用影响的结果。尽管这些工具能够在非变性状态下实现Top-Down质谱分析,但其在膜蛋白表征中的应用仍不广泛。这就要求建立一种能使低电荷密度的高分子量蛋白质稳定地产生蛋白质序列离子的方法,而膜蛋白嵌入异质膜或膜类似物则使这一问题更加复杂。虽然IRMPD之前被用于从去垢剂中释放膜蛋白,但使用IRMPD对非变性的膜蛋白进行测序的研究相对较少。  图1. (A)改进的Orbitrap Eclipse Tribrid的原理图,其中包括一个红外激光器直接进入四极线性离子阱(QLIT)的高压细胞。离子化的蛋白质胶束被转移到高压QLIT中,在那里整个离子群受到红外光子的照射,然后被转移到Orbitrap进行质量分析。通过调节激光输出功率(W)和照射时间(ms),可以使膜蛋白从去垢剂胶束中完全解放出来。(B)三聚氨通道(AmtB)在3.0 W输出功率和200ms辐照时间下的非变性质谱。(C)在3.3 W输出功率和200ms辐照时间下AmtB的非变性质谱。  因此,作者利用改进的Orbitrap Eclipse Tribrid质谱仪,与连续波远红外(IR) CO2激光器连接,使光束聚焦到双四极杆线性离子阱(QLIT)的高压池中(图1A)。红外激活可以有效地去除蛋白质复合物中的去垢剂胶束,随后通过IRMPD使得膜蛋白碎片化。在这种安排下,由纳米电喷雾电离产生的蛋白质复合物被转移到高压池中。在转移到Orbitrap进行检测或m/z分离和随后的碎片化之前,整个离子群将受到943cm-1红外光子的照射。利用红外的方法去除去垢剂胶束,红外激光有两个可调控参数:激光输出功率(高达60瓦)和照射时间(毫秒到秒)。因此,可以更好地控制从蛋白质胶束中释放膜蛋白,确保非变性复合物的保存,同时完全去除包裹复合物中的去垢剂。通过对激光输出功率和照射时间的优化,作者发现红外激活的参数是高度可调的,不同的激光功率和照射时间的组合也可以产生分辨率相当的谱图。其中例如在3.3 W下照射200 ms时,可以得到多个电荷态的三聚体峰(~6500 m/z),也可以观察到三聚体与脂质结合的峰,而且对于图谱中的单体也能观察到与脂质结合的峰(图1C)。作者还对不同的去垢剂产生分辨率较高的图谱所需要红外参数进行了评估,从而评价了这几种去垢剂得到高分辨率图谱的难易程度(图2)。  图2. 红外辐射去除膜蛋白离子中的去垢剂是高度可调的。增加激光输出功率对三种常用的MS兼容去垢剂(C8E4,G1和DDM) AmtB三聚体峰外观的影响。辐照时间固定为200 ms,激光输出功率分别为2.1、2.4、3.0和3.6 W。去垢剂在真空中按易去除的顺序显示,这是由完全释放膜蛋白复合物所需的激光输出功率决定的,从而在m/z光谱中产生良好分辨的电荷状态峰。为了探究IRMPD分离蛋白质和去垢剂胶束的机制,作者对三种不同的去垢剂:四聚乙二醇单辛醚(C8E4)、树突状低聚甘油(G1)和十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)的溶液相和气相红外光谱进行了表征,并利用密度泛函理论(DFT)计算得到了C8E4头部基团的红外谐波光谱,用来验证所得到的红外吸收光谱会受到振动耦合的影响,对于质子化的去垢剂离子,氢键和富氧去垢剂内的质子共享可以改变观察到的振动频率。结果表明C8E4胶束的溶液相吸收光谱包含一个与预期激光波数943cm-1重叠的显著带,这就解释了为何较低的激光能量可以将去垢剂胶束和蛋白质复合物分离。而在谐波光谱中在预期的激光波数处的确产生了峰,并推测该峰来自于O-H伸缩、C-C伸缩,C-H弯曲和C-O伸缩振动的耦合。而G1和DDM的最大吸收则偏离了943cm-1的预期波数,作者认为这是不同去垢剂氢键作用的结果。而蛋白质在真空中的红外吸收能力较弱,由此推测在IRMPD的过程中,去垢剂是主要的吸收对象。所以仅需要较低的能量就可以使蛋白质从复合物中剥离而不至于破坏蛋白质的非共价作用。完整的蛋白质离子还支持串联质谱的实验,为了得到蛋白质的序列信息,作者分离了m/z在6674处(电荷态为+19)的AmtB三聚体蛋白,并将其置于高激光输出功率(9 W)下照射5 ms,在m/z 1750~4000之间产生密集的多电荷态离子片段,并得到了26%的序列覆盖,这优于之前基于碰撞激活的方法(  图3. 三聚体AmtB的IRMPD。(A)在m/z 6674处分离19+电荷态离子阱后,IRMPD后观察到的碎片离子MS2谱。多重带电碎片被高亮显示 来自相同地点的重复片段用虚线分组。为了清楚起见,许多指定的离子没有注释 (B)片段丰度相对于裂解原点(残基数)的条形图,其中丰度表示来自每个位点的片段归化一强度之和。条形图的颜色强度表示每个片段的加权平均电荷。将AmtB的拓扑域叠加在条形图上 α-螺旋跨膜区域用黄色方框表示,编号为1到11。跨膜区由质周环和细胞质环连接,用灰色线表示。(C)主干裂解位点覆盖在AmtB (PDB: 1U7G)的结构上。蓝色和红色阴影区域分别代表b型和y型离子。颜色强度对应于所分配片段的丰度。从气相分子动力学模拟中得到的高温(500 K)下的跨膜螺旋快照用虚线圈标出。为了验证这一个推测,作者又对另外两种GPCR蛋白:β -1-肾上腺素能受体(β1AR)和腺苷A2A受体(A2AR)用IRMPD进行了MS2图谱的测定,结果也观察到了片段离子相似的二级结构定位,在跨膜结构区域有着高丰度的片段,但是在二硫键相连的螺旋中并没有观察到丰富的离子片段。并再次利用分子动力学模拟研究了两种GPCR的结构对断裂的影响。在500 K下的最终结构中显示,两种GPCR中都保留了α-螺旋特征,并与观察到的裂解位点密切相关。此外,还对这两种蛋白进行了HCD和IRMPD的比较分析。对于β1AR, IRMPD产生的片段离子平均分子量为8866 Da,高于HCD产生的5843 Da。IRMPD产生的片段离子也保留了更高的平均电荷(4.7 + vs 3.6+ z)。最终,IRMPD的碎片化导致β1AR的序列覆盖率更高,为28%,而HCD为17%。在A2AR中也观察到类似的趋势,IRMPD的覆盖率为19%,而HCD为9%。  总的来说,作者证明了可以在改进的Orbitrap Eclipse质谱仪的高压QLIT下,通过红外照射可以完全释放一系列去垢剂胶束中的膜蛋白。然后,通过增加激光输出功率,获得直接从膜蛋白及其复合物中释放的序列信息片段离子,证明红外光去除去垢剂是通用的和高度可控的,为保存和鉴定膜蛋白和配体之间脆弱的非共价相互作用构建了一个可靠的方法。而且还对片段离子的产生机制做了阐述,即质子可以通过沿蛋白质骨架迁移来稳定和诱导连续的肽键裂解。  撰稿:李孟效  编辑:李惠琳  文章引用:Infrared Multiphoton Dissociation Enables Top-Down Characterization of Membrane Protein Complexes and G ProteinCoupled Receptors  参考文献  Lutomski, C.A., El-Baba, T.J., Hinkle, J.D., et al. Infrared multiphoton dissociation enables top-down characterization of membrane protein complexes and g protein-coupled receptors[J]. Angewandte Chemie-International Edition,2023.
  • iCMR 2017特邀报告:固体核磁共振技术在膜蛋白研究中的应用
    p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 第一届磁共振网络会议(iCMR 2017)特邀报告 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 固体核磁共振技术在膜蛋白研究中的应用 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" & nbsp img title=" 王申林.jpg" style=" HEIGHT: 299px WIDTH: 400px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/2ad81df9-84b8-4bfe-a8bb-1ace21c12d35.jpg" width=" 400" height=" 299" / /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 王申林 研究员 /strong /p p style=" TEXT-ALIGN: center" strong 北京大学化学与分子工程学院 /strong /p p strong   报告摘要: /strong /p p   生物固体核磁共振技术是膜蛋白研究的新兴技术手段,其优势是可以在模拟生物膜的环境中研究膜蛋白的结构和动态学性质。在本次报告中,我们将介绍生物固体核磁共振技术的基本研究方法和分析策略,包括稳定同位素标记、核磁信号指认相关实验、顺磁NMR、结构解析方法等。我将结合经典案例,介绍固体核磁共振在七次跨膜蛋白、离子通道蛋白、调控蛋白等大分子量膜蛋白上的应用。 /p p strong   报告人简介: /strong /p p   王申林,理学博士,北京大学化学与分子工程学院、北京核磁共振中心研究员,博士生导师。2002年南开大学化学学院学士,2008年意大利佛罗伦萨大学博士,2009-2012加拿大Guelph大学博士后研究,2013年开始在北京大学担任教职。2008年入选海外优秀留学生奖学金,2010年得到加拿大健康研究院(CIHR)博士后资助,2015年入选第十一批“青年千人”计划。王申林研究员主要从事生物固体核磁共振研究,针对大分子量膜蛋白和RNA发展相应的固体核磁方法,包括核磁脉冲序列的设计,生物大分子稳定同位素标记的发展,顺磁NMR的应用, 蛋白质结构的固体核磁共振解析等。首次实现了快速魔教旋转条件下,基于1H固体NMR技术的RNA内氢键分析;首次实现了酵母表达体系的选择性13C同位素标记技术;完成了固体核磁共振解析的七次跨膜蛋白结构。相关工作发表在Nat. Methods, Chem Comm, Sci Rep, JACS,JBNMR等学术期刊。 /p p   strong  报名链接: a title=" " href=" http://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/iCMR2017/" target=" _self" http://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/iCMR2017/ /a /strong /p p & nbsp /p
  • 冷冻电镜揭示了细菌和人类膜蛋白之间惊人的相似之处
    简单生物体的细胞,如细菌,以及人类细胞,都被一层膜包围着,它可以完成各种任务,包括保护细胞免受压力。在一个联合项目中,来自美因茨约翰内斯古腾堡大学 (JGU)、德国于利希研究中心(Forschungszentrum Jülich) 和海因里希海涅大学杜塞尔多夫 (HHU) 的研究人员在细菌中发现的一种膜蛋白与一组负责重塑和重建人体细胞膜。根据研究人员的说法,这两个蛋白质组之间没有联系之前是已知的。然而,此次研究过程中,通过冷冻电子显微镜,发现细菌和人类的膜蛋白惊人地相似。细菌应激反应大约 30 年前,噬菌体休克蛋白 (Psp) 系统在细菌中被发现。“今天,我们知道 Psp 系统会响应多种类型的膜应力而被激活。然而,一些分子细节仍然令人费解,” 美因茨约翰内斯古腾堡大学膜蛋白组负责人德克施耐德(Dirk Schneider) 教授解释说。 “这就是为什么我们决定仔细研究 Psp 系统的核心蛋白。”施耐德及其同事最近发现了 Psp 代表 IM30 如何在细胞膜上形成保护性地毯状结构以应对膜应力。在他们的最新工作中,他们仔细研究了噬菌体休克蛋白 A (PspA),它在 Psp 系统中起着关键作用。 人类 酵母 细菌不同膜蛋白之间的结构相似性 [Benedikt Junglas、Dirk Schneider、Carsten Sachse]冷冻电子显微镜显示 PspA 形成长的螺旋形管,可以将生物膜包裹在内腔中。高分辨率图像首次显示了 PspA 如何局部溶解单个膜,然后将它们重塑为更大的单元,甚至介导新膜结构的形成。PspA 的原子低温电子显微结构:细长的分子是螺旋纳米棒的基本构建块(左)。灰度低温电子显微照片和示意图模型显示了掺入脂质的 PspA 管。“数千个 PspA 构建块可以组装成大型螺旋结构。因此,它们是我们冷冻电子显微结构分析的理想研究对象,”来自 Forschungszentrum Jülich 和 HHU Düsseldorf 的 Carsten Sachse 教授说。“在显微镜下,我们意识到 PspA 具有类似于 ESCRT-III 蛋白质的结构,我们的实验室已经在研究它,”他补充道。“这完全出人意料,表明阐明蛋白质结构是多么重要细节......数十亿年后,这两组蛋白质在遗传上已经发生了分歧,以至于只能根据它们的结构来检测它们的相似性。”“基于 PspA 和真核 ESCRT-III 蛋白的相似结构和功能特性,我们已将 PspA 鉴定为进化上保守的 ESCRT-III 膜重塑蛋白超家族的细菌成员,”作者在 Cell 中写道。研究发表在Cell 《细胞》上。符斌 供稿

膜蛋白相关的方案

  • 光散射法用于膜蛋白结构的研究
    膜蛋白和脂质体组成生物膜,生物膜对生命起着重要的作用。为了弄清膜蛋白在组成生物膜中所起的作用及功能,了解膜蛋白的结构非常重要。 膜蛋白通常只溶解在胶束溶液中,因此表征脂质体溶剂中低聚态的膜蛋白相当困难。本文利用多角度激光光散射仪(MALS)、紫外检测器(UV)与示差折光检测器(DRI)联用技术测定蛋白核、脂质体胶束、蛋白-脂质体复合物分子量以及各组分的含量。
  • NanoTemper工具为您的膜蛋白研究排忧解难!
    ● 研 究 难 点在药物开发和结构生物学研究领域中,有许多重要的靶点属于膜蛋白,例如G蛋白偶联受体(GPCRs),离子通道和膜转运蛋白等等,涉及多种生化功能和疾病发生机理,因此一直是研究人员关注的热点。然而,膜蛋白的研究存在着不少难点。让我们来看看NanoTemper公司的技术是如何帮助研究人员克服膜蛋白研究中的难题吧!
  • 人膜蛋白2抗体(MP2-Ab)ELISA试剂盒
    人膜蛋白2抗体(MP2-Ab)ELISA试剂盒中文名称 人膜蛋白2抗体(MP2-Ab)ELISA试剂盒英文名称 Human membrane protein antibody (MP2-Ab) ELISA Kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人膜蛋白2抗体(MP2-Ab)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人膜蛋白2抗体(MP2-Ab)抗原、生物素化的人膜蛋白2抗体(MP2-Ab)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人膜蛋白2抗体(MP2-Ab)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

膜蛋白相关的论坛

  • 整合蛋白和跨膜蛋白区别?跨膜蛋白制备详解

    [b][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白定义:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白是两类重要的蛋白质,它们在细胞分子水平上起着重要的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]整合蛋白,也称为内在蛋白或跨膜蛋白,部分或全部镶嵌在细胞膜中或内外两侧,以非极性氨基酸与脂双分子层的非极性疏水区相互作用而结合在质膜上。它们是生物膜的基本结构成分,许多具重要生理功能的膜蛋白均属整合蛋白,如膜结合的酶类、载体蛋白、通道蛋白、膜受体等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]跨膜蛋白,是可以跨越细胞膜的蛋白,它在细胞的信号传递系统中担当着重要的角色。跨膜蛋白在结构上可以分为单次跨膜、多次跨膜、多亚基跨膜等,它们具有能够跨越细胞膜的能力。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]整合蛋白和跨膜蛋白在位置、结构和功能上存在显著的差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①位置:整合蛋白主要存在于细胞质内,细胞核或其他非细胞膜结构中,它们容易在细胞中自由移动。而跨膜蛋白则嵌入细胞膜中,一部分位于细胞膜的胞外侧,另一部分位于细胞膜的胞内侧,形成了一个穿过细胞膜的通道。[/font][font=宋体][font=宋体]②结构:整合蛋白的结构通常由两个独立的部分组成,一个是靠近细胞膜的膜结合区域([/font][font=Calibri]TM[/font][font=宋体]),另一个是靠近细胞骨架的非膜结合区域([/font][font=Calibri]N-TM[/font][font=宋体])。当接受到外界的信号时,整合蛋白的[/font][font=Calibri]TM[/font][font=宋体]区域会被激活,把来自外界的信号转化为细胞内可以识别的信号,直接参与细胞信号传导系统中。[/font][/font][font=宋体]③功能:整合蛋白主要是用来从外界传达信号到细胞内,充当细胞与外界信号的桥梁。而跨膜蛋白则在细胞的信号传递系统中担当着重要的角色。[/font][font=宋体]总的来说,整合蛋白和跨膜蛋白在位置、结构和功能上存在显著的差异,这些差异使得它们在生物体中扮演着不同的角色。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白表达与制备服务[/b][/url],制备流程图:基因合成[/font][font=宋体]→载体构建→细胞转化[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]转染→蛋白表达→细胞收集→细胞破碎→膜脂提取→膜脂增溶→蛋白纯化→质量检测,同时义翘拥有[/font][/font][b][font=宋体]三大跨膜蛋白制备平台[/font][/b][font=宋体],可以为客户提供全面的多次跨膜蛋白产品和服务。同时,为基础研究和药物研发提供更加优质的原材料。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达,类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜,形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒(直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米),不含病毒核酸,不能进行自主复制,生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台,它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面,这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构,同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域,跨膜蛋白与膜的结合非常紧密,需要用去垢剂([/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体])才能从膜上洗涤下来,[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子,疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域,亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础,当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体],临界胶束浓度)时会形成微团,增溶后,去垢剂将蛋白周围的磷脂置换,从而实现收集目标膜蛋白的目的,后续再进行蛋白纯化,最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台,利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定,与天然的生物膜非常相似,使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式,一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物([/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体])组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台,如下图(左)所示,它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白,使其变为可溶性蛋白,组装完成的蛋白样品很稳定,更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白([/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体])的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台(下图右),它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来,然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例,可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台,利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性,制备出稳定的产品,满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font]

  • 跨膜蛋白与通道蛋白的区别:跨膜蛋白制备平台详解

    [font=宋体]跨膜蛋白是生物体内广泛存在的一类蛋白质,它们在细胞膜上以不同的方式与其相互作用,从而发挥各种生物学功能。根据不同的结构和功能,[/font][b][font=宋体]跨膜蛋白可以分为三种类型:通道型跨膜蛋白、受体型跨膜蛋白和泵型跨膜蛋白。[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通道型跨膜蛋白是跨膜蛋白中最为简单的类型,它们主要的功能是在细胞膜上形成一些具有选择性通透性的孔道,使得离子和小分子物质能够通过。通道型跨膜蛋白具有多个跨膜域,通常由[/font] [font=宋体]α 螺旋和 β 折叠两种二级结构组成。α 螺旋通道如 [/font][font=Calibri]K+ [/font][font=宋体]通道能够容纳阳离子,β 折叠如离子泵[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase [/font][font=宋体]能够承载各种离子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]受体型跨膜蛋白是一类比较复杂的蛋白质,它们能够接受信号分子的结合,从而调节细胞内的生物学路径。受体型跨膜蛋白通常由单个跨膜域和两个不同构的端基组成,其中一个端基是细胞外的受体结构域,能够特异性地与信号分子结合;另外一个端基是细胞内的调节结构域,能够将受体活性传递到细胞内部。受体型跨膜蛋白具有多种作用方式,如酪氨酸激酶受体,转录因子受体等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]泵型跨膜蛋白是一类能够通过能量输入来驱动物质运输的蛋白质。它们能够将离子或者小分子物质从低浓度区域转运到高浓度区域,从而维持细胞内的化学平衡和稳态。泵型跨膜蛋白一般由多个跨膜域组成,并能借助外源性能量如[/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]进行运输。常见的泵型跨膜蛋白有[/font][font=Calibri]Na+/K+-ATPase, H+/K+-ATPase[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供跨膜蛋白制备平台,包括:[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][font=Calibri]/Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]正确折叠的膜蛋白在细胞膜上表达,类病毒颗粒[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]通过出芽的方式包裹上携带有靶标蛋白的细胞膜,形成包膜的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]。它是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒(直径约[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]300[/font][font=宋体]纳米),不含病毒核酸,不能进行自主复制,生产操作过程中较为安全。产生的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]蛋白可直接像可溶蛋白一样进行包被进行[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州已成功开发[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台,它可以将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面,这种方法不仅可以保留膜蛋白的完整结构,同时也能够真实地模拟其在细胞膜上的位置和构象。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]利用[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]平台制备跨膜蛋白具有以下优势:[/font][/font][font=宋体]? 全长跨膜蛋白,保持完整的天然构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测、抗体筛选等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州搭建了基于[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]表达系统的[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]virus-like particle[/font][font=宋体])技术平台,能够将目的膜蛋白完整展示在[/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]表面,使其能够像普通蛋白一样进行检测,义翘神州目前可以为客户提供膜蛋白定制服务,助力药物研发进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]去垢剂技术平台[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于存在疏水结构域,跨膜蛋白与膜的结合非常紧密,需要用去垢剂([/font][font=Calibri]detergent[/font][font=宋体])才能从膜上洗涤下来,[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]作为一种两亲性分子,疏水尾部包裹目的蛋白的疏水区域,亲水头部位于与溶液接触的界面。微团的形成是膜蛋白增溶的基础,当去垢剂浓度高于[/font][font=Calibri]CMC[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]Critical micelle concentration[/font][font=宋体],临界胶束浓度)时会形成微团,增溶后,去垢剂将蛋白周围的磷脂置换,从而实现收集目标膜蛋白的目的,后续再进行蛋白纯化,最终蛋白呈现在含有[/font][font=Calibri]Detergent[/font][font=宋体]的溶液中。义翘神州成功搭建了去垢剂技术平台,利用该平台可有效提高跨膜蛋白的产量和纯度。[/font][/font][font=宋体]去垢剂技术平台的优势:[/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体]? 胶束为膜蛋白疏水基团提供保护并稳定构象[/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测等[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]结构稳定,与天然的生物膜非常相似,使得[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]能够很好地应用于膜蛋白的研究。目前[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]平台有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种方式,一种是基于苯乙烯马来酸酐共聚物([/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体])组装的[/font][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]平台,如下图(左)所示,它可以直接从细胞膜上提取膜蛋白,使其变为可溶性蛋白,组装完成的蛋白样品很稳定,更能维持蛋白的天然构象。另一种是基于膜骨架蛋白([/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体])的[/font][font=Calibri]MSP-Nanodisc[/font][font=宋体]平台(下图右),它需要先将膜蛋白利用去垢剂制备出来,然后再加入磷脂分子和[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]进行组装。通过调整磷脂、[/font][font=Calibri]MSP[/font][font=宋体]和待组装膜蛋白三者的比例,可以使得待组装膜蛋白在[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]中呈不同聚集状态。义翘神州已成功搭建了[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台,利用跨膜蛋白与磷脂结合能够维持其良好活性的特性,制备出稳定的产品,满足动物免疫、抗体筛选、[/font][font=Calibri]cell-based assays[/font][font=宋体]等场景。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]SMA-Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台的优势:[/font][/font][font=宋体]? 可精确定量[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]SMA[/font][font=宋体]共聚物包裹的膜蛋白稳定性更好,有助于更好地研究膜蛋白的结构和功能[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 适用于动物免疫、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]SPR/BLI[/font][font=宋体]检测、[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]阳性率检测及细胞实验等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 单次与多次跨膜蛋白的特点和功能:多次跨膜蛋白的意义

    [font=宋体][font=宋体]跨膜蛋白([/font][font=Calibri]TMEM[/font][font=宋体])是一种跨越细胞质膜的蛋白家族,允许细胞[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]细胞和细胞[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]环境之间的联系。结构决定性质,性质决定功能,一般单次跨膜主要起锚定作用,多次跨膜能形成疏水孔道,发挥运输的功能。这里我们将讨论膜蛋白的结构,并说明它们与脂质双分子层的不同关联方式。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]对膜成分而言,脂质分子数多,但膜蛋白质量较大[/font][/font][font=宋体][font=宋体]我们知道,脂质双分子层提供了细胞膜的基本结构,并作为膜两侧分子的渗透屏障,但是大多数膜的功能其实是由膜蛋白完成的。在动物中,蛋白质约占大多数质膜质量的[/font][font=Calibri]50%[/font][font=宋体],其余是脂质加上糖脂和糖基化蛋白中相对较少的碳水化合物。然而,由于脂质分子比蛋白质小得多,细胞膜通常含有的脂质分子大约是蛋白质分子的[/font][font=Calibri]50[/font][font=宋体]倍。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]不同类型的膜蛋白发挥诸多功能[/font][/font][font=宋体]膜蛋白不仅通过脂质双分子层运输特定的营养物质、代谢产物和离子;它们还有许多其他功能:有些将膜固定在两侧的大分子上;有些能作为受体,检测细胞环境中的化学信号,并将其传递到细胞内部;还有一些作为酶发挥功能,催化特定反应。每种类型的细胞膜都含有不同的蛋白质,反映了特定细胞膜的特殊功能。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]蛋白质可以通过多种方式与膜的脂双层相关联[/font][/font][font=宋体][font=宋体]直接附着在脂质双分子层上的蛋白质(如图[/font][font=Calibri]3-A,B,C[/font][font=宋体])只有用洗涤剂破坏双分子层才能被去除,这种蛋白质被称为膜内在蛋白,其余的膜蛋白称为膜外周蛋白(如图[/font][font=Calibri]3-D[/font][font=宋体]),它们可以通过更温和的提取过程从膜中释放出来,这一过程会干扰蛋白质与蛋白质之间的相互作用,但会使脂质双层结构保持完整。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]许多膜蛋白穿过脂双层,部分区域位于双层膜的两侧[/font][font=Calibri](A)[/font][font=宋体]。这些跨膜蛋白具有疏水性和亲水性区域。它们的疏水区域位于双层膜的内部,紧靠着脂质分子的疏水尾部。它们的亲水性区域暴露在膜的两侧的水环境中。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]有的膜蛋白几乎完全位于胞质,与脂质双分子层相互作用的是蛋白表面的[/font][font=宋体]α螺旋结构[/font][font=Calibri](B)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]有些蛋白质完全位于双层膜外(内侧或外层),仅通过一个或多个共价附着的脂类基团与膜相关联[/font][font=Calibri](C)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]还有些蛋白质通过与膜蛋白的相互作用,间接地与膜表面相结合[/font][font=Calibri](D)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]多肽通常以α螺旋的形式穿过脂双层[/font][/font][font=宋体][font=宋体]对于许多跨膜蛋白,多肽链只穿过膜一次,这些蛋白质中有许多是细胞外信号的受体。形成[/font][font=Calibri]a[/font][font=宋体]螺旋的氨基酸的疏水侧链与磷脂分子的疏水烃尾相接触,多肽主链的亲水部分在螺旋内部相互形成氢键。一个完全穿过膜的α螺旋结构需要包含[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]个氨基酸。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]膜蛋白[/font][font=Calibri]x[/font][font=宋体]射线结晶学的进展使许多膜蛋白的三维结构得以确定。根据这些主要特征构建模型(片段包含约[/font][font=Calibri]20-30[/font][font=宋体]个氨基酸、具有高度疏水性),通常可以从蛋白质的氨基酸序列预测多肽链的哪些部分延伸到脂双层。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]跨膜α螺旋常和其他α螺旋互作或组合形成孔道[/font][/font][font=宋体][font=宋体]有的跨膜蛋白形成水通道,允许水溶性分子穿过膜,这样的孔道不能由具有单一的、均匀疏水的、跨膜螺旋结构的蛋白质形成。形成孔隙的蛋白质更为复杂,通常具有一系列的[/font][font=宋体]α螺旋多次穿过双层膜。许多单通道膜蛋白形成同源或异源二聚体,这些二聚体由两个跨膜螺旋之间的非共价、但强而特异的相互作用结合在一起,这些螺旋的疏水氨基酸序列包含指导蛋白质[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]蛋白质相互作用的信息。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在有些包含多个跨膜结构的蛋白质中,跨膜区域是由包含疏水性和亲水性氨基酸侧链的螺旋形成的。这些氨基酸的排列使得疏水侧链落在螺旋的一侧,而亲水侧链则集中在螺旋的另一侧。在脂双层疏水环境中,这类[/font][font=宋体]α螺旋呈环状并排排列,疏水侧链暴露于膜的脂质上,亲水侧链通过脂质双层形成亲水孔的内衬。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6. [/font][font=宋体]一些β折叠片多次跨膜形成大的离子通道[/font][/font][font=宋体][font=宋体]虽然到目前为止,[/font][font=宋体]α螺旋是多肽链穿过脂双层的最常见的形式,某些多肽链却是以β折叠穿过脂双层。膜蛋白以β折叠片的形式穿过脂质双分子层,被弯曲成圆柱形,形成一个开放式的桶状结构,称为β折叠桶。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]β片层的数目变化较大,少的可以有[/font][font=Calibri]8[/font][font=宋体]个,多的可以多达[/font][font=Calibri]22[/font][font=宋体]个。面朝桶内的氨基酸侧链主要是亲水的,而桶外的那些接触脂双层疏水核心的侧链则完全是疏水的。与α螺旋不同,β折叠桶只能形成宽的通道,因为β折叠片弯曲成桶的紧密程度是有限制的,不如α螺旋灵活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]综上,膜的功能主要体现在膜蛋白的多样性上,膜蛋白的结构决定其功能。不同功能的膜蛋白其结构基础存在差异,因此其与膜骨架的关联方式也有不同。像膜偶联受体、膜偶联酶这些膜蛋白可能通过单次跨膜或者共价修饰,就能锚定在膜上实现其功能。而作用于底物转运的膜蛋白必须提供一个较大的亲水孔道,才能使水溶性的带电离子等底物通过,因此不同的[/font][font=宋体]α螺旋之间倾向于互作,或者同一个蛋白具有多个互作的α螺旋,或者通过β折叠形成桶状孔隙发挥功能。根据跨膜蛋白的疏水特性及跨膜区域的结构特点,可以对跨膜蛋白及其跨膜区段进行预测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][b]义翘神州提供三大[/b][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url][b]制备平台,有[/b][/font][font=Calibri]VLP[/font][font=宋体]技术平台、去垢剂技术平台、[/font][font=Calibri]Nanodisc[/font][font=宋体]技术平台,详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins[/font][/font][font=Calibri] [/font]

膜蛋白相关的资料

膜蛋白相关的仪器

  • Agilent ProteoAnalyzer 系统是一种平行毛细管电泳仪器,可自动进行还原型和非还原型蛋白质样品的毛细管电泳-十二烷基硫酸钠 (CE-SDS) 分析。 该系统能够在短短 30 min 内对 12 个样品进行分离,省去了 SDS-PAGE 凝胶制备、染色/脱色和分析的繁琐过程,让您专注于结果。ProteoAnalyzer 系统可分离 10 kDa 至 240 kDa 的蛋白质,能够在单次运行中分析宽分子量范围的蛋白质。 在每次分离之间可恢复各个毛细管的性能,因此可以分析不同的样品,包括单克隆抗体、生物仿制药、蛋白质纯化组分和粗裂解物。特性:分析时间短 — 只需 30 min 即可平行分析 12 个蛋白质样品支持各种样品类型 — 可靠地分离具有挑战性的蛋白质样品,如膜蛋白和粗裂解物高分离分辨率 — 分离糖基化和非糖基化亚型宽分子量范围 — 安捷伦宽范围蛋白质 P240 试剂盒可测量 10 至 240 kDa 的蛋白质高灵敏度 — 可检测 PBS 中浓度低至1 ng/µ L 的 BSA 蛋白更宽的样品浓度范围 — PBS 中 BSA 样品的线性动态范围为 2-2000 ng/µ L提高实验室效率 — 在当前正在进行分离的情况下,上样并设置下一次运行灵活的上样方式 — 可以在队列中上下移动样品以调整运行顺序仪器准备时间非常短 — 无需进行日常阵列处理,并使用室温下稳定的试剂性能指标:功耗150 VA宽度35 cm尺寸(宽 x 深 x 高)35 cm x 51 cm x 61 cm操作环境的相对湿度20 - 80 %每次运行的样品数12深度51 cm电源电压100 - 240 VAC电源频率47 - 63 Hz重量38.5 kg高度61 cm
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  • 安捷伦宽范围蛋白质 P240 试剂盒旨在为包括单克隆抗体、可溶性组分、膜组分和粗裂解物(分子量最高可达 240 kDa)在内的多种蛋白质提供解决方案。 两次运行之间可完全恢复毛细管电泳环境,确保了蛋白质分析的高度一致性。宽范围蛋白质 P240 试剂盒可在 30 min 内为 10 至 240 kDa 的蛋白的分离提供高分辨率结果。这样可以在单次自动电泳运行中分析宽分子量范围的复杂样品。 快速共价标记法避免了分析区域出现系统峰,同时提供了 3 个数量级的动态范围,能够检测低至 0.1% 的杂质。特性:快速分析 — 在大约 30 min 内平行分离 12 个样品准备时间短 — 只需 10 分钟的手动操作时间即可准备好样品广泛的定量范围 — 支持 2-2000 ng/µ L 的起始样品浓度支持各种样品类型 — 能够可靠地分离各种难分离的蛋白质样品,如膜蛋白和粗裂解物高分辨率 — 明确分离糖基化和非糖基化亚型无系统峰干扰 — 共价标记法可消除分离中的共迁移系统峰适用于多种应用 — 能够在还原和非还原条件下分析样品性能指标:保质期4 个月分子量测定范围LM only: 10 - 240 kDa LM and UM: 10 - 200 kDa bp分析时间30 min / 11 samples + 1 ladder min定量精度 25 % CV定量范围2 - 2,000 ng/µ L for BSA in PBS定量重现性20 - 2,000 ng/µ L BSA: 15% CV, 2 - 20 ng/µ L BSA: 25 % CV样品量1 µ L每个试剂盒的使用次数275灵敏度1 ng/µ L (BSA),CAII 的 PBS 溶液片段大小测定准确度LM only: 15% for BSA, CAII LM and UM: 10% for BSA, CAII片段大小测定分辨率 10% molecular weight resolution between 15 to 150 kDa (based upon ladder) R≥1 NIST mAb NGHC/HC (using reduced conditions) %片段大小测定精度LM only: 8% CV for BSA, CAII, GREMLIN-1, and NIST mAb (using reduced conditions), 10% CV for intact NIST mAb (using non-reduced conditions) LM and UM: 5% CV for BSA, CAII, GREMLIN-1 and NIST mAb (using reduced conditions) % CV
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  • 岛津集团发布新型PPSQ-51A单反应器蛋白测序仪和PPSQ-53A三重反应蛋白测序仪。 新PPSQ-51A / 53A蛋白质测序仪采用岛津SPD-M30A光电二极管阵列检测器,配有新型毛细管流通池,灵敏度是原型号标准检测池的10倍,能进行较长序列的蛋白质研究。 主要特点:1、在等度洗脱模式下进行PTH-氨基酸的分析,等度序列分析提供更稳定的保留时间。这意味着可以使用色谱减法取消在以前的周期中检测到的峰,方便用户识别正确的氨基酸。在等度洗脱模式下进行PTH-氨基酸分析也使实验室通过流动相回收减少废液的浪费,降低运行成本。2、操作简单,专业的蛋白质测序仪将对反应单元和高效液相色谱分析单元提供控制功能,便于进行序列分析。3、新PPSQ软件可配置为满足实验室的各种需要,无论是监管、研究和开发,还是学术。该软件符合FDA 21 CFR Part 11指南对安全、用户管理和审计跟踪的要求。易于使用的数据分析功能,简化操作,数据处理和报告。这些功能允许色谱的后处理、多重色谱的叠加、色谱减法、和氨基酸序列的自动估计。此外,PPSQ-51A / 53A音序器提供定制的报告,并对数据进行快速、全面的的图形显示。拥有以前机型的客户(31A/33A/51B/53B)可以升级现有系统为相同灵敏度,并能拥有和PPSQ-51A / 53A一样的软件。升级包在有高层次的灵活性以及数据库的标准版和客户端服务器版本中都可以使FDA 21 CFR Part 11合规。
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膜蛋白相关的耗材

  • RapiGest SF 蛋白酶解表面活性剂
    RapiGest SF 蛋白酶解表面活性剂RapiGest SF(表面活性剂)可根本性地提高蛋白酶解的速度和回收率。RapiGest SF是已经获得专利的阴离子表面活性剂,能够加速由蛋白酶如胰蛋白酶、Asp-N、Glu-C和Lys-C等酶所获得的酶解肽。许多疏水性蛋白质能够抵抗蛋白水解,因其裂解部位包埋在蛋白内部使内切蛋白酶接触不到。RapiGest SF是一种温和的变性剂,有助于溶解和展开蛋白质,从而使其更易于被裂解,同时又不变性或抑制常规蛋白酶的活性。1、提高疏水性蛋白的溶解度,进而改善酶消化2、可与各种酶兼容,不会引起蛋白质修饰3、与常规变性剂不同,本品不抑制酶活性4、有助于缩短酶解时间和减少蛋白酶的使用量5、可改善酶耐受型蛋白的消化过程,例如对膜蛋白6、属酸不稳定型表面活性剂,RapiGest降解产物不会干扰LC/MS或MALDI MS分析使用RapiGest SF有助于蛋白质的去糖基化使用各种内切酶对肌红蛋白进行酶解1小时RapiGest SF工作机理图示RapiGest不破坏内切蛋白酶的活性,因而显著优于其它变性剂胰蛋白酶*溶液 胰蛋白酶活性(%)* 胰蛋白酶*溶液 胰蛋白酶活性(%)*无添加剂 100 0.1% SDS/0.1%RapiGest 670.1% RapiGest 100 50%甲醇 290.5%?RapiGest 100 50%乙腈 870.1%?SDS 24 1M脲 970.5%?SDS 1 2M脲 83* 溶于50 mM碳酸氢铵(pH 7.9)的0.5 μg胰蛋白酶;0.2 mM BEAA** 根据delta BEAA吸光度@253 nm进行测定(5分钟内的斜率)RapiGest SF 酶解表面活性剂产品列表产品描述 部件号RapiGest SF 1 mg 瓶装 186001860RapiGest SF 1 mg 瓶装, 5/pk 186001861RapiGest SF 10 mg 瓶装 186002123RapiGest SF 50 mg 瓶装 186002122
  • 蛋白层析柱/蛋白纯化柱(螺纹,一端可调)
    上海宸乔生物科技有限公司提供两端螺纹接口蛋白层析柱,用螺纹法兰直接旋转即可,可以提供一端活塞杆可调或者两端活塞杆可调,柱管材质可以选择玻璃,PMMA,PP,玻璃管可以选择贴防爆膜或者不贴防爆膜蛋白层析分离柱在蛋白,多肽,抗体等等行业中占据了不容忽视的地位,广泛应用于制备分离的各类化合物。且种类齐全的填料以及柱管会为分离柱提供更良好的性能展示平台,保证最大程度满足客户的需要。在原有蛋白层析分离柱的特性上还兼具了以下特性:■ 耐高压:允许实验过程中使用较高的流速,加快实验进程以及适合硬基质的色谱填料。■ 防爆性:可以选择外贴防爆膜,防止玻璃管子爆裂,对人员造成伤害■ 可重复:一根柱管可多次使用,大大节约了您的成本。■ 可见性:分离带颜色复杂天然产物,您可以直观的看到分离色带■ 筛板:可以提供各种粒径的筛板,优良的分配效果,达到更好的分离度■ 载样量大■ 惰性材料■ 优异的流体结构一端柱床可调,即一端活塞杆可以自由上下运动,可以改变柱体积,蛋白层析柱/蛋白纯化柱(一端柱床可调)无夹套带夹套内径(mm)耐压(bar)长度(mm)柱床体积(ml)柱床高度(mm)货号(玻璃)货号(PMMA)货号(PP)货号(玻璃)10301000-70-100LK10100LK10100ALK10100PLN10100102004-1555-200LK10200LK10200ALK10200PLN102001040020-31255-400LK10400LK10400ALK10400PLN104001060035-47455-600LK10600LK10600ALK10600PLN106001080051-62655-800LK10800LK10800ALK10800PLN1080010100067-78855-1000LK101000LK101000ALK101000PLN10100015301000-170-100LK15100LK15100ALK15100PLN15100152009.7-3555-200LK15200LK15200ALK15200PLN152001540045-70255-400LK15400LK15400ALK15400PLN154001560080-106455-600LK15600LK15600ALK15600PLN1560015800116-141655-800LK15800LK15800ALK15800PLN15800151000151-176855-1000LK151000LK151000ALK151000PLN15100020301000-310-100LK20100LK20100ALK20100PLN201002020017-6355-200LK20200LK20200ALK20200PLN202002040080-126255-400LK20400LK20400ALK20400PLN2040020600143-188455-600LK20600LK20600ALK20600PLN2060020800205-251655-800LK20800LK20800ALK20800PLN20800201000268-314855-1000LK201000LK201000ALK201000PLN20100025251000-490-100LK25100LK25100ALK25100PLN251002520027-9855-200LK25200LK25200ALK25200PLN2520025400125-196255-400LK25400LK25400ALK25400PLN2540025600223-294455-600LK25600LK25600ALK25600PLN2560025800321-392655-800LK25800LK25800ALK25800PLN25800251000419-490855-1000LK251000LK251000ALK251000PLN25100037151000-1070-100LK40100LK40100ALK40100PLN401003720059-21455-200LK40200LK40200ALK40200PLN4020037400274-430255-400LK40400LK40400ALK40400PLN4040037600488-644455-600LK40600LK40600ALK40600PLN4060037800703-859655-800LK40800LK40800ALK40800PLN40800371000918-1074855-1000LK401000LK401000ALK401000PLN40100050101000-1960-100LK50100LK50100ALK50100PLN5010050200108-39255-200LK50200LK50200ALK50200PLN5020050400500-785255-400LK50400LK50400ALK50400PLN5040050600893-1177455-600LK50600LK50600ALK50600PLN50600508001285-1570655-800LK50800LK50800ALK50800PLN508005010001678-1962855-1000LK501000LK501000ALK501000PLN501000备注*带夹套表示可以通水或者油对整个色谱柱进行控温*PMMA:表示有机玻璃
  • 泰渡生物 入液口滤膜蛋白纯化系统
    101-104-402

膜蛋白相关的试剂

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