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HPLC中,溶剂的洗脱能力与溶剂极性相关。1、正相色谱的流动相:在正相色谱中,溶剂强度随极性的增强而增加。正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。2、反相色谱的流动相:在反相色谱中,溶剂强度随极性的增强而减弱。反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂(如甲醇、乙腈和四氢呋喃等)。极性调整剂的性质及所占比例对溶质的保留值和分离选择性有显著影响。一般情况下,甲醇-水系统满足多数样品的分离要求,且流动相粘度小,价格低,是反相色谱zui常用的流动相。乙腈-水系统与甲醇-水系统相比,乙腈的溶剂强度较高且粘度较小,可满足在紫外185~205nm处检测的要求,综合来看,乙腈-水系统优于甲醇-水系统。在分离含极性差别较大的多组分样品时,为了使各组分均有合适的k值并分离良好,需采用梯度洗脱。
03流动相和储液器被污染由于污染,噪音越来越大,检测器基线上升。污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统,而再以稳定的浓度流出来,所以在色谱图中不出多余的峰。用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶,流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一个大的伪峰。有时基线噪音突然增大或突然提高,都是因为反复加进新的流动相或系统用得太久(通宵)所造成的。新加进的流动相有污染物或者流动相长霉,繁殖了细菌。脏的储液器会污染清洁的流动相。每种流动相备有专用的储液器,或者定期报废储液器。
对于不同的流动相,我们能根据流动相中各组分的极性大小、以及各组分的比例组成,可以计算出流动相的极性大小吗?这个流动相的极性大小,对于我们的分析工作,有如何的意义?