流感实验室

截至目前，全国共报告21例人感染H7N9禽流感确诊病例，死亡6人。该病毒虽然不会在人与人之间传播，但是对于很多人而言，这是个陌生又恐怖的东西。而对于一群天天主动“找”病毒的“擒毒高手”来说，与包括人禽流感病毒在内的多种流感病毒打交道，完全是日常工作。昨日，商报记者走进海南省疾控中心国家级流感监测网络实验室，揭开H7N9病毒检测的神秘面纱,走进实验室看到的就是一台空气过滤器，经过了解才知道，这是用来保持室内空气的洁净的。 当然记者因为是首次走进这个“神秘空间”，冰冷、静谧是给人的第一印象。走进海南省疾控中心的6楼，映入眼帘的就是安装了空气过滤器的国家流感监测实验室。省疾控中心的流感监测网络实验室是国家级流感检测网络之一，开展病原微生物相关检测及突发公共卫生事件应急检测，为疾病预防控制提供及时准确的检测依据；承担着海南地区流感病毒的检测和上报任务。国家流感监测实验室有4间房，每一间都各司其职，有的检测登革热，有的检测手足口病，最靠里那间，是检测流感病毒的实验室。甲型H1N1、H5N1(禽流感的一种亚型)、H3N2、季节性流感等流感病毒的确诊报告，都是由这间房出来的。根据要求，想进实验室，得先“全副武装”：帽子、口罩、防护服、鞋套一样都不能少。省疾控中心相关负责人表示，这是为了防止感染，标本在没经过灭活处理情况下，拿出来就是活病毒，有一定的传播风险。当记者换好“装备”后，走进去才发现，实验室里的空气只能进去，因为这里有一个专门出口，并加装了空气过滤器，必须将病毒过滤掉后才能排出。

[B]real-time RT-PCR 方法检测甲型H1N1 流感操作规程[/B]（中文翻译版）CDC实时RTPCR(rRTPCR)检测猪流感操作规程(2009版)本规程所有权归属疾病控制中心，紧急状态时授权各公共卫生实验室使用。本规程不用作商业活动或赢利目的。概 述前 提： 本规程基于对rRT-PCR方法的基本掌握。 实验原理： 实时荧光定量RTPCR(rRTPCR)法检测猪流感的方案是用一组寡核苷酸引物和双重标记的TaqMan探针，对呼吸道样本或体外培养的猪流感病毒进行定性检测鉴定。InfA引物和探针为检测出甲型流感病毒而设计，swInfA引物和探针可特异性地检测出所有的猪甲型流感病毒，swH1引物和探针可特异性检测猪流感病毒H1亚型。本实验用于检测甲型流感阳性的疑似猪甲型流感感染病例的呼吸道样本。使用条件：一步法定量RT-PCR(Invitrogen Super Script III PlatinumOne-StepQuantitativeKit) 96孔板热循环系统，如应用生物系统TM实时PCR系统(7000, 7300, 7500,等)，BioRad实时PCR检测系统(iQTM 或 iQ5 TM)，或Stratagene定量多聚酶链反应仪(MX4000，MX3000 或 MX3005)。生物安全要求：样本处理应在相应的生物安全实验室完成样本要求：呼吸道样本包括：支气管肺泡灌洗液，气管抽吸物，痰，鼻咽或口咽洗液或拭子。拭子样本所用的拭子顶端应为人造材质（如聚脂或涤纶）、柄为铝制或塑料。不推荐使用棉头木柄的拭子。藻酸钙拭子采样不可取。排除标准：􀁺 未在2-4°C (≤4 天)或-70°C及以下保存的样本􀁺 以上未列的其它不当样本核酸提取： RT-PCR扩增效能依赖于样本模板RNA的质与量。RNA提取操作需经过检验核酸的纯度合格之后，再用于样本实验。商业化的操作程序中包括QIAamp 病毒RNA提取试剂盒，RNeasy小试剂盒 (QIAGEN公司)，罗氏MagNA Pure Compact RNA分离试剂盒, MagNA Pure LC RNA分离试剂盒II, 和罗氏MagNA总核酸纯化试剂盒，在推荐的操作程序下，可提取高纯度的RNA。免责声明：提到的厂家名仅用作举例，并不表示疾控中心认可。

各有关单位：受国家认监委的委托，我单位承担了“流感病毒分型及亚型实时荧光定量RT-PCR检测能力验证”（计划编号CNCA-14-B01）能力验证项目的实施和协调工作。根据国家认监委通知(国认实函13号)的要求，为使此次能力验证工作有序、顺利的开展，现将有关事项通知如下：一、开展本次实验室检测能力验证工作的目的是了解该检测领域的整体水平，本次实验室检测能力验证的结果是实验室在相关领域检测能力的客观反映。取得满意结果的实验室，国家认监委将建议有关部门在相应领域指定、授权、委托检验任务时，优先选用；并计入实验室参加能力验证活动的记录。二、凡具备流感病毒分型及亚型检测能力的各级疾病预防控制中心、医院传染病检测实验室，各出入境检验检疫局技术中心或国际旅行卫生保健中心以及其他具备条件的实验室可根据需要自愿报名参加本次能力验证活动。三、报名参加此次能力验证的实验室，按照国家认监委通知（国认实〔2014〕13号）需向承担单位缴纳能力验证成本费用。按照实际成本，需向项目承担单位支付能力验证费用1000 元。四、为保证此次能力验证计划的顺利进行，请各实验室于2014年5月31日前，通过http:///www.acas.com.cn 网站注册报名，同时在相关专栏下载报名表，传真或电子邮件至联系人 (注：纸质报名与网络报名需同时进行)。根据国家认监委的要求，对于测定结果不满意或结果可疑的实验室应进行补测，并另交纳补测费用。各单位在参加能力验证过程中如遇到问题，请及时与我联系。承担单位地址：北京朝阳区高碑店北路甲3号中国检验检疫科学研究院邮编：100123联系人：马老师 张老师电话：010-85773355转2093传真：010-85750771电子邮件： maxz@caiq.gov.cn中国检验检疫科学研究院二O一四年四月二十九日