尿囊素

尿囊素的HPLC检查方法？

[align=center][size=3][font=宋体][size=2]维权声明：本文为mengzhou原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。也请哪些垃圾网站不要随便转载，谢谢合作！[/size]山药中尿囊素提取方案研究试验[/font][/size][size=3][/size][/align][size=3][font=Times New Roman]1.[/font][/size][size=3][font=宋体]山药的成分主要有薯蓣皂苷元、粘[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]、淀粉、胆碱、氨基酸、尿囊素[/font][/size][font=Times New Roman][size=3]([/size][size=3]allantion)[/size][/font][size=3][font=宋体]、止杈素[/font][/size][size=3][font=Times New Roman](d[/font][/size][size=3][font=宋体]－[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]abscisin)[/font][/size][size=3][font=宋体]等，据报道尿囊素具有抗刺激物、麻醉镇痛、促进生长、消炎和抑菌作用，常用于治疗手足皲裂、鱼鳞病、多种角化皮肤病。尿囊素有广泛的生物活性，是山药的有效成分之一。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=Times New Roman]2.[/font][/size][size=3][font=宋体]尿囊素[/font][/size][size=3][font=宋体]不溶于冷水、乙醇、[/font][/size][size=3][font=宋体]乙醚及氯仿，可溶于热水、稀乙醇及丙三醇。因山药中含有淀粉，用热水提，难过滤，故用含水醇溶液作为提取溶剂。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=Times New Roman]3.[/font][/size][size=3][font=宋体]尿囊素提取方案的筛选[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=Times New Roman]3.1 [/font][/size][size=3][font=宋体]确定因素及水平[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=宋体]尿囊素的测定方法有用[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]70%[/font][/size][size=3][font=宋体]乙醇加热回流提取，也有用[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]40%[/font][/size][size=3][font=宋体]甲醇加热回流提取；还有文献报道用超声提取尿囊素含量。根据预试验结果，认为加热回流法提取尿囊素效果比较理想。在此基础上，对影响尿囊素提取效果的主要因素和水平进行正交试验设计分析（见表[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]1[/font][/size][size=3][font=宋体]）：提取溶剂（甲醇、乙醇）、溶剂浓度（[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]40%[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]70%[/font][/size][size=3][font=宋体]）、溶剂用量（[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]50ml[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]100ml[/font][/size][size=3][font=宋体]）及提取时间（[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]1h[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]3h[/font][/size][size=3][font=宋体]）。[/font][/size][size=3][/size][size=3][b][font=宋体]表[/font][font=Times New Roman]1 [/font][font=宋体]尿囊素提取试验的因素及水平[/font][/b][/size][align=center][table=96%][tr][td=1,3,16%][align=center][size=3][font=宋体]水平[/font][/size][/align][/td][td=4,1,83%][align=center][font=宋体]因[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]素[/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=宋体]浓度[/font][/size][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=宋体]溶剂[/font][/size][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=宋体]用量[/font][/size][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=宋体]时间[/font][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3][i]A[/i][/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3][i]B[/i][/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3][i]C[/i][/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3][i]D[/i][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,16%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3]40%[/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=宋体]甲醇[/font][/size][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3]50ml [/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1h[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,16%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2[/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][font=Times New Roman][size=3]70%[/size][/font][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=宋体]乙醇[/font][/size][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=Times New Roman]100ml[/font][/size][/align][/td][td=1,1,20%][align=center][size=3][font=Times New Roman]3h[/font][/size][/align][/td][/tr][/table][/align][size=3][font=Times New Roman]3.2 [/font][/size][size=3][font=宋体]正交试验[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=宋体]根据因素、水平数，选择正交试验表[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]L[sub]8[/sub](2[sup]7[/sup])[/font][/size][size=3][font=宋体]安排尿囊素提取工艺试验，试验设计及结果见表[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]2[/font][/size][size=3][font=宋体]。[/font][/size][size=3][/size][align=center][size=3][b][font=宋体]表[/font][font=Times New Roman]2 [/font][font=宋体]尿囊素提取工艺正交试验[/font][/b][/size][/align][align=center][table=96%][tr][td=1,4,9%][align=center][size=3][font=宋体]试[/font][font=@Batang] [/font][font=宋体]验[/font][font=@Batang] [/font][font=宋体]号[/font][/size][size=3][/size][/align][/td][td=7,1,82%][align=center][size=3][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]列[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]号[/font][/size][/align][/td][td=1,4,8%][align=center][size=3][font=宋体]结果[/font][/size][/align][align=center][font=Times New Roman][size=3][i]y[sub]i[/sub][/i](%)[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,11%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][font=Times New Roman][size=3]3[/size][/font][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][font=Times New Roman][size=3]4[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][font=Times New Roman][size=3]5[/size][/font][/align][/td][td=1,1,9%][align=center][font=Times New Roman][size=3]6[/size][/font][/align][/td][td=1,1,10%][align=center][font=Times New Roman][size=3]7[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=7,1,82%][align=center][size=3][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]因[/font][font=Times New Roman] [/font][font=宋体]素[/font][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,11%][align=center][i][font=宋体][size=3]A[/size][/font][/i][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][i][font=宋体][size=3]B[/size][/font][/i][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][i][font=宋体][size=3]A×B[/size][/font][/i][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][i][font=宋体][size=3]C[/size][/font][/i][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][i][font=宋体][size=3]A×C[/size][/font][/i][/align][/td][td=1,1,9%][align=center][i][font=宋体][size=3]B×C[/size][/font][/i][/align][/td][td=1,1,10%][align=center][i][font=宋体][size=3]D[/size][/font][/i][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,9%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,11%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1(40%)[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman]1([/font][font=宋体]甲醇[/font][font=Times New Roman])[/font][/size][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1(50ml)[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,9%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,10%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1(1h)[/size][/font][/align][/td][td=1,1,8%][align=center][font=Times New Roman][size=3]0.59[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,9%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2[/size][/font][/align][/td][td=1,1,11%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2(100ml)[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,9%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,10%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2(3h)[/size][/font][/align][/td][td=1,1,8%][align=center][font=Times New Roman][size=3]0.71[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,9%][align=center][font=Times New Roman][size=3]3[/size][/font][/align][/td][td=1,1,11%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman]2([/font][font=宋体]乙醇[/font][font=Times New Roman])[/font][/size][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,9%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,10%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2[/size][/font][/align][/td][td=1,1,8%][align=center][font=Times New Roman][size=3]0.68[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,9%][align=center][font=Times New Roman][size=3]4[/size][/font][/align][/td][td=1,1,11%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][font=Times New Roman][size=3]2[/size][/font][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,9%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][td=1,1,10%][align=center][font=Times New Roman][size=3]1[/size][/font][/align][/td][td=1,1,8%][align=center][font=Times New 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New Roman]R[sub]j[/sub][/font][/size][/align][/td][td=1,1,11%][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.037[/font][/size][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.008[/font][/size][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.037[/font][/size][/align][/td][td=1,1,14%][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.012[/font][/size][/align][/td][td=1,1,12%][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.012[/font][/size][/align][/td][td=1,1,9%][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.018[/font][/size][/align][/td][td=1,1,10%][align=center][size=3][font=Times New Roman]0.102[/font][/size][/align][/td][td=1,1,8%][align=center][size=3][font=Times New Roman][/font][/size][/align][/td][/tr][/table][/align][size=3][font=Times New Roman]3.3 [/font][/size][size=3][font=宋体]试验分析[/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=宋体]由表[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]2[/font][/size][size=3][font=宋体]直观分析知：[/font][/size][size=3][font=宋体]各因素[/font][/size][size=3][font=宋体]对试验结果的影响程度依次为[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]D[/font][/size][size=3][font=宋体]＞[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]A[/font][/size][size=3][font=宋体]＞[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]C[/font][/size][size=3][font=宋体]＞[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]B[/font][/size][size=3][font=宋体]，[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]A[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]B[/font][/size][size=3][font=宋体]之间交互作用的影响较大；尿囊素的最佳提取方案为[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]A[sub]2[/sub]B[sub]2[/sub]C[sub]2[/sub]D[sub]2[/sub][/font][/size][size=3][font=宋体]。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=Times New Roman]3.4 [/font][/size][size=3][font=宋体]方差分析[/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=宋体]为了判断不同因素对试验结果影响的显著程度，把作用不明显的因素合并为试验误差进行方差分析，结果见表[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]3[/font][/size][size=3][font=宋体]。[/font][/size][align=center][size=3][b][font=宋体]表[/font][font=Times New Roman]3 [/font][font=宋体]尿囊素提取工艺正交试验方差分析[/font][/b][/size][/align][align=center][table=100%][tr][td=1,1,8%][align=center][font=宋体][size=3]因素[/size][/font][/align][/td][td=1,1,21%][align=center][font=宋体][size=3]偏差平方和[/size][/font][/align][/td][td=1,1,13%][align=center][font=宋体][size=3]自由度[/size][/font][/align][/td][td=1,1,13%][align=center][size=3][i][font=宋体]F[/font][/i][sub][font=宋体]比[/font][/sub][font=宋体][/font][/size][/align][/td][td=1,1,16%][align=center][size=3][i][font=宋体]F[/font][/i][sub][font=宋体]0.05[/font][/sub][font=宋体][/font][/size][/align][/td][td=1,1,13%][align=center][size=3][i][font=宋体]F[/font][/i][sub][font=宋体]0.01[/font][/sub][font=宋体][/font][/size][/align][/td][td=1,1,13%][align=center][font=宋体][size=3]显著性[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,8%][align=center][font=Times New Roman][size=3]A[/size][/font][/align][/td][td=1,1,21%][align=center][font=Times 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Roman]A[/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]B[/font][/size][size=3][font=宋体]之间的交互作用对尿囊素的提取工艺影响存在显著性差异；溶剂类型和用量对提取工艺影响无显著性差异。故首先选择[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]A[sub]2[/sub][/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]B[sub]2[/sub][/font][/size][size=3][font=宋体]、[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]D[sub]2[/sub][/font][/size][size=3][font=宋体]；因素[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]C[/font][/size][size=3][font=宋体]影响不明显，但[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]C[sub]2[/sub][/font][/size][size=3][font=宋体]水平提取效果较好，综合分析以[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]A[sub]2[/sub]B[sub]2[/sub]C[sub]2[/sub]D[sub]2[/sub][/font][/size][size=3][font=宋体]为最佳提取工艺。[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=Times New Roman]3.5 [/font][/size][size=3][font=宋体]提取工艺的确定[/font][/size][size=3][/size][size=3][font=宋体]综上分析，确定最佳的提取工艺为[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]A[sub]2[/sub]B[sub]2[/sub]C[sub]2[/sub]D[sub]2[/sub][/font][/size][size=3][font=宋体]，即：用[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]70%[/font][/size][size=3][font=宋体]乙醇[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]100ml[/font][/size][size=3][font=宋体]，加热回流提取[/font][/size][size=3][font=Times New Roman]3[/font][/size][size=3][font=宋体]小时。[/font][/size][color=red][size=3][/size][/color]