羊睾丸

据中国网络电视台消息，台湾多种食品含有致癌添加剂事件日益扩大，根据台湾卫生部门的最新统计，64家厂商、94种产品确定使用了致癌添加剂。饮料、民众常吃的钙片、乳酸菌咀嚼片等都受到波及，连儿童感冒糖浆也可能含有塑化剂。 　　台湾卫生机构查出，多种乳酸菌保健食品，为了提高溶水性跟混浊度，都添加含塑化剂的起云剂，就连儿童常吃的羊乳片也未能幸免。此外由于上游厂商至少供应有毒原料给6家生技公司和制药公司，因此卫生机构现在怀疑，儿童喝的感冒糖浆可能也有问题。家长们个个都很紧张。 　　台湾的四大连锁便利店已经决定，所有的运动饮料一律下架接受检验，受到牵连的厂商迅速增加到168家。 　　目前，已有4000多箱问题饮料流入香港，香港食物安全中心呼吁市民暂停饮用，并呼吁进口商立即停止出售有关产品，个别进口商开始回收问题饮料。 　　除问题饮料流出台湾，售卖珍珠奶茶的英国商人，也疑似从台湾买到掺有塑化剂的原料，而更多问题原料也同步销售到大陆、美国、中东、东南亚等地。 　　起云剂是一种乳化剂，常使用于果汁、饮料、果冻和优格粉末，让饮料避免油水分层，看起来更均匀，属于合法的食品添加物。但DEHP是塑化剂，属环境荷尔蒙，会危害男性生殖能力，促使女性性早熟，台湾已列为第四类毒性化学物质，不得添加在食品里。 　　台“卫生署食品药物管理局”已确认，悦氏、Taiwan yes等运动饮料，及SunKist粒粒柠檬果汁等，共16批饮料、冲泡饮品，都含DEHP。 　　在台湾，13至18岁正值发育期的青少年是最爱喝运动等饮料的族群，有人一天甚至喝好几瓶，有的小男生担心自己会不会变“娘”，更多的家长则担心孩子以后无法传宗接代。 　　台“卫生署食品药物管理局”强调，据海外研究推论，成人每天喝浓度15ppm的问题饮料，即一天喝10公升(约29瓶)才会出现睾丸萎缩等症状；学者也指出，DEHP代谢快，一两天即排出体外，民众无需过度恐慌。 　　台湾成功大学环境医学研究所教授李俊璋表示，依民众营养调查发现，岛内13至18岁青少年饮用运动果汁等饮料的比率最高，但塑化剂一到二天就能透过汗水、尿液、粪便排出体外，民众只要停止吃问题食品，体内浓度就会快速下降，不必过于紧张。 　　林口长庚临床毒物科主任林杰梁表示，美国环保署将DEHP列为动物确定致癌物，动物研究发现，一旦停用，睾丸萎缩等雌性化的情形会逐渐回复为正常。但人类长期服用是否致癌，仍无定论。

人类生育力下降，已经成为越来越严重的社会问题。相关数据显示，全球不孕不育患病率从1997年的11.0%上升到了2017年的15.0%，根据推算，在人口增速放缓的当下，到2023年时，在不足7亿的育龄人口中，预计将有超过1.12亿人面临不孕不育。中国育龄夫妇的不孕不育率从20年前的2.5%-3%攀升到近年18%左右，不孕不育夫妻约有6000万对。随着环境污染、生育年龄推迟、生活压力等原因，不孕不育夫妇人数还在不断增加。　　生育危机的到来，让更多科学家瞄准生育问题，希望能够借助更多科学手段缓解这一难题。近日，日本京都大学的研究人员在 Cell 子刊 《Cell Stem Cell 》上发表了题为“In vitro reconstitution of the whole male germ-cell development from mouse pluripotent stem cells ”的研究文章，研究人员通过小鼠多能干细胞分化出了有功能的精子，并且用这些精子给雌鼠授精，成功诞生了健康、有生育能力的后代。研究人员表示，这为在试管中产生男性生殖细胞提供了迄今为止最全面的模型。　　多能干细胞(Pluripotent Stem Cells)是一类具有自我更新、自我复制能力的多潜能细胞，它不仅可以帮助我们理解人类发育过程中的复杂事件，更重要的是，它在器官再生、修复和疾病治疗方面极具应用价值。此前，国内外都已经拥有了利用干细胞培育人造精子的案例，但是，很少有研究会考虑培育阶段的关键生理过程，而此次发表的研究，则填补了这一空白，以一种忠实于发育和生理学的方式在体外重建了男性生殖细胞发育过程。　　男性生殖细胞发育包括三个不同的阶段：第一阶段开始于原始生殖细胞(PGC)的规范化，并通过表观遗传重编程将其分化为生殖细胞 第二阶段涉及男性的性别决定以及随后的精原细胞/精原干细胞(SSC)的分化，这一阶段将同时获得雄激素表观基因组 第三阶段是精原细胞/精原干细胞的精子生成阶段，通过减数分裂和精子生成产生单倍体精子。　　研究人员模拟了这一自然发育阶段来培育人造精子：首先，将干细胞分化为原始生殖细胞 然后分化为精原细胞 最后分化为精子。其中，第二阶段面临的挑战最大，先前建立的小鼠精原干细胞制造方法所需的培养时间长，比在体内分化慢一周左右，并且生成精子的效率较低，不到20%，因此，研究团队决定对这一分化过程进行优化。　　(图注：在小鼠模型中体外重建雄性生殖细胞发育流程图)　　针对第二阶段，研究人员建立了一种“重建睾丸新方法”(new reconstituted testis method)，改进中间培养液，以气相-液相培养法制造出雄性生殖细胞。他们在8种不同的条件下测试了10000多个细胞。幸运的是，分化得到的精原干细胞与小鼠睾丸中的细胞有许多共同的特性，包括关键基因的表达、表观遗传学以及逆转录转座子的瞬时上调。　　为了证实分化得到的精原干细胞与体内产生的相同，研究人员将这些精原干细胞注入到小鼠睾丸，让它们发育成精子细胞，然后收集这些精子并注射到卵子中形成胚胎。这些胚胎最终帮助小鼠成功产下健康、可育的后代。　　此次的研究，向我们真实再现了雄性生殖细胞发育的第二阶段，同时也表明了将小鼠多能干细胞分化为精原细胞样细胞和健康精子的可行性，而这一试验下的培育过程，让多能干细胞分化出的精原细胞在体内和体外均具有强大的生精功能。随着生物技术的进一步迭代，体外配子形成研究将成为促进基本生殖细胞生物学和创造新医学应用的基础。希望这一技术研究能够带来更快速的进展，为更多群体谋福音。

在北京冬奥会的精彩的比赛之外，也有一些不和谐的消息传来：作为围观群众，你可能经常在与兴奋剂有关的新闻中听到“血检”“尿检”等字眼，但是，兴奋剂到底是怎么被检测出来的？在2022冬奥会中，北京冬奥组委会又使用了什么检测兴奋剂的新手段呢？兴奋剂检测：色谱+质谱经过与兴奋剂数十年的斗争，目前国际上对兴奋剂分子的检测、甄别技术已经越发健全了。虽然北京冬奥组委会尚没有公布本次奥运会检测兴奋剂的具体方法，但我们可以从历次大型体育赛事的常规检测方法中知晓兴奋剂检测的原理。常规来讲，体育赛事中兴奋剂的检测大多是先将运动员生物样本中的各种分子萃取、分离，然后再依次确定这些分子“身份”。虽然从运动员身上取来的样品一般都是液体样品，如血液，尿液，汗液等，但在检测的过程中，实际上是分了气体、液体两条赛道的。尿液是最常用到的检测标本，而血液样品主要用于检测那些一般不容易进入尿液里的分子，如生长激素、红细胞生成素等蛋白/糖蛋白类激素，以及外源性红细胞等可以提高在赛事中表现力的活性生物制品。尿液中一部分较容易挥发的分子（如一部分小分子类固醇类兴奋剂）会参加气体赛道的检测，而血液以及尿液中剩下的那些分子量比较大且表现较为“老实”的分子则会出现在液体检测的赛道中。目前兴奋剂分析的大致流程检测step 1——色谱分离不同分子虽然赛道不尽相同，但在气体与液体赛道中不同分子的检测过程却殊途同归。这两种检测方式的第一步都是先将复杂样品中所含有的各种分子分隔开，让它们乖乖排队站好。液相色谱/气相色谱技术（A）典型的液相色谱结构示意图，其中横向柱状者为LC分离柱。（B）气相色谱结构简图，其中状如线圈者为GC分离柱。（C）一种以芯片式集成于硅片表面的微型GC分离柱。通过样品中不同分子的分子质量、所带电荷、亲疏水性等物理特征的区别，可以将不同的分子以一定的规律分开，这种方法被称为“色谱”（Chromatography）。这就好比让这些分子跑一个漫长的马拉松，然后通过漫长的路程区分出它们“耐力”的区别。色谱的名字其实是源于百年前用碳酸钙从树叶提取物中分离不同植物色素的俄国植物学家米哈伊尔茨维特（Михаил Семёнович Цвет）。相信这个实验，不少朋友在初高中生物课上就已经学习并体验过了（用滤纸从树叶汁中分离出叶绿素A，叶绿素B，叶黄素和β胡萝卜素）。但在今天，运用色谱技术来分离分子的物理特征中倒是很少包括分子颜色等光学特征了。在现代色谱仪中用来分离分子的原件，叫做分离柱，现在一般被“生化环材实验狗”们称为柱子。一般来讲就是一根细长管道中填满了能与分子发生作用的填料。液相色谱(Liquid Chromatography, LC)中使用的柱子看起来较为短粗（长度一般不超过一米），而在气相色谱(Gas Chromatography, GC)中，由于气体分子与填料的相互作用较弱，分离不同分子所需的填料距离往往需要5-10米甚至更长。因为这个原因，气相色谱的分离柱看起来其实更像一团线圈。一台比较典型的质谱分析仪检测step 2——质谱仪验明正身不管是样品中的液体分子还是气体分子，它们在通过色谱仪实现不同分子的分离之后，面临的下一道关卡都是能够给它们“验明正身”的质谱仪(MS)。质谱仪可以将色谱分离纯化后的分子进行电离，然后分析它们的“特征指纹”——质谱，从而确定这个分子的真实身份。值得注意的是，目前在兴奋剂检测领域里有多种不同且常见的质谱技术，它们都有自己的独门绝技。例如主要用于检测痕量兴奋剂的DFS 高分辨双聚焦磁质谱和主要用于区分内源性和外源性睾丸酮的DELTA V 同位素质谱等（人工合成的睾丸酮往往具有更高的碳同位素一致性，而人体自己产生的睾丸酮分子内的碳原子会含有一部分C13或C14）。说到睾丸酮，其实还有一段很惊险的旧事，就发生在我们非常熟悉的“不懂球的胖子”——刘国梁身上。1999年世乒赛上，刘国梁被查出血清表睾酮（一种睾丸酮变体）偏高，被怀疑是服用了外源性的兴奋剂，险些被禁赛。但实际上，他的血清睾丸酮水平异常是他自己的生理情况导致的（也许天生骨骼清奇？），并非服用兴奋剂。当时正是靠同位素质谱这一新技术以及国际乒联的多次飞行抽检，才让刘国梁洗清了冤屈。虽然目前色谱+质谱(LC-MS/GC-MS)联用法仍然是兴奋剂检测的黄金标准，但其它一些技术也在这些年逐渐崭露头角。如基于微流控免疫分析的汗液中特殊分子（毒品、兴奋剂等）快检技术（可在20-30分子内完成测试），针对一些常见兴奋剂（如麻黄碱类）的ELISA免疫分析试剂盒，走电化学、毛细管电泳等技术路线的兴奋剂检测技术等等。北京冬奥会：干血点技术首次正式使用不光是检测技术，运动员样品的运输保存技术、样品提取技术对非法兴奋剂的有效检出也有很大的影响。正如前文所说，传统意义上运动员的生物检材一般包括血液/血清以及尿液。为了防止尿样/血样中的兴奋剂分子被水解或在酶的影响下失活，样本的储存运输条件相当苛刻，比如，样本需要在冷藏（4︒C）的环境下尽快送检，而需要长期储存的样品则必须被维持在-20︒C之下。2020年，国际兴奋剂检测机ITA还专门设立了一个用以长期储存样品的保存设施，可将运动员身上采集的各类标本保存十年以上。此外，样品运输到实验室之后，还需要经过比较复杂的萃取流程，在排除掉细胞与蛋白的干扰后，才能进入色谱/质谱检测的流程。在三种不同滤纸上的干血点。血液滴在试纸上后会在30分钟左右的时间内逐渐干燥。但一般为保险起见，风干时间至少为2小时在经过东京奥运会的试验之后，北京冬奥会的兴奋剂检测流程中正式纳入了一种新的样本采集/运输技术——干血点（Dry Blood Spot, DBS）技术。其实这个技术说起来非常容易理解。就是将运动员的一滴血液（可为静脉血/指尖血）滴在滤纸（或硝酸纤维素膜）上，待其自然风干两三个小时即可制成。干血点技术并不是什么新技术，它曾在人类与艾滋病、乙型/丙型肝炎、疟疾等传染病的斗争中起到了很大的作用，尤其是在欠发达地区病人的样本采集活动中被广泛应用。单纯针对兴奋剂检测而言，在干血点风干的过程中，不仅样品中兴奋剂小分子的浓度可以得到浓缩，同时血液中所含的细胞也会失水而死。由于没有了水和酶的干扰，干血点样品便非常稳定，可以在室温条件下保存数日乃至数周。也就是说，在未来的奥运会中，甚至可以不用携带保温设备，仅通过信封这种简单的封装方式就能运输样品。与此同时，由于干血点样品中几乎不含水份，因此在使用甲醇等特殊有机溶剂时更有利于一些疏水性有机物的萃取。这些技术优点都有助于提高兴奋剂在后续气相色谱/液相色谱/质谱等测试中的检出能力。结语俗话说，道高一尺魔高一丈，即便是拥有了这么多反兴奋剂的先进技术和设备，还是有少数运动员会铤而走险服用兴奋剂。要想保证竞赛完全公平，仍然是一项非常难做到的任务，反兴奋剂还需要各方共同努力。